【摘要】：牙科陶瓷具有生物相容性好、美觀、色澤穩(wěn)定、菌斑積聚少、低熱傳導率、耐磨損、修復體頸緣美觀等特性,是其它修復材料如金屬和塑料材料無法替代的。由過去單純制作嵌體、貼面發(fā)展到全冠、固定橋,乃至種植義齒的上部結(jié)構(gòu)。本課題組采用以硅藻土為原料,通過添加納米增韌劑(納米氧化鋯,氧化鋁,二氧化鈦晶須等)提高其強度,制備了符合臨床要求的牙科可切削陶瓷材料。 鈷鉻合金烤瓷、鎳鉻合金烤瓷及樹脂也是目前臨床常見的修復材料。但是有文獻報道金屬合金作為口腔修復材料應用于人體內(nèi)在人體生理環(huán)境中使用對生命有機體會產(chǎn)生一定的作用和影響。生物相容性評價是研究醫(yī)用金屬材料的重要內(nèi)容之一。 本研究從細胞生物學及分子生物學角度對五種口腔修復材料的生物相容性進行了評價,主要目的是通過細胞培養(yǎng),MTT法,流式細胞術(shù)來檢測五種牙科修復材料對于L929細胞的細胞增殖、細胞周期及凋亡方面的影響進而評價其生物相容性。通過RT-PCR檢測Bcl -2和Bax mRNA表達來探討五種牙體修復材料引起細胞凋亡的機制,同時為提出生物相容性評價的新指標提供理論依據(jù)。 實驗一五種牙體修復材料對L929細胞增值率的影響 目的:檢測一種新型硅藻土可切削陶瓷的細胞毒性并與其他四種牙體修復材料相比較,初步評價其生物相容性。 方法:小鼠成纖維細胞L929在新型硅藻土可切削陶瓷浸提液中培養(yǎng)1d,3d,5d,并與其他四種牙科常用修復材料作比較,MTT法觀察細胞形態(tài)變化,測量吸光度(OD值),計算細胞相對增殖率(RGR),判斷細胞毒性的級別。 結(jié)果:陰性組,新型硅藻土可切削陶瓷組,鑄瓷組,鈷鉻合金烤瓷之間無統(tǒng)計學差異(P0.05)。陰性組與樹脂,鎳鉻合金烤瓷之間存在統(tǒng)計學差異(P0.05)。所有材料細胞毒性級別都在1級。 結(jié)論:五種牙體修復材料均無明顯的細胞毒性。 實驗二五種牙體修復材料對L929細胞周期的影響 目的:通過研究新型硅藻土可切削陶瓷及臨床常用四種口腔修復材料對L929細胞周期的作用,初步評價其生物相容性。 方法:分別提取新型硅藻土可切削陶瓷及四種臨床常見口腔修復材料的浸提液作用于L-929細胞,流式細胞儀檢測細胞周期進程。 結(jié)果:五種牙體修復材料組細胞周期與陰性組無統(tǒng)計學差異(P0.05)。 結(jié)論:五種牙體修復材料對細胞周期均無特殊影響。 實驗三五種牙體修復材料對L929細胞凋亡的影響 目的:通過研究新型硅藻土可切削陶瓷及臨床常用四種口腔修復材料對L929細凋亡作用,初步評價其生物相容性。 方法:分別提取新型硅藻土可切削陶瓷及四種臨床常見口腔修復材料的浸提液作用于L-929細胞,流式細胞儀檢測誘導細胞凋亡作用;Annexin V-FITC/PI雙染凋亡試劑盒對細胞死亡類型進行定量檢測。 結(jié)果:新型硅藻土可切削陶瓷凋亡率與鑄瓷較低,并與陰性組接近(P0.05);其他3種材料凋亡率遠高于陰性組。新型陶瓷主要引起的細胞病變?yōu)榈蛲?并呈時間依賴性。樹脂凋亡率最高,細胞壞死水平也顯著提高,與新型陶瓷有統(tǒng)計學差異(P0.05)。 結(jié)論:五種牙體修復材料凋亡水平存在差異,凋亡檢測可能成為評價材料生物相容性的新方法之一。 實驗四五種牙體修復材料對L929細胞凋亡相關(guān)基因的影響 目的:通過研究新型硅藻土可切削陶瓷及臨床常用四種口腔修復材料對L929細胞凋亡相關(guān)基因作用,初步評價其生物相容性。 方法:分別提取新型硅藻土可切削陶瓷及四種臨床常見口腔修復材料的浸提液作用于L-929細胞,反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(PT-PCR)從分子水平上檢測Bcl-2及Bax基因的表達。 結(jié)果:RT-PCR結(jié)果顯示,新型硅藻土可切削陶瓷組、鑄瓷組Bcl-2及Bax mRNA表達水平都與陰性組接近,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。樹脂Bax mRNA表達量最高,Bcl-2 mRNA表達量最低,與新型陶瓷組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。鎳鉻合金烤瓷組及鈷鉻合金烤瓷組Bcl-2及Bax mRNA表達水平與陰性組有統(tǒng)計學差異(P0.05)。 結(jié)論:五種牙體修復材料凋亡相關(guān)基因水平有差異,基因表達檢測可能成為評價材料生物相容性的新方法之一。
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R783
【圖文】：

飽和濕度孵箱中培養(yǎng)，約 2-3 天，當細胞密度達到 70%-80%時傳中培養(yǎng)液，加 0.25%胰酶中和殘余培養(yǎng)液后棄去胰酶，再加少量胰鐘，倒置顯微鏡下觀察，當大多數(shù)細胞由長梭形變圓時立即向培養(yǎng)約 5 ml 并輕輕吹打瓶壁使細胞脫落，按 1：4 比例傳代培養(yǎng)于 75接種數(shù)生長期的 L929 細胞，用 0.25%胰酶充分消化成單細胞懸液。用 DMEM 培養(yǎng)液種植消化并稀釋，將細胞濃度調(diào)整為 1×105個/ml，，每孔接種 100μl，每孔重復 6 遍。細胞貼壁 24h 后，移去上清提液 100μl 分別加入到培養(yǎng)板中，繼續(xù)培養(yǎng)。陰性對照組為移去上l 含 10 %血清的 DMEM 細胞培養(yǎng)液。陽性對照組為移去上清后/L)苯酚溶液（圖 1）。

南京醫(yī)科大學碩士學位料對細胞增殖的影響TT 結(jié)果顯示：陰性組，新型硅藻土可切削陶瓷組，鑄瓷組，鈷鉻合金無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。陰性組與樹脂，鎳鉻合金烤瓷之間存在統(tǒng)計P<0.05）。材料的細胞毒性級別所有材料都在 1 級，陰性對照組為 0 級照組為 5 級 (圖 3)。

【引證文獻】

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 宋光子;三種牙本質(zhì)脫敏劑對L929細胞毒性的體外研究[D];吉林大學;2012年

本文編號：2718663