【摘要】： 目的:在內(nèi)、外不同環(huán)境下,觀察各種癌干細胞相關標志在舌癌細胞中的表達,明晰微環(huán)境對癌干細胞的影響,為進一步明確舌癌干細胞標志提供前期實驗依據(jù)。 方法:①體外環(huán)境設立與檢測:體外培養(yǎng)條件為標準培養(yǎng)條件下(RPM1640+10%胎牛血清)和“懸浮球”培養(yǎng)條件下,在兩種環(huán)境下培養(yǎng)舌癌細胞系(TCA8113),并采用流式細胞術,免疫化學染色法檢測各種癌干細胞相關標志(CD44、ESA、CXCR4、Nestin、Pan-CK)的表達。②體內(nèi)環(huán)境設立與檢測:建立TCA8113舌癌細胞裸鼠皮下移植瘤模型、淋巴道轉移模型和腹水瘤模型,在各模型的移植腫瘤組織中采用流式細胞術,免疫化學染色法檢測各種癌干細胞相關標志(CD44、ESA、CXCR4、Nestin、Pan-CK)的表達的表達。此外,還檢測已經(jīng)成功培養(yǎng)的淋巴結轉移性癌細胞系(lyTCA)中上述各種癌干細胞相關標志的表達。 結果:免疫細胞化學染色結果顯示TCA8113細胞系高表達CD44、ESA、CXCR4,Pan-CK,不表達或者低表達Nestin;流式細胞術結果顯示其高表達CD44(98.2±0.49%)、ESA(99.7±0.21%)、CXCR4(35.6±7.07%)。TCA8113細胞置于“懸浮球”培養(yǎng)條件下培養(yǎng)22天后,鏡下可見懸浮球形成。流式細胞術結果顯示,“懸浮球”細胞高表達CD44(99.9±0.03%)、ESA(98.7±0.19%), CXCR4低表達(2.75±1.67%)。將“懸浮球“置入標準培養(yǎng)基培養(yǎng)后,細胞形態(tài)與生長方式與原在標準培養(yǎng)基環(huán)境中的舌癌細胞相似,流式細胞術結果顯示各標志表達率為:CD44( 99.7±0.26 %)、ESA( 99.0±1.14%)、CXCR4( 36.7±4.63%)。lyTCA細胞系高表達CD4(498.9±0.90% )、ESA( 99.3±0.77%)、CXCR4( 35.1±3.29%)。TCA8113裸鼠皮下移植瘤建模成功,免疫組化結果顯示,皮下移植瘤中舌癌細胞高表達CD44、ESA、CXCR4 ,低表達Pan-CK、Nestin;流式細胞術結果顯示其高表達CD44(84.3±5.17%)、ESA(94.0±3.22%)、CXCR4(85.6±6.37%)。免疫組化結果顯示淋巴結轉移模型中轉移淋巴結(乆窩)轉移性癌高表達CD44、ESA、CXCR4、nestin,低表達pan-CK。TCA8113注射裸鼠腹腔1個月后,大量血性腹水形成,流式細胞術結果顯示CD44 ( 95.3±4.59% )、ESA(99.9±0.05%)、CXCR4(79.4±3.93%)均高表達。結論:在不同環(huán)境下,CD44和ESA在舌癌細胞中穩(wěn)定地高表達。CXCR4、Pan-CK和nestin在不同的環(huán)境下存在著表達差異。
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R739.8
【圖文】：

果 舌癌細胞系 TCA8113 中 CD44、ESA、CXCR4、pan-CK、達在舌癌細胞系 TCA8113 中，CD44（圖 1）、ESA（圖 2）、CXCR4、p 3）均強陽性表達，nestin（圖 4）不表達或低表達。

圖 2 ESA 在 TCA8113 細胞中的陽性表達（箭頭所指，×400）Fig2 The expression of ESA in TCA8113 cells (×400)

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本文編號：2726448