【摘要】： 牙周膜細胞是牙周組織的主要組成部分，，具有一系列重要的功 能，在牙周組織正常代謝和修復再生過程中起重要作用。在牙周致病菌的 刺激下，牙周膜細胞生長受到抑制，不能行使正常的功能，因此研究牙周致 病菌刺激下牙周膜細胞的基因表達譜對了解牙周致病菌的致病機制、尋找 防治措施具有重要意義。本研究利用基因芯片分析牙周致病菌內(nèi)毒素（LPS） 刺激前后人牙周膜細胞的差異基因表達譜，為進一步研究牙周致病菌致病 機理、尋找防治方法提供分子水平的依據(jù)。 利用基因芯片研究表明：中間普氏菌LPS刺激人牙周膜細胞前后共有 14條差異表達基因，其中6條上調(diào)基因，8條下調(diào)基因。上調(diào)基因主要為蛋 白激酶和蛋白磷酸酶類基因，而下調(diào)基因主要為轉錄調(diào)控基因、凋亡相關 基因、受體基因。因此，基因芯片可有效地篩選差異表達基因，從而用于 牙周炎病因的研究。 為驗證基因芯片的分析結果，我們采用原位雜交技術研究中間普氏菌 LPS刺激前后人牙周膜細胞IAP-2的表達，結果表明：體外培養(yǎng)的對照組第 7代人牙周膜細胞，IAP-2表達為陽性；經(jīng)LPS刺激24h后，人牙周膜細胞 IAP-2表達為陰性，說明LPS可通過抑制牙周膜細胞IAP-2表達，誘導牙周 膜細胞的凋亡。原位雜交的結果與基因芯片結果一致。 二、目前認為牙周炎是一種有部位特異性的疾病，需要對牙周炎活動 性進行快速、準確、客觀的診斷和位點特異性的治療。本研究利用寡核苷 酸探針和Periocheck椅旁快速檢測技術，觀察牙周致病菌在慢性牙周炎位點 中的分布，評價兩種微生物檢測方法在牙周炎活動性監(jiān)測中的意義。 第四軍醫(yī)大學博1：論義 1．利用寡核昔酸探針對慢性牙周炎位點進行檢測發(fā)現(xiàn)：Pg、Bf、Td在 60 個牙周炎位點中檢出率很高，分別為86．67o、85o、96．67O，而Aa檢 出率為引．67％，說明 Pg、Bf、Td是慢性牙周炎發(fā)生、發(fā)展中的優(yōu)勢菌 群。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)Pg、Bf、Td兩兩正相關，表明牙周袋內(nèi)門能 存在Pg、Bf、Td三種微生物的復合體，彼此之間具有協(xié)同生長作用。 2．Perioclleck檢測的慢性牙周炎位點肽酶水平顯著高J‘健康位點，）jk酶水 平與牙周臨床指標正相關，因此Periocheck檢測可用于判斷患病位點， 有較高的敏感性和特異性，可用于檢測牙周炎位點的活動性。 3．Periocheck檢測的齦下菌斑肽酶活性和寡核昔酸探針檢測的Pg、Bf、 Td細菌數(shù)正相關，說明Periocheck椅旁檢測的肽酶活性可以間接反映 三種牙周公認致病菌的感染。 4．Periocheck檢測的齦下菌斑中肽酶活性和 GCFAST、GCFALP水平小 相關，說明肽酶活性所代表的 Pg、Bf、Td三種齦下微生物的水平和 GCFAST所代表的牙周組織破壞程度、GCF－ALP代表的早期牙齦炎癥 具有一定的相關性，進一步說明口腔微生物在牙周病病理中的作用。 5．Periocheck椅旁檢測與寡核昔酸探針方法比較：Periocheck椅旁快速檢測 技術比較簡易和快捷，而寡核昔酸＊＊A探針檢測比較特異，兩種方法 均可以用于牙周可疑致病菌的檢測，對牙周治療效果進行評價。 二、利用kri。。他ck椅旁快速檢測和寡核昔酸探針評估習’周袋內(nèi)周部使 用鹽酸二甲胺四環(huán)素軟膏的治療效果，觀察用藥前后臨床指標及牙周袋內(nèi) 微生物的改變，并檢測GCF．AST、GCFALP水平的變化，結果表明： 1．本研究結果表明牙周潔治和根面平整后，Periocheck轉陰（A組）位點 各臨床指標和實驗室指標均有顯著改善，疾病具有較好的轉歸，說明 Periocheck檢測可用于評價牙周治療效果，預測疾病的發(fā)展趨勢。 3 第四軍醫(yī)大學博l：論文 2．牙周潔治和根面平整后，Periocheck陽性位點只有部分轉陰，說明機械 性刮治不能完全控制牙周菌斑，對機械性刮治效果不明顯的位點需要進 行局部化學藥物治療，有選擇的抑制牙周袋內(nèi)的相關致病菌。 3．B組位點在潔治和根面平整后Periocheck檢測仍為卜），牙周袋內(nèi)局部仗 用軟酸H甲胺四環(huán)素軟膏（B－2組、B－3組）后，其牙齦指數(shù)、菌斑指 數(shù)、牙周袋深度、附著喪失的改善較再刮治組閃刁組）明顯，說明對機 械性治療效果不敏感的位點，局部化學藥物可取得較好的臨床效果。 4．局部使用鹽酸h甲胺四環(huán)素（B－2組、B－3組）與對照組（B1組）比較： GCFALP、GCFAST水平均有顯著下降，說明鹽酸二甲胺四環(huán)素軟禽 可以有效抑制骨吸收，減少牙周組織破壞?
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2001
【分類號】：R781.05

【參考文獻】

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1 張賢華;牙周病活動性的椅旁快速診斷技術[J];國外醫(yī)學.口腔醫(yī)學分冊;1998年06期

本文編號：2710104