【摘要】：牙科陶瓷具有生物相容性好、美觀、色澤穩(wěn)定、菌斑積聚少、低熱傳導(dǎo)率、耐磨損、修復(fù)體頸緣美觀等特性,是其它修復(fù)材料如金屬和塑料材料無法替代的。由過去單純制作嵌體、貼面發(fā)展到全冠、固定橋,乃至種植義齒的上部結(jié)構(gòu)。本課題組采用以硅藻土為原料,通過添加納米增韌劑(納米氧化鋯,氧化鋁,二氧化鈦晶須等)提高其強(qiáng)度,制備了符合臨床要求的牙科可切削陶瓷材料。 鈷鉻合金烤瓷、鎳鉻合金烤瓷及樹脂也是目前臨床常見的修復(fù)材料。但是有文獻(xiàn)報道金屬合金作為口腔修復(fù)材料應(yīng)用于人體內(nèi)在人體生理環(huán)境中使用對生命有機(jī)體會產(chǎn)生一定的作用和影響。生物相容性評價是研究醫(yī)用金屬材料的重要內(nèi)容之一。 本研究從細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)角度對五種口腔修復(fù)材料的生物相容性進(jìn)行了評價,主要目的是通過細(xì)胞培養(yǎng),MTT法,流式細(xì)胞術(shù)來檢測五種牙科修復(fù)材料對于L929細(xì)胞的細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及凋亡方面的影響進(jìn)而評價其生物相容性。通過RT-PCR檢測Bcl -2和Bax mRNA表達(dá)來探討五種牙體修復(fù)材料引起細(xì)胞凋亡的機(jī)制,同時為提出生物相容性評價的新指標(biāo)提供理論依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)一五種牙體修復(fù)材料對L929細(xì)胞增值率的影響 目的:檢測一種新型硅藻土可切削陶瓷的細(xì)胞毒性并與其他四種牙體修復(fù)材料相比較,初步評價其生物相容性。 方法:小鼠成纖維細(xì)胞L929在新型硅藻土可切削陶瓷浸提液中培養(yǎng)1d,3d,5d,并與其他四種牙科常用修復(fù)材料作比較,MTT法觀察細(xì)胞形態(tài)變化,測量吸光度(OD值),計(jì)算細(xì)胞相對增殖率(RGR),判斷細(xì)胞毒性的級別。 結(jié)果:陰性組,新型硅藻土可切削陶瓷組,鑄瓷組,鈷鉻合金烤瓷之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。陰性組與樹脂,鎳鉻合金烤瓷之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。所有材料細(xì)胞毒性級別都在1級。 結(jié)論:五種牙體修復(fù)材料均無明顯的細(xì)胞毒性。 實(shí)驗(yàn)二五種牙體修復(fù)材料對L929細(xì)胞周期的影響 目的:通過研究新型硅藻土可切削陶瓷及臨床常用四種口腔修復(fù)材料對L929細(xì)胞周期的作用,初步評價其生物相容性。 方法:分別提取新型硅藻土可切削陶瓷及四種臨床常見口腔修復(fù)材料的浸提液作用于L-929細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期進(jìn)程。 結(jié)果:五種牙體修復(fù)材料組細(xì)胞周期與陰性組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 結(jié)論:五種牙體修復(fù)材料對細(xì)胞周期均無特殊影響。 實(shí)驗(yàn)三五種牙體修復(fù)材料對L929細(xì)胞凋亡的影響 目的:通過研究新型硅藻土可切削陶瓷及臨床常用四種口腔修復(fù)材料對L929細(xì)凋亡作用,初步評價其生物相容性。 方法:分別提取新型硅藻土可切削陶瓷及四種臨床常見口腔修復(fù)材料的浸提液作用于L-929細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用;Annexin V-FITC/PI雙染凋亡試劑盒對細(xì)胞死亡類型進(jìn)行定量檢測。 結(jié)果:新型硅藻土可切削陶瓷凋亡率與鑄瓷較低,并與陰性組接近(P0.05);其他3種材料凋亡率遠(yuǎn)高于陰性組。新型陶瓷主要引起的細(xì)胞病變?yōu)榈蛲?并呈時間依賴性。樹脂凋亡率最高,細(xì)胞壞死水平也顯著提高,與新型陶瓷有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 結(jié)論:五種牙體修復(fù)材料凋亡水平存在差異,凋亡檢測可能成為評價材料生物相容性的新方法之一。 實(shí)驗(yàn)四五種牙體修復(fù)材料對L929細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的影響 目的:通過研究新型硅藻土可切削陶瓷及臨床常用四種口腔修復(fù)材料對L929細(xì)胞凋亡相關(guān)基因作用,初步評價其生物相容性。 方法:分別提取新型硅藻土可切削陶瓷及四種臨床常見口腔修復(fù)材料的浸提液作用于L-929細(xì)胞,反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(PT-PCR)從分子水平上檢測Bcl-2及Bax基因的表達(dá)。 結(jié)果:RT-PCR結(jié)果顯示,新型硅藻土可切削陶瓷組、鑄瓷組Bcl-2及Bax mRNA表達(dá)水平都與陰性組接近,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。樹脂Bax mRNA表達(dá)量最高,Bcl-2 mRNA表達(dá)量最低,與新型陶瓷組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。鎳鉻合金烤瓷組及鈷鉻合金烤瓷組Bcl-2及Bax mRNA表達(dá)水平與陰性組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 結(jié)論:五種牙體修復(fù)材料凋亡相關(guān)基因水平有差異,基因表達(dá)檢測可能成為評價材料生物相容性的新方法之一。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R783
【圖文】：

飽和濕度孵箱中培養(yǎng)，約 2-3 天，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 70%-80%時傳中培養(yǎng)液，加 0.25%胰酶中和殘余培養(yǎng)液后棄去胰酶，再加少量胰鐘，倒置顯微鏡下觀察，當(dāng)大多數(shù)細(xì)胞由長梭形變圓時立即向培養(yǎng)約 5 ml 并輕輕吹打瓶壁使細(xì)胞脫落，按 1：4 比例傳代培養(yǎng)于 75接種數(shù)生長期的 L929 細(xì)胞，用 0.25%胰酶充分消化成單細(xì)胞懸液。用 DMEM 培養(yǎng)液種植消化并稀釋，將細(xì)胞濃度調(diào)整為 1×105個/ml，，每孔接種 100μl，每孔重復(fù) 6 遍。細(xì)胞貼壁 24h 后，移去上清提液 100μl 分別加入到培養(yǎng)板中，繼續(xù)培養(yǎng)。陰性對照組為移去上l 含 10 %血清的 DMEM 細(xì)胞培養(yǎng)液。陽性對照組為移去上清后/L)苯酚溶液（圖 1）。

南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位料對細(xì)胞增殖的影響TT 結(jié)果顯示：陰性組，新型硅藻土可切削陶瓷組，鑄瓷組，鈷鉻合金無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。陰性組與樹脂，鎳鉻合金烤瓷之間存在統(tǒng)計(jì)P<0.05）。材料的細(xì)胞毒性級別所有材料都在 1 級，陰性對照組為 0 級照組為 5 級 (圖 3)。

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 宋光子;三種牙本質(zhì)脫敏劑對L929細(xì)胞毒性的體外研究[D];吉林大學(xué);2012年

本文編號：2718663