【摘要】:[目的]本研究以云南蜂膠醇提物體外作用于人舌鱗癌細(xì)胞,研究蜂膠對(duì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞增殖力的影響,初步探討蜂膠促進(jìn)人舌鱗癌細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制,以期對(duì)蜂膠抗舌癌作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 [方法]采用含有濃度為25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、400ug/ml蜂膠醇提物的培養(yǎng)基干預(yù)培養(yǎng)人舌鱗癌細(xì)胞和正常人口腔粘膜成纖維細(xì)胞,通過(guò)MTT法檢測(cè)蜂膠對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞和正常人口腔粘膜成纖維細(xì)胞的影響;采用倒置顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察不同濃度的蜂膠對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞作用不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)和結(jié)構(gòu)的變化;免疫組化P-V兩步法檢測(cè)人舌鱗癌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2, Bax, Caspase-3在用藥前后的表達(dá)變化。 [結(jié)果]體外實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示,蜂膠對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用,總體上其抑制作用具有時(shí)間和濃度依賴(lài)性;蜂膠對(duì)正常人口腔黏膜成纖維細(xì)胞有一定的抑制作用,同樣具有時(shí)間和濃度依賴(lài)性,但相同時(shí)間、相同濃度的蜂膠對(duì)兩種細(xì)胞的作用存在顯著性差異(p0.01);倒置顯微鏡觀察到隨蜂膠濃度的升高,作用時(shí)間的延長(zhǎng),舌癌細(xì)胞貼壁率越低,細(xì)胞形態(tài)改變?cè)矫黠@;透射電鏡觀察舌鱗癌細(xì)胞凋亡的形態(tài)改變,胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡,線粒體腫大變圓,細(xì)胞微絨毛脫失,細(xì)胞核皺縮、破碎,染色質(zhì)斑塊狀邊緣聚集,線粒體嵴溶解形成多泡體及凋亡小體;對(duì)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的研究結(jié)果顯示,用藥前后細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)有顯著變化,用藥后凋亡相關(guān)蛋白Bc1-2表達(dá)減弱,Bax, Caspase-3則表達(dá)增強(qiáng)。 [結(jié)論]蜂膠在體外能有效地抑制人舌鱗癌細(xì)胞的增殖;蜂膠對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞具有細(xì)胞毒性,可致人舌鱗癌細(xì)胞細(xì)胞核固縮、碎裂,核染色質(zhì)斑塊狀聚集,線粒體腫大變圓及形成凋亡小體;蜂膠誘導(dǎo)人舌鱗癌細(xì)胞凋亡,可能與下調(diào)Bc1-2,上調(diào)Bax、 Caspase-3等凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類(lèi)號(hào)】:R739.8
【參考文獻(xiàn)】
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2729600
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