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軟食喂養(yǎng)對(duì)發(fā)育期大鼠髁突軟骨中細(xì)胞增殖和凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-07-15 00:50
【摘要】: 髁突軟骨是下頜骨重要的生長(zhǎng)發(fā)育中心,同時(shí)也是顳下頜關(guān)節(jié)髁突的應(yīng)力敏感區(qū)。作為繼發(fā)性軟骨,髁突軟骨的正常生長(zhǎng)發(fā)育需要功能負(fù)荷的刺激。正常的咀嚼力對(duì)于維持和促進(jìn)髁突軟骨的生長(zhǎng)十分必要,咀嚼力改變與髁突軟骨生長(zhǎng)發(fā)育間的關(guān)系一直是研究的熱點(diǎn)。咀嚼力減小會(huì)抑制髁突軟骨的生長(zhǎng),但具體的調(diào)控機(jī)制一直在探討中。軟骨細(xì)胞的增殖和凋亡是髁突軟骨發(fā)育中重要的生物學(xué)基礎(chǔ),而B(niǎo)cl-2基因家族是軟骨細(xì)胞凋亡調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵因素。但是在發(fā)育階段,關(guān)于髁突軟骨細(xì)胞增殖和凋亡在咀嚼力降低時(shí)的變化,以及此過(guò)程中Bcl-2基因家族調(diào)節(jié)作用的研究極少。因此,本研究分別以軟、硬食喂養(yǎng)發(fā)育期大鼠,以探討軟食喂養(yǎng)導(dǎo)致的咀嚼力降低對(duì)髁突軟骨細(xì)胞增殖和凋亡的影響;以及此過(guò)程中Bcl-2基因家族的調(diào)控機(jī)制。 第一部分軟食喂養(yǎng)對(duì)發(fā)育期大鼠髁突軟骨組織形態(tài)學(xué)的影響 目的:研究軟食喂養(yǎng)對(duì)斷乳后大鼠髁突前后徑長(zhǎng)度,髁突軟骨厚度,以及髁突軟骨組織學(xué)的影響。 方法:40只剛斷乳的雄性SD大鼠,隨機(jī)分為兩組,每組20只。其中一組為硬食組,喂以標(biāo)準(zhǔn)的塊狀鼠糧;另一組為軟食組,以粉末狀鼠糧喂養(yǎng)。于大鼠4w、5w、6w、7w齡時(shí),稱重、處死,取雙側(cè)完整的髁突組織,一側(cè)進(jìn)行包埋、切片,HE染色,光鏡下測(cè)量髁突前后徑長(zhǎng)度和髁突前斜面中上部軟骨的厚度。另一側(cè)用于第三部分RT-PCR實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果: 1.實(shí)驗(yàn)期間,兩組大鼠體重都有顯著增長(zhǎng),在各時(shí)間點(diǎn),軟、硬食兩組間均無(wú)顯著性差異; 2.從4w到7w,兩組大鼠髁突前后徑長(zhǎng)度明顯增加,在各時(shí)間點(diǎn),軟食組的髁突長(zhǎng)度均明顯低于硬食組; 3.從4w到7w,兩組大鼠髁突前斜面中上部軟骨逐步變薄,在各時(shí)間點(diǎn),軟食組的軟骨厚度均低于硬食組。 結(jié)論:軟食喂養(yǎng)不影響大鼠體重的增加。但其可能引起咀嚼力降低,會(huì)導(dǎo)致下頜髁突前后徑長(zhǎng)度和髁突軟骨厚度的降低。表明在軟食喂養(yǎng)的情況下,發(fā)育期大鼠髁突的生長(zhǎng)不充分,可能與咀嚼力降低有關(guān)。 第二部分軟食喂養(yǎng)對(duì)發(fā)育期大鼠髁突軟骨中細(xì)胞增殖和凋亡的影響 目的:研究軟食喂養(yǎng)對(duì)發(fā)育期大鼠下頜髁突軟骨細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡活性的影響。 方法:分別采用免疫組織化學(xué)染色和TUNEL染色,觀察髁突前斜面中上部軟骨中增殖細(xì)胞核抗原陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和凋亡細(xì)胞數(shù)。 結(jié)果: 1.PCNA陽(yáng)性細(xì)胞主要集中于軟骨增殖層和肥大層。從4w到7w,PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在軟、硬食組都逐步上升。但在各相同時(shí)間點(diǎn),軟、硬食組的PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2.凋亡細(xì)胞主要分布在增殖層的深部和肥大層。從4w到7w,硬食組大鼠髁突軟骨中凋亡細(xì)胞數(shù)基本保持一致,而軟食組凋亡細(xì)胞數(shù)隨時(shí)間推移而降低,但在4w、5w、6w時(shí),軟食組的凋亡細(xì)胞數(shù)均明顯多于同期硬食組。 結(jié)論:軟食喂養(yǎng)對(duì)這一時(shí)期大鼠髁突軟骨中的細(xì)胞增殖活性影響不大,但卻使細(xì)胞凋亡的數(shù)量增加,提示軟食喂養(yǎng)可能加速了髁突軟骨中細(xì)胞的分化、成熟、凋亡,進(jìn)而影響髁突的正常發(fā)育。 