發(fā)布時(shí)間：2020-07-12 12:46

【摘要】： 口腔黏膜下纖維性變(oral submucous fibrosis,OSF)是一種慢性、隱匿性、與咀嚼檳榔有關(guān)的口腔黏膜疾病,OSF可以癌變成口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)。臨床上觀察到此類患者的局部復(fù)發(fā)與頸部淋巴轉(zhuǎn)移率要高于其它非OSF癌變鱗癌,預(yù)后較差,提示OSF癌變鱗癌可能存在有別于非OSF癌變鱗癌不同的生物學(xué)行為,然而目前關(guān)于OSF癌變鱗癌生物學(xué)行為的臨床與基礎(chǔ)研究甚少。 Wnt途徑是一類在生物體進(jìn)化過(guò)程中高度保守的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,調(diào)節(jié)控制著眾多生命活動(dòng)過(guò)程,對(duì)細(xì)胞增殖和分化具有重要調(diào)節(jié)作用,與腫瘤的發(fā)生發(fā)展也有密切的關(guān)系,最近幾年針對(duì)Wnt途徑與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究開始引起關(guān)注,卻未見Wnt途徑在OSF癌變鱗癌中的研究。 目的:本文旨在對(duì)OSF癌變鱗癌生物學(xué)行為進(jìn)行臨床與機(jī)制研究。通過(guò)已被確診的OSF癌變鱗癌臨床病例,對(duì)OSF癌變鱗癌病例與非OSF癌變鱗癌病例的臨床特點(diǎn)與生物學(xué)行為進(jìn)行對(duì)比研究,以補(bǔ)充與完善關(guān)于OSF癌變生物學(xué)行為方面的臨床研究;采用免疫組化SP法以及熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR法對(duì)Wnt途徑的幾個(gè)關(guān)鍵分子在OSF癌變鱗癌等組織中的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),觀察其在mRNA水平及蛋白表達(dá)水平的改變,從而探討Wnt信號(hào)途徑在OSF癌變鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制中可能發(fā)揮的作用;通過(guò)比較不同手術(shù)方式治療OSF癌變鱗癌病例后對(duì)其復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率控制的優(yōu)劣,提出手術(shù)治療OSF癌變鱗癌的推薦術(shù)式,以提高OSF癌變鱗癌患者的生存時(shí)間及生活質(zhì)量。 材料與方法:對(duì)2002年1月～2008年12月在中南大學(xué)湘雅醫(yī)院口腔頜面外科病房經(jīng)手術(shù)治療的口腔黏膜鱗癌患者進(jìn)行回顧性分析,將其病例分為OSF癌變鱗癌組及非OSF癌變鱗癌組。對(duì)其病例分布、發(fā)病部位、臨床特征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較分析;采用免疫組化SP法對(duì)52例OSF癌變鱗癌與48例非OSF癌變鱗癌組織及其癌旁組織的石蠟包埋切片進(jìn)行染色,檢測(cè)組織中β-catenin、Wnt2、E-cadherin、TCF-4以及CD44v6的蛋白表達(dá)水平的改變;采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)OSF癌變鱗癌組織與非OSF癌變鱗癌組織及各自癌旁組織中β-catenin、E-cadherin及TCF-4的mRNA水平的變化;收集45例OSF癌變鱗癌患者,對(duì)其中25例采用原發(fā)灶擴(kuò)大癌旁組織、與頸部淋巴組織連續(xù)垂直切除、個(gè)體化皮瓣修復(fù)的手術(shù)方法并與傳統(tǒng)手術(shù)方法進(jìn)行臨床療效觀察比較研究,將其研究結(jié)果供臨床應(yīng)用。所得結(jié)果通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:一.OSF癌變鱗癌組復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率(43.12%)高于非OSF癌變鱗癌(30.77%),預(yù)后較差;組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P＜0.05。 二.β-catenin的易位表達(dá) 1.正常口腔粘膜組織中,β-catenin的表達(dá)為細(xì)胞膜陽(yáng)性(強(qiáng)染色率93.33%); 2.OSF癌變鱗癌組織呈現(xiàn)β-catenin胞膜染色減少乃至消失(強(qiáng)染色率7.69%),非OSF癌變鱗癌組織亦存在β-catenin胞膜染色減少(強(qiáng)染色率20%),二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);OSF癌變鱗癌組織β-catenin胞漿內(nèi)積聚率達(dá)61.5%,非OSF癌變鱗癌組織則達(dá)57.8%,二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);OSF癌變鱗癌組織β-catenin核易位率達(dá)59.6%,非OSF癌變鱗癌組織則未發(fā)現(xiàn)β-catenin的核易位現(xiàn)象; 3.OSF癌變鱗癌癌旁組織與非OSF癌變鱗癌癌旁組織比較,β-catenin包膜強(qiáng)染色率差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為57.7%,86.7%,P＜0.01); 4.熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果:OSF癌變鱗癌組織(1.10)與非OSF癌變鱗癌組織(1.70)之間β-catenin mRNA表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);OSF癌變鱗癌癌旁組織(0.87)與非OSF癌變鱗癌癌旁組織(0.85)之間β-catenin mRNA表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 三.Wnt2的異常表達(dá) 1.正�？谇徽衬そM織中,Wnt2表達(dá)為陰性; 2.OSF癌變鱗癌組織可見Wnt2的高表達(dá)(染色率達(dá)78.84%)與非OSF癌變鱗癌組織的44%相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);OSF癌變鱗癌癌旁組織Wnt2染色率為34.62%,而非OSF癌變鱗癌癌旁組織無(wú)Wnt2染色; 3.Wnt2的表達(dá)與β-catenin膜染色呈負(fù)相關(guān)(r=-0.956,P=0.011),與β-catenin胞漿積聚呈正相關(guān)。 四.E-cadherin的表達(dá) 1.正�？谇徽衬そM織中,E-cadherin的表達(dá)為細(xì)胞膜陽(yáng)性,強(qiáng)染色率達(dá)93.33%; 2.OSF癌變鱗癌組織中E-cadherin膜表達(dá)明顯減少,強(qiáng)染色率3.85%;非OSF癌變鱗癌組織中E-cadherin強(qiáng)染色率53.33%,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);OSF癌變鱗癌癌旁組織中E-cadherin強(qiáng)染色率57.69%,非OSF癌變鱗癌癌旁組織E-cadherin強(qiáng)染色率64.44%,二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); 3.膜E-cadherin與β-catenin的膜表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.962,P=0.038),Wnt2與膜E-cadherin的減少或消失存在負(fù)相關(guān)(r=-0.919,P=0.027),β-catenin的易位與膜E-cadherin的減少具有伴隨關(guān)系。 4.熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果:OSF癌變鱗癌組、OSF癌變鱗癌癌旁組、非OSF癌變鱗癌組、非OSF癌變鱗癌癌旁組等4組中E-cadherinmRNA表達(dá)水平均低于正常黏膜組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),但4組間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 五.TCF-4及CD44_v6的表達(dá) 1.正�？谇徽衬ぶ�,TCF-4的表達(dá)表現(xiàn)為細(xì)胞核弱陽(yáng)性(20%);CD44_v6的表達(dá)表現(xiàn)為細(xì)胞膜陽(yáng)性(40%); 2.TCF-4在OSF癌變鱗癌組織染色率69.23%,在非OSF癌變鱗癌組織48.89%,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);TCF-4在OSF癌變鱗癌癌旁組織染色率50%,在非OSF癌變鱗癌癌旁組織22.22%,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); 3.CD44_v6在OSF癌變鱗癌組織染色率40%,在非OSF癌變鱗癌組織82.7%,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);CD44_v6在OSF癌變鱗癌癌旁組織染色率57.7%,在非OSF癌變鱗癌癌旁組織48.89%,二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); 4.CD44_v6的表達(dá)與TCF-4呈正相關(guān)(r=0.949,P=0.014)。 5.熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果:OSF癌變鱗癌TCF-4 mRNA表達(dá)量較其它4組高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),其它各組間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 六.采用擴(kuò)大癌旁組織切除、原發(fā)灶與頸部淋巴組織連續(xù)垂直切除、個(gè)體化皮瓣修復(fù)等與傳統(tǒng)治療手段相比,可以明顯減少OSF癌變鱗癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率(分別為12%與40%); 結(jié)論:一.OSF癌變鱗癌臨床上表現(xiàn)為更具侵襲性和轉(zhuǎn)移性的生物學(xué)行為; 二.Wnt途徑在OSF癌變鱗癌中處于異常活化狀態(tài); 三.OSF癌變鱗癌中Wnt2的表達(dá)上調(diào)導(dǎo)致β-catenin在胞漿/胞核的積聚,促使Wnt/β-catenin途徑的活化,該途徑的活化在OSF癌變鱗癌形成和腫瘤播散上具有重要作用; 四.Wnt途徑的活化導(dǎo)致細(xì)胞黏附分子E-cadherin與CD44v6表達(dá)的改變,進(jìn)而促進(jìn)OSF癌變鱗癌的侵襲與轉(zhuǎn)移; 五.擴(kuò)大原發(fā)灶切除邊界以及原發(fā)灶-頸部連續(xù)垂直切除可獲得較為滿意的治療效果,可作為手術(shù)治療OSF癌變鱗癌的推薦術(shù)式。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R781.5;R739.8
【圖文】：

