發(fā)布時間：2020-06-08 06:03

【摘要】：目的：探討白細(xì)胞介素-1A+4845 (interleukin-1A+4845, IL-1 A+4845)、白細(xì)胞介素-1B-31 (interleukin-1B-31, IL-1B-31)基因型與慢性牙周炎(chronic periodontitis, CP)、冠心病(coronary heart disease, CHD)易感性的關(guān)系,分析易感基因的攜帶與冠狀動脈粥樣硬化斑塊中牙周可疑致病菌中間普氏菌的檢出之間的相關(guān)性。采用先進(jìn)的定量技術(shù)檢測齦下菌斑及冠狀動脈粥樣硬化斑塊中中間普氏菌。方法：收集中重度慢性牙周炎患者127例,冠心病患者123例,慢性牙周炎合并冠心病患者87例和健康對照117例的頰黏膜拭子,提取DNA,用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性法(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)對IL-1A+4845/Fnu 4H1、IL-1B-31/Alu I位點(diǎn)的基因型進(jìn)行檢測,比較各基因型在4組間檢出率的差別；收集慢性牙周炎合并冠心病患者38例齦下菌斑及冠狀動脈粥樣硬化斑塊,采用Chelex-100法提取DNA,以聚合酶鏈反應(yīng)法(polymerase chain reaction, PCR)檢測中間普氏菌,并觀察其與白細(xì)胞介素-1B-31 (IL-1B-31)等位基因T的攜帶之間的關(guān)系；運(yùn)用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)比較中間普氏菌在齦下菌斑及冠狀動脈粥樣硬化斑塊的量。結(jié)果：1)IL-1 A+4845基因型在4組間基因型的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；2)IL-1B-31等位基因T在中重度慢性牙周炎組中的檢出率顯著高于健康對照組,而在冠心病組與健康組、慢性牙周炎合并冠心病組與健康組間的檢出率差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3)Pi在38例患者冠狀動脈粥樣硬化斑塊中的檢出率為42.1%,在齦下菌斑中的檢出率為68.4%,在同一患者冠狀動脈粥樣硬化斑塊及齦下菌斑中同時檢出中間普氏菌9例,一致率為29.0%。4)等位基因T的攜帶在齦上菌斑檢出Pi組有較齦上菌斑未檢出Pi組高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5)本研究設(shè)計(jì)的實(shí)時熒光定量PCR法的引物具有良好的特異性和敏感性。結(jié)論：IL-1B-31等位基因T可能是中重度慢性牙周炎的一個遺傳學(xué)標(biāo)志；在冠狀動脈粥樣硬化斑塊中中間普氏菌DNA的檢出,提示牙周炎相關(guān)致病菌在冠心病的發(fā)生、發(fā)展中可能起重要作用；IL-1B-31等位基因T可能與齦下菌斑中中間普氏菌檢出之間存在相關(guān)性。
【圖文】：

擴(kuò)增產(chǎn)物、酶切產(chǎn)物電泳結(jié)果及兒一1基因型測序結(jié)本提取DNA后經(jīng)PCR檢測，擴(kuò)增出}_1{}{J)}一段自加丫!一純冠心病病人】23，女性46例，年齡36一76歲，、卜均(58.6士10.7)歲;「{，、幣度，饅127例，，男卞卜76例，女性51例，年齡31一74歲，平均(57.4士8.5)少補(bǔ)慢性才周炎患者87例，男書}52例，女性35例，年齡40一71歲7.5)歲。另選另選健康志愿者117例作對照，其‘!‘男性68例，_女性一69歲，“卜均(56.8士8.3)歲。各組在性別平}l年齡夕}!_}紅!_)戊均衡(l)。IB一31位點(diǎn)PCR擴(kuò)增，!_!的條粥:電泳結(jié)果如下，一可見條帶清楚，無雜，「1的條帶大小與預(yù)期結(jié)果一致。加入限制性內(nèi)切酶Alu137OC水凝膠電泳，結(jié)果如下TT華因型不被切J「，只有長度為239bp的一個因型產(chǎn)生一幾個片段，長度依次239bp，137bp和loZbp;cc錐因型，長度分別是137bp和loZbp。測序驗(yàn)證結(jié)果，[iJ一見到c一T的突變方法及結(jié)果真實(shí)可靠。(結(jié)果見圖1至圖3)

2白細(xì)胞介素一1(IL一l)基因型分布2·1IL一IA+4845基因型分布各組均以純合子GG基因型的檢出率最高，本次實(shí)驗(yàn)未檢出純合子CC基因型。4組間基因型的分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(才一2.246，尸>0.05)。有21.37%(97/454)的受試者攜帶IL一IA+4845等位基因C，結(jié)果見表5。表5IL一IA+4845/Fnu4HI基因型分布(O/O)分組GGGC單純慢性牙周炎并冠心病冠心病單純慢性牙周炎健康對照74.7180.4976.3882.0525.2919.51O023.6217.95產(chǎn)，J工了7J斤2Zr00，闊，沖|2.2IL一IB一31基因型分布
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R781.4

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本文編號：2702650