【摘要】：目的:正畸牙齒移動會產(chǎn)生不同程度的牙根吸收。目前正畸醫(yī)生通過減小力值,減少加力時間等方法將牙根吸收的程度降到了最低,這種小范圍的牙根吸收可自行部分修復(fù),但是其修復(fù)效果不佳。正畸牙根吸收的不可避免性使得口腔專家對牙根修復(fù)的研究逐漸關(guān)注,并且多年來堅持不懈地探索能促進牙根修復(fù)的方法及藥物。研究證明甲狀旁腺素是一種很好的促進骨形成的激素,間斷少量應(yīng)用甲狀旁腺素具有促進骨組織修復(fù)的效應(yīng),在甲狀旁腺素的所有片段中PTH(1-34)活性最強。因此本實驗通過給牙根吸收動物模型間斷少量應(yīng)用PTH(1-34)觀察其對牙根吸收后修復(fù)能否產(chǎn)生影響,目前國內(nèi)外尚缺乏此方面的實驗研究。通過間斷應(yīng)用PTH(1-34)促進牙根修復(fù)是一種新穎的研究方法,也是一個值得探索的途徑。本實驗通過建立大鼠牙齒移動性根吸收模型后,在不同時間段皮下間斷注射少量的PTH(1-34)作以下幾方面的研究:1,研究不同時間段牙根吸收表面及臨近牙周組織中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色陽性的破骨細(xì)胞數(shù)目變化,2,不同時間段牙根吸收陷窩中修復(fù)性牙骨質(zhì)相對面積值變化;3,免疫組織化學(xué)測定不同時間段牙根吸收陷窩及其周圍組織中骨保護素(OPG)及其配體破骨細(xì)胞核因子KB受體活化因子配基(RANKL)的表達(dá)變化。探討PTH(1-34)對于牙根吸收后再修復(fù)能否產(chǎn)生影響。方法:1,Wistar大鼠牙根吸收的模型的建立及分組。將63只6-8周體重200-250g雄性成年Wistar大鼠常規(guī)喂養(yǎng)一周后,在一側(cè)上頜第一磨牙與前牙之間安裝一個0.012英寸的鎳鈦拉簧加以0.5N的力后,以前牙為支抗拉第一磨牙向近中持續(xù)移動10天建立牙根吸收動物模型。2,拆除牙齒移動裝置后對大鼠重新稱重應(yīng)用隨機數(shù)字表按質(zhì)量隨機分為21小組每組3只,其中空白對照組,陰性對照組,實驗組各7小組。各組大鼠做如下實驗處理:空白對照組不注射任何藥品,分別在拆除裝置當(dāng)天、7天、10天、14天、17天、21天、25天處死各3只取材;陰性對照組除拆除裝置當(dāng)日處死3只外,其余大鼠中斷加力當(dāng)天起每只皮下注射5ml/Kg體重的生理鹽水,以后隔日皮下注射5ml/Kg體重的生理鹽水,并且分別在中斷加力的7天、10天、14天、17天、21天、25天各處死3只取材。實驗組除拆除裝置當(dāng)日處死3只外,中斷加力當(dāng)天起每只大鼠皮下注射5ml /Kg體重的PTH(1-34)鹽水溶液(PTH含量:1ug/ml),以后隔日皮下注射5ml/Kg體重的PTH(1-34)鹽水溶液,分別在中斷加力的7天,10天,14天,17天,21天,25天各處死3只取材;以上取下的組織均包括所有磨牙及牙槽骨的完整組織。3,組織石蠟包埋,矢狀連續(xù)切片,片厚3-5um,觀察牙根吸收情況。選取第一磨牙及牙周組織完整的切片分別行HE染色,選擇第一磨牙中央根與遠(yuǎn)中根壓力側(cè)作為實驗區(qū)域,HE染色后應(yīng)用圖像分析軟件對牙根吸收陷窩修復(fù)性牙骨質(zhì)相對面積進行分析測量;TRAP染色選取各時像點實驗牙中央根與遠(yuǎn)中根壓力側(cè)牙根面及臨近牙周組織中15個高倍視野(×200)計數(shù)TRAP陽性染色的破骨細(xì)胞,計算均數(shù);OPG及其配體RANKL免疫組織化學(xué)染色后,隨機選取各個時像點牙周組織的15個高倍鏡視野(×200),圖像分析系統(tǒng)測得壓力側(cè)陽性染色區(qū)域的平均光密度值。4,統(tǒng)計學(xué)處理:SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)檢驗水準(zhǔn):雙側(cè)α=0.05,計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±s)表示,各組間比較采用單因素方差分析兩兩比較,采用q檢驗,同一樣本不同時間比較采用重復(fù)測量方差分析,p0.05表示統(tǒng)計學(xué)有意義。結(jié)果:1,模型建立情況:中斷加力當(dāng)天,HE切片觀察各組實驗牙牙根壓力側(cè)均可見牙槽骨邊緣及牙根面出現(xiàn)骨吸收陷窩;牙根吸收主要發(fā)生在根中及少量根尖區(qū),且吸收陷窩僅局限在牙骨質(zhì)及極少量牙本質(zhì)淺層,陷窩內(nèi)可見多核破骨細(xì)胞。壓力側(cè)牙周膜變窄,牙周纖維排列紊亂;張力側(cè)牙周膜間隙變寬,固有牙槽骨連續(xù),牙周纖維伸展,細(xì)胞成分較多;證明牙根吸收模型復(fù)制成功。2,修復(fù)性牙骨質(zhì)相對面積值變化:各組中斷加力當(dāng)天牙骨質(zhì)修復(fù)相對面積均最小,隨著中斷加力時間的延長牙骨質(zhì)修復(fù)相對面積呈逐漸增大趨勢;0-25天,空白對照組與陰性對照組牙根修復(fù)相對面積組間兩兩比較無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);0-25天,實驗組與空白對照組及陰性對照組牙骨質(zhì)修復(fù)相對面積組間兩兩比較在0-17無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05),在21-25天實驗組牙骨質(zhì)修復(fù)相對面積較空白對照組及陰性對照組增大顯著,有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。3,TRAP染色結(jié)果:各組中斷加力當(dāng)天,TRAP染色牙根吸收陷窩及臨近牙周組織中可見大量陽性染色破骨細(xì)胞,隨著中斷加力時間的延長陽性染色破骨細(xì)胞數(shù)目逐漸減少,到14天時少見陽性破骨細(xì)胞,17天后未見到陽性破骨細(xì)胞。0-25天,各組牙根吸收陷窩及臨近牙周組織中TRAP染色陽性破骨細(xì)胞數(shù)組間兩兩比較均無顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)4,OPG免疫組織化學(xué):各組0-25天,牙根吸收面及其臨近牙周組織中均呈陽性表達(dá); 0-25天,空白對照組,陰性對照組組間比較沒有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);0-25天實驗組與空白對照組及陰性對照組組間兩兩比較,21-25實驗組顯著增高,有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。5,RANKL免疫組織化學(xué):各組0-25天,牙根吸收面及臨近牙周組織中均呈陽性表達(dá)。0-25天,空白對照組與陰性對照組組間比較沒有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);0-25天,實驗組與空白對照組及陰性對照組組間兩兩比較,在7-10天,21-25有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05),實驗組較空白對照組及陰性對照組7-10天顯著增高,21-25天顯著減少(p0.05)。6,OPG/RANKL比值變化結(jié)果:各組0-17天呈減少趨勢,21-25天呈升高趨勢。0-25天,空白對照組與陰性對照組組間比較無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05),實驗組與空白對照組及陰性對照組組間兩兩比較實驗組比值在7天時顯著減少,21-25天比值顯著增大,統(tǒng)計學(xué)差異顯著(p0.05),其他時相點無顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。結(jié)論:1,皮下間斷注射少量PTH(1-34)對大鼠正畸性牙根吸收后的修復(fù)早期沒有影響。2,皮下間斷注射少量PTH(1-34)能夠促進大鼠正畸性牙根吸收后晚期的修復(fù)。
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R783.5
【圖文】：