60一69歲76例，70以上37例。二者平均年齡差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見圖l一l、表l一3)。圖1一 1OSF疾變蜂癌組與非OsF癌變蜂瘍組年齡平均值表1一osF癌變蜂癌組與非osF痛變鮮癌組年齡平均值(n司抖7)組別年齡OSF癌變組109非OSF癌變組338組間比較其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01.45.7社8.1155.93士11.29 <0.01

膜染色定位于細(xì)胞膜，以細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色至棕褐色顆粒線狀間斷或連續(xù)分布物質(zhì)者為陽(yáng)性細(xì)胞，薪膜基底層細(xì)胞染色強(qiáng)度明顯高于勃膜表層細(xì)胞，豁膜下層無(wú)染色(見圖2一1、2一2)。圖2一1正�？谇凰侥げ犯奔赐娴娜旧�(sPxloo)圖2一正常口腔私膜卜冰即in的染色(sPx400)WntZ陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞漿，但在正�？谇恍侥ぶ袩o(wú)細(xì)胞漿染色。(見圖2一3、2一)。圖2一正�？谇幻啬nl口的染色 (spxl00)圖洲正�？谇徊誓b口的染色(sPX4(X))E一eadherin陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞膜，在正常口腔勃膜定位于細(xì)胞膜染色明顯，以細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色至棕褐色顆粒線狀間斷或連續(xù)分布物質(zhì)者為陽(yáng)性細(xì)胞，薪膜基底層細(xì)胞染色強(qiáng)度明顯高于薪膜表層細(xì)胞，薪膜下層無(wú)染色(圖2一5、2一6)。

膜染色定位于細(xì)胞膜，以細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色至棕褐色顆粒線狀間斷或連續(xù)分布物質(zhì)者為陽(yáng)性細(xì)胞，薪膜基底層細(xì)胞染色強(qiáng)度明顯高于勃膜表層細(xì)胞，豁膜下層無(wú)染色(見圖2一1、2一2)。圖2一1正�？谇凰侥げ犯奔赐娴娜旧�(sPxloo)圖2一正�？谇凰侥げ繁磇n的染色(sPx400)WntZ陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞漿，但在正�？谇恍侥ぶ袩o(wú)細(xì)胞漿染色。(見圖2一3、2一)。圖2一正�？谇幻啬nl口的染色 (spxl00)圖洲正常口腔彩膜wb口的染色(sPX4(X))E一eadherin陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞膜，在正�？谇徊ざㄎ挥诩�(xì)胞膜染色明顯，以細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色至棕褐色顆粒線狀間斷或連續(xù)分布物質(zhì)者為陽(yáng)性細(xì)胞，薪膜基底層細(xì)胞染色強(qiáng)度明顯高于薪膜表層細(xì)胞，薪膜下層無(wú)染色(圖2一5、2一6)。

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 夏超;254例口腔粘膜下纖維性變患者中舌乳頭萎縮的臨床調(diào)查研究[D];中南大學(xué);2010年

2 邱喜麗;口腔黏膜下纖維化的療效評(píng)估及wnt1的表達(dá)[D];中南大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2751980