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Bmi-1缺失導致小鼠牙和下頜骨發(fā)育障礙

發(fā)布時間:2020-07-25 17:54
【摘要】:目的探討B(tài)mi-1基因在小鼠牙齒和下頜骨發(fā)育中的作用。方法利用利用影像學、組織學和組織化學及圖像分析方法比較分析了2~4周齡同窩野生型和Bmi-1基因敲除小鼠牙齒和下頜骨的表型差異。結果與同窩野生型小鼠相比,Bmi-1基因敲除小鼠牙齒和下頜骨礦化明顯降低;牙量和下頜骨骨量也明顯降低;成骨細胞數和堿性磷酸酶陽性面積明顯降低,而TRAP陽性破骨細胞數無明顯變化。結論 Bmi-1基因缺失引起小鼠牙形成和成骨細胞骨形成降低導致小鼠下頜骨牙量和骨量降低。因此,Bmi-1具有促進牙和下頜骨發(fā)育的作用。
【圖文】:

電壓圖,HE染色,擴增產物,基因型鑒定


僅有Bmi-1擴增產物為687 bp條帶為野生型,僅有NEO擴增產物399 bp條帶為純合子, 2條擴增產物均有者為雜合子(圖1)。+/+:野生型;-/-: Bmi-1純合子; +/-: Bmi-1雜合子圖1 小鼠的基因型鑒定Fig1 Identification ofmouse genotypes1. 2. 2 取材 小鼠生長至2、3、4周以后,常規(guī)頸椎脫臼處死,解剖分離小鼠的下頜骨, 4%多聚甲醛固定過夜。左側下頜骨用于X射線攝影和顯微CT檢測;右側下頜骨用乙二胺四乙酸在4℃脫鈣15~20d,常規(guī)脫水,石蠟包埋,按下頜第一磨牙近中根管頰舌向作5μm連續(xù)切片。切片標本用于HE染色和組織化學染色。1. 2. 3 X射線攝影 未脫鈣的野生型和純合子小鼠的下頜骨使用Faxitron model 805 radiographic in-spection system(德國Faxitron Contact公司)進行攝片, (電壓22 kV

柱狀圖,周齡,小鼠,圖片


2. 3 Bmi-1缺失對成牙影響為了明確Bmi-1-/-小形成障礙有關,我們利用法,觀察了4周齡同窩野細胞的形態(tài)變化,并定量本質厚度的變化。結果顯胞呈柱狀規(guī)則排列,而Bm列紊亂。第一磨牙根管及析結果發(fā)現在Bmi-1-/-小顯降低(圖4A、B)。提示低可能與成牙本質細胞形2. 4 Bmi-1缺失對下頜骨為了明確Bmi-1-/-小

的影響,骨量,小鼠,下頜骨


圖3 Bmi-1缺失對小鼠牙量和下頜骨骨量的影響Fig3 Effect ofBm i-1deficiency on tooth volum e and mandible bone volum emi-1缺失對下頜骨破骨細胞骨吸收的影響了明確Bmi-1-/-小鼠下頜骨骨量降低是否與胞骨吸收能力加強有關,我們利用TRAP組染色及圖像分析的方法,觀察了牙槽骨破骨細胞數的改變。結果顯示:TRAP陽性的數在Bmi-1-/-小鼠與野生型小鼠沒有顯著性6)。說明Bmi-1缺失引起的下頜骨骨量降于破骨細胞骨吸收增加造成的。育異常,如通過茜紅素和奧新藍雙染揭

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7 許亦權;胡敏;謝e

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