【摘要】：目的研究編碼亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)基因的兩個常見突變位點C677T和A1298C與中國漢族人群非綜合征型唇腭裂(Nonsyndromic orofacial clefts, NSOC)發(fā)生的相關性。 方法病例組選取2008年9月至2010年1月期間在南京醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院唇腭裂外科病房住院的非綜合征型唇腭裂患者200名,對照組選自同期在南京市兒童醫(yī)院門診就診的健康兒童213名,無唇腭裂,無全身系統(tǒng)疾病或先天畸形。兩組人群在年齡、性別、居住地方面匹配。使用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性對MTHFR多態(tài)位點進行基因分型。 結果非綜合征型唇腭裂又可分為單純唇裂(cleft lip only, CLO)、唇裂合并腭裂(cleft lip with or without palate,CLP)及腭裂(cleft palate only,CPO)。單純唇裂和唇裂合并腭裂具有相似的發(fā)病機制,合并為一組,稱為唇裂伴或不伴腭裂(cleft lip with or without cleft palate,CL/P)。在對照組中,三種基因型的頻率分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律(MTHFR C677T為P=0.24, MTHFR A1298C為P=0.54)。MTHFR C677T對照組與病例組的基因型分布無統(tǒng)計學差異( P0.05 ),純合突變型TT和總突變型(CT/TT)兒童罹患NSOC的風險分別是CC基因型兒童的1.84倍及1.57倍。進一步分層分析發(fā)現(xiàn)TT基因型和CT基因型能分別顯著增加兒童CL/P和CLO的發(fā)病風險。MTHFR A1298C病例組和對照組在基因型頻率和等位基因頻率有統(tǒng)計學差異(P0.05),攜帶雜合突變型AC和總突變型(AC/CC)的兒童罹患NSOC的風險比攜帶野生純合子AA基因型兒童低。分層分析中,AC基因型和總突變型(AC/CC)可降低罹患CLP及CL/P的風險。 結論MTHFR C677T可能為中國漢族人群NSOC的危險因素,而MTHFR A1298C有可能是NSOC發(fā)生的保護因素。
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R783.5
【圖文】：

圖 1 人體內(nèi)葉酸及一碳單位代謝通路橢圓形框表示酶，方框表示反應物，點線橢圓形框表示細胞膜，實線箭頭表示酶促反應，虛線表示跨膜反應，點線箭頭表示反應所產(chǎn)生的生物功能。5-CH3THF 表示 5-甲基甲氫葉酸鹽；5,10-CH=THF 表示 5,10-次甲基四氫葉酸酯；5,10-CH2-THF 表示 5,10-亞甲基四氫葉酸；10f-THF 表示 10-甲酰四氫葉酸；AdoMet 表示 S-腺苷甲硫氨酸；AdoHcy 表示 S-腺苷高半胱氨酸；Hcy-tl 表示同型半胱氨酸硫代內(nèi)脂；Met 表示甲硫氨酸；THF 表示四氫葉酸酯。的高同型半胱氨酸血癥。研究發(fā)現(xiàn)，MTHFR 677TT 基因型情況下其酶的活性是CC 基因的 30％，CT 基因型情況下其酶的活性是 CC 型的 65％[50]。MTHFR 677T等位基因的出現(xiàn)常伴隨著新生兒的出生缺陷，這可能是由于在母親體內(nèi)的甲基化作用使新生兒的 MTHFR 表達減少引起的。 Brouns 等[51]發(fā)現(xiàn)當 MTHFRC677C>T 多態(tài)性、葉酸降低、Vb12 減少。會增加出生缺陷的危險性。而 A1298C

南京物的酶切和酶切片段電泳觀察7T 和 A1298C 位點所對應的限制性內(nèi)切酶分物 5μl，限制性內(nèi)切酶 5U，配套緩沖液 1μl，度消化過夜。取全部酶切產(chǎn)物與 1μl 溴酚藍80V 電泳約 60 分鐘，紫外透射反射儀檢測酶型經(jīng)電泳后呈長度不同的片段，見圖 2-5。

宜的溫度消化過夜。取全部酶切產(chǎn)物與 1μl 溴酚藍混勻恒壓 80V 電泳約 60 分鐘，紫外透射反射儀檢測酶切結同基因型經(jīng)電泳后呈長度不同的片段，見圖 2-5。圖 2 MTHFR C677T PCR 電泳圖2000 marker；1-3,5-8 泳道：MTHFR C677T PCR 產(chǎn)物；4,9 泳道

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 黃永清;石冰;;干擾素調(diào)節(jié)因子-6基因多態(tài)性與非綜合征型唇腭裂的相關性研究[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2007年02期

2 袁奎封;來慶國;周曉紅;秦一飛;;漢族人轉化生長因子-α基因多態(tài)性與環(huán)境因素和非綜合征性唇腭裂的關系[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2007年03期

3 蒼松,焦曉輝,王麗,于e

本文編號：2762402