26維排列紊亂；張力側(cè)牙周膜間隙變寬，固有牙槽骨連續(xù)，牙周纖維伸展，細(xì)胞成分較多，說明Wistar大鼠牙根吸收模型造模成功。（見圖7-8）圖7，8 HE染色 牙齒移動10天 牙根壓力側(cè)及牙周組織;A 牙槽骨；D牙本質(zhì)；PDL牙周膜；箭頭所示為吸收陷窩；Fig 7,8 HE staining，continuation of orthodontic force for 10 days； tooth rootresorption lacuna and the periodontal tissue of compression side；A：aveolar bone；D:dentin ；PDL: periodontal ligament ;magnification ×50 and magnification ×1002 牙根修復(fù)結(jié)果2.1 組織學(xué)HE染色后光鏡下觀察結(jié)果空白對照組，陰性對照組，實驗組0-7天牙根吸收陷窩均未見修復(fù)性牙骨質(zhì)沉積(見9,10)。第7天后根中區(qū)域及附近根尖區(qū)，牙周膜中細(xì)胞越來越多，牙槽骨邊緣吸收陷窩內(nèi)有少量修復(fù)性骨質(zhì)出現(xiàn)，牙骨質(zhì)吸收陷窩內(nèi)有修復(fù)性牙骨質(zhì)出現(xiàn)并逐漸增多，牙周膜中出現(xiàn)少量成牙骨質(zhì)細(xì)胞(見圖11-14)。10天時牙根吸收陷窩邊緣出現(xiàn)一層紫染的修復(fù)性牙骨質(zhì)沉積線(見圖11)，隨著時間的延長顏色越來越深，17天時變?yōu)樵龊竦臈l帶；17天起陰性對照組及空白對照組吸收陷窩內(nèi)修復(fù)性牙骨質(zhì)增加逐漸趨于緩慢。而實驗組17天后牙根修復(fù)逐漸加強

收面及牙周組織；PDL：牙周膜 D：牙本質(zhì)；箭頭y 0,resorption lacuna and periodendal ligamen; arrow: resorption lacun; magnification×200收面及牙周組織；PDL：牙周膜 D：牙槽骨；箭 7，resorption lacuna and periodendal tissue; PDL：pion lacuna; magnification×200

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2 李狼

本文編號：2714248