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小白菊內(nèi)酯對涎腺腺樣囊性癌增殖抑制及其凋亡誘導(dǎo)作用的體外研究

發(fā)布時間:2020-06-25 05:22
【摘要】:目的 探討小白菊內(nèi)酯(parthenolide,Par)對體外培養(yǎng)的涎腺腺樣囊性癌(Adenoidcystic carcinoma of salivary gland,SACC)細(xì)胞系SACC-83的增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用,闡明其在誘導(dǎo)凋亡過程中對NF-кB、Livin和Caspase-3蛋白表達(dá)的影響,并且分析其誘導(dǎo)凋亡的可能的作用機(jī)制。 方法 (1)倒置顯微鏡下觀察SACC-83細(xì)胞系在濃度為5.0mg/L的小白菊內(nèi)酯藥物24h作用前后的細(xì)胞形態(tài)的變化;(2)采用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測小白菊內(nèi)酯6個不同濃度組干預(yù)SACC-83細(xì)胞24、48和72h后細(xì)胞的光吸收值(OD),繪制增殖抑制曲線圖;(3)碘化丙啶(PI)單染流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行小白菊內(nèi)酯3個不同濃度(7.5、15.0和30.0mg/L)作用于SACC-83細(xì)胞系的細(xì)胞周期分析,觀察不同濃度小白菊內(nèi)酯作用24h后各組G_0/G_1期、S期及G_2/M期的細(xì)胞百分比分布;(4)流式細(xì)胞儀觀察AnnexinV-FITC/PI雙染后細(xì)胞凋亡狀況;(5)Western blot法檢測NF-КB、Livin及Caspaese-3蛋白的表達(dá)情況。計量資料采用(x±s)表示,采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果 (1)藥物作用后,形態(tài)學(xué)改變可見細(xì)胞變圓,變小,數(shù)量明顯減少,細(xì)胞膜完整;(2)小白菊內(nèi)酯能以時間、濃度依賴性方式抑制SACC-83細(xì)胞的增殖,24、48和72h的IC50分別為(60.23±7.41)、(27.44±5.45)和(8.73±5.02)mg/L;(3)經(jīng)3個不同濃度(7.5、15.0和30.0mg/L)濃度藥物作用24h后,與同期正常對照組比較,G_0/G_1期細(xì)胞比例均明顯增高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),并且隨著藥物濃度而升高,S期細(xì)胞的比例逐漸降低,G_2/M期無明顯變化,細(xì)胞周期阻滯于G_0/G_1期;(4)經(jīng)3個不同濃度藥物作用24h后,小白菊內(nèi)酯能誘導(dǎo)SACC-83細(xì)胞凋亡,各組的凋亡率分別為14.7%±2.1%、30.5%±3.4%和38.7%±2.7%,與對照組凋亡率3.2%±0.9%相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(5)Western blot法測得小白菊內(nèi)酯能下調(diào)SACC-83細(xì)胞中的NF-КB、Livin蛋白的表達(dá),同時上調(diào)Caspase-3蛋白的表達(dá),且各濃度組之間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 小白菊內(nèi)酯能夠體外抑制SACC-83細(xì)胞的增殖,并使細(xì)胞大量累積于G_0/G_1期,小白菊內(nèi)酯誘導(dǎo)SACC-83細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能與下調(diào)NF-КB、Livin蛋白的表達(dá)水平,活化Caspase-3蛋白的表達(dá)有關(guān)聯(lián)。
【學(xué)位授予單位】:遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R739.87

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本文編號:2728920

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