第三部分軟食喂養(yǎng)對(duì)發(fā)育期大鼠髁突軟骨中Bax和Bcl-2表達(dá)的影響 目的:研究軟食喂養(yǎng)情況下,發(fā)育期大鼠下頜髁突軟骨中的Bax和Bcl-2,在蛋白水平和mRNA水平表達(dá)的變化。 方法:采用免疫組織化學(xué)染色方法,觀察髁突前斜面中上部軟骨中Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)的變化;采用RT-PCR方法檢測(cè)整個(gè)髁突軟骨中Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表達(dá)水平的變化。 結(jié)果: 1.在4w到6w,硬食組髁突軟骨中,Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)強(qiáng)度均明顯增加,7w時(shí)都降低。軟食組Bax蛋白表達(dá)強(qiáng)度在各時(shí)間點(diǎn)基本一致,6w和7w時(shí)的表達(dá)強(qiáng)度明顯低于同時(shí)間點(diǎn)的硬食組;在各時(shí)間點(diǎn),軟食組Bcl-2蛋白表達(dá)強(qiáng)度均明顯低于同時(shí)間點(diǎn)的硬食組。在4w和5w時(shí),軟食組的Bax與Bcl-2蛋白表達(dá)強(qiáng)度的比值明顯高于硬食組。 2.硬食組大鼠髁突軟骨中Bax mRNA和Bcl-2 mRNA的表達(dá)均隨時(shí)間推移而降低。軟食喂養(yǎng)對(duì)Bcl-2 mRNA表達(dá)的影響不大,但卻使Bax mRNA表達(dá)上升。軟食組Bax mRNA與Bcl-2 mRNA的比值在6w和7w時(shí)明顯高于硬食組。 結(jié)論:結(jié)果提示軟食喂養(yǎng)導(dǎo)致的髁突軟骨中凋亡細(xì)胞數(shù)量的變化受到Bcl-2基因家族的調(diào)控。
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號(hào)】:R782.6
【圖文】:

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軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博上學(xué)位論文圖1一5.4w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一6.5w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一7.6w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一8.,w大鼠裸突硬食組HEx16圖1一9.4w裸突軟骨硬食組HEx200圖1一10.7w裸突軟骨硬食組HEx200

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軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博上學(xué)位論文圖1一5.4w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一6.5w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一7.6w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一8.,w大鼠裸突硬食組HEx16圖1一9.4w裸突軟骨硬食組HEx200圖1一10.7w裸突軟骨硬食組HEx200

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軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博上學(xué)位論文圖1一5.4w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一6.5w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一7.6w大鼠裸突硬食組HExl6圖1一8.,w大鼠裸突硬食組HEx16圖1一9.4w裸突軟骨硬食組HEx200圖1一10.7w裸突軟骨硬食組HEx200

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 苑學(xué)微;RANKL介導(dǎo)下頜功能性前伸后髁突骨改建的機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年



本文編號(hào):2755727

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