【摘要】：目的：通過建立以微螺釘種植體為支抗的兔上頜骨前牽引模型，利用免疫組織化學(xué)及RT-PCR方法檢測(cè)在正畸骨改建過程中護(hù)骨素（OPG）及Wnt信號(hào)通路中的信號(hào)因子之一Wnt-5a的表達(dá)情況，研究不同牽引時(shí)間對(duì)二者在壓力側(cè)骨縫周圍組織中表達(dá)的影響，探討它們?cè)谡歉慕ㄖ械淖饔眉霸诳谇徽^程中的表達(dá)意義。方法：采用15只發(fā)育期健康雄性新西蘭兔，麻醉動(dòng)物后行支抗種植釘植入術(shù)，部位為上頜骨硬腭部，兩側(cè)各植入一枚種植釘，待種植釘達(dá)到骨結(jié)合后，隨機(jī)選取12只作為實(shí)驗(yàn)組，安放自制顱骨堅(jiān)強(qiáng)外固定架，固定于兔雙側(cè)前肢形成穩(wěn)定支抗，將Ni-Ti牽引彈簧連接于微種植體與固定架面具之間，并施以100g的牽引力進(jìn)行牽張，建立上頜骨前移模型。其余3只為空白對(duì)照組，只植入釘?shù)粻恳Ｃ咳沼^察動(dòng)物飲食等健康狀況，于牽引第10、20、30d處死4只動(dòng)物，分離上頜骨，取以前頜縫為界的前部5mm處上頜第三上臼齒所對(duì)應(yīng)的腭蓋水平部即壓力側(cè)骨縫周圍組織塊標(biāo)本，其中每組2只用于組織形態(tài)學(xué)研究,2只用于RT-PCR測(cè)定。對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)各處死1只。蘇木素-伊紅染色觀察兔骨縫周圍組織的形態(tài)學(xué)變化，采用免疫組織化學(xué)染色及RT-PCR方法檢測(cè)骨縫周圍組織中OPG及Wnt-5a的表達(dá)情況。結(jié)果：①HE染色顯示，隨著牽引時(shí)間的遞增，加力10d組，骨形成層成骨稀少形態(tài)不規(guī)則，有少量斷裂的纖維，可見破骨細(xì)胞，形成骨陷窩；加力20d組，成骨活動(dòng)明顯，骨緣可見較密集、排列呈鏈狀的成骨細(xì)胞和新骨。成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞和成纖維細(xì)胞數(shù)量明顯增加；加力30d組，某些區(qū)域的成骨細(xì)胞被周圍基質(zhì)和纖維包埋，并可見與牽引方向平行排列的新生骨小梁伸向骨縫區(qū),前端部分相連接,周圍分布著大量成骨細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。骨緣不平,呈蠶食狀,可見破骨細(xì)胞。②免疫組織化學(xué)染色顯示OPG、Wnt-5a目的蛋白均呈陽性表達(dá)。陽性細(xì)胞呈棕黃色，主要定位于細(xì)胞漿。OPG陽性細(xì)胞表達(dá)部位集中于壓力側(cè)骨吸收部位。加力10d時(shí)，OPG表達(dá)與空白對(duì)照組比較無明顯差異，呈弱陽性表達(dá)；加力20d時(shí)，壓力側(cè)OPG表達(dá)進(jìn)一步增強(qiáng)，并可見新骨形成；加力30d時(shí)，OPG的表達(dá)呈現(xiàn)逐漸減弱趨勢(shì)（P0.05）。Wnt-5a陽性細(xì)胞表達(dá)分布不集中，散在分布于壓力側(cè)骨縫周圍成骨細(xì)胞內(nèi)。未見其陽性細(xì)胞表達(dá)與加力時(shí)間有明顯線性關(guān)系（P0.05）。③OPG、Wnt-5a在RT-PCR中出現(xiàn)了目的條帶，與免疫組織化學(xué)染色結(jié)果一致。結(jié)論：在正畸牽引過程中，OPG參與了正畸骨改建的過程，它在正畸骨縫周圍組織壓力側(cè)的表達(dá)具有時(shí)間依賴性；Wnt-5a于骨縫周圍組織壓力側(cè)在蛋白和分子水平亦均有表達(dá)，但本實(shí)驗(yàn)中并未見其與牽引時(shí)間長(zhǎng)短有明顯相關(guān)關(guān)系，因此Wnt信號(hào)途徑與正畸骨改建的相關(guān)性仍需進(jìn)一步研究確定；年齡因素對(duì)正畸力作用下骨組織改建產(chǎn)生的影響以及幼、成年個(gè)體成骨細(xì)胞對(duì)正畸壓力的反應(yīng)機(jī)制是否存在區(qū)別與聯(lián)系，這些都尚需進(jìn)一步探討。
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R782.2
【圖文】：

圖 1 在兔口內(nèi)植入微種植釘 1 Plant micro-screw implant in the rabbit觀察情況：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全部存活各層組織愈合良好。實(shí)驗(yàn)組裝逐漸前突，并呈輕微開合狀態(tài)力。種植釘無脫落，所有動(dòng)物肉眼可見骨縫被牽開，牽張間改建過程，骨縫周圍骨皮質(zhì)存上頜骨前方牽引模型。組標(biāo)本與對(duì)照組相比大致無差形成層成骨稀少形態(tài)不規(guī)則，松結(jié)締組織，類骨質(zhì)由幼稚的

開始失去沿牽引力長(zhǎng)軸排列的特征，有些區(qū)域的成骨細(xì)胞被周圍基質(zhì)和纖維包埋，形成骨陷窩，牽張區(qū)和外側(cè)骨質(zhì)基本融為一體，甚至和正常對(duì)照組結(jié)構(gòu)基本相同，骨縫外側(cè)牽張間隙被新骨組織充填，板層骨沿哈佛氏管緊密排列，骨陷窩增多，成熟骨皮質(zhì)結(jié)構(gòu)已經(jīng)形成。見圖 2。a.對(duì)照組 10d b.對(duì)照組 20d c.對(duì)照組 30d

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本文編號(hào)：2713400