【摘要】：目的：通過建立以微螺釘種植體為支抗的兔上頜骨前牽引模型，利用免疫組織化學及RT-PCR方法檢測在正畸骨改建過程中護骨素（OPG）及Wnt信號通路中的信號因子之一Wnt-5a的表達情況，研究不同牽引時間對二者在壓力側骨縫周圍組織中表達的影響，探討它們在正畸骨改建中的作用及在口腔正畸過程中的表達意義。方法：采用15只發(fā)育期健康雄性新西蘭兔，麻醉動物后行支抗種植釘植入術，部位為上頜骨硬腭部，兩側各植入一枚種植釘，待種植釘達到骨結合后，隨機選取12只作為實驗組，安放自制顱骨堅強外固定架，固定于兔雙側前肢形成穩(wěn)定支抗，將Ni-Ti牽引彈簧連接于微種植體與固定架面具之間，并施以100g的牽引力進行牽張，建立上頜骨前移模型。其余3只為空白對照組，只植入釘?shù)粻恳�。每日觀察動物飲食等健康狀況，于牽引第10、20、30d處死4只動物，分離上頜骨，取以前頜縫為界的前部5mm處上頜第三上臼齒所對應的腭蓋水平部即壓力側骨縫周圍組織塊標本，其中每組2只用于組織形態(tài)學研究,2只用于RT-PCR測定。對照組在各時間點各處死1只。蘇木素-伊紅染色觀察兔骨縫周圍組織的形態(tài)學變化，采用免疫組織化學染色及RT-PCR方法檢測骨縫周圍組織中OPG及Wnt-5a的表達情況。結果：①HE染色顯示，隨著牽引時間的遞增，加力10d組，骨形成層成骨稀少形態(tài)不規(guī)則，有少量斷裂的纖維，可見破骨細胞，形成骨陷窩；加力20d組，成骨活動明顯，骨緣可見較密集、排列呈鏈狀的成骨細胞和新骨。成骨細胞、成軟骨細胞和成纖維細胞數(shù)量明顯增加；加力30d組，某些區(qū)域的成骨細胞被周圍基質和纖維包埋，并可見與牽引方向平行排列的新生骨小梁伸向骨縫區(qū),前端部分相連接,周圍分布著大量成骨細胞和成纖維細胞。骨緣不平,呈蠶食狀,可見破骨細胞。②免疫組織化學染色顯示OPG、Wnt-5a目的蛋白均呈陽性表達。陽性細胞呈棕黃色，主要定位于細胞漿。OPG陽性細胞表達部位集中于壓力側骨吸收部位。加力10d時，OPG表達與空白對照組比較無明顯差異，呈弱陽性表達；加力20d時，壓力側OPG表達進一步增強，并可見新骨形成；加力30d時，OPG的表達呈現(xiàn)逐漸減弱趨勢（P0.05）。Wnt-5a陽性細胞表達分布不集中，散在分布于壓力側骨縫周圍成骨細胞內。未見其陽性細胞表達與加力時間有明顯線性關系（P0.05）。③OPG、Wnt-5a在RT-PCR中出現(xiàn)了目的條帶，與免疫組織化學染色結果一致。結論：在正畸牽引過程中，OPG參與了正畸骨改建的過程，它在正畸骨縫周圍組織壓力側的表達具有時間依賴性；Wnt-5a于骨縫周圍組織壓力側在蛋白和分子水平亦均有表達，但本實驗中并未見其與牽引時間長短有明顯相關關系，因此Wnt信號途徑與正畸骨改建的相關性仍需進一步研究確定；年齡因素對正畸力作用下骨組織改建產(chǎn)生的影響以及幼、成年個體成骨細胞對正畸壓力的反應機制是否存在區(qū)別與聯(lián)系，這些都尚需進一步探討。
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R782.2
【圖文】：

圖 1 在兔口內植入微種植釘 1 Plant micro-screw implant in the rabbit觀察情況：實驗動物全部存活各層組織愈合良好。實驗組裝逐漸前突，并呈輕微開合狀態(tài)力。種植釘無脫落，所有動物肉眼可見骨縫被牽開，牽張間改建過程，骨縫周圍骨皮質存上頜骨前方牽引模型。組標本與對照組相比大致無差形成層成骨稀少形態(tài)不規(guī)則，松結締組織，類骨質由幼稚的

開始失去沿牽引力長軸排列的特征，有些區(qū)域的成骨細胞被周圍基質和纖維包埋，形成骨陷窩，牽張區(qū)和外側骨質基本融為一體，甚至和正常對照組結構基本相同，骨縫外側牽張間隙被新骨組織充填，板層骨沿哈佛氏管緊密排列，骨陷窩增多，成熟骨皮質結構已經(jīng)形成。見圖 2。a.對照組 10d b.對照組 20d c.對照組 30d

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本文編號：2713400