【摘要】：背景： 牙周炎是一種常見的口腔慢性感染性疾病,其發(fā)生發(fā)展受多種因素的影響。流行病學(xué)研究表明,全球約有超過三分之二的人患有不同形式的牙周疾病,而患有中度和重度牙周炎的成人患者分別約為44%～57%和10%。雖然牙周致病菌是牙周炎發(fā)生的始動(dòng)因子,但其疾病進(jìn)程最終由宿主的免疫反應(yīng)決定。而調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells, Treg)作為機(jī)體主要的免疫抑制和調(diào)節(jié)細(xì)胞,在牙周炎的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著不可替代的作用。 2型糖尿病是常見的內(nèi)分泌代謝性疾病,被認(rèn)為是牙周病的危險(xiǎn)因素之一。臨床對照研究結(jié)果表明,在局部刺激因素相似的情況下,2型糖尿病患者的牙周炎發(fā)生率及嚴(yán)重程度均大于無糖尿病者。目前大量研究認(rèn)為,2型糖尿病是一種與機(jī)體免疫功能紊亂有關(guān)的低度慢性炎癥。隨著全球生活方式的改變和老齡化進(jìn)程的加速,牙周炎和2型糖尿病的患病率正在呈快速上升趨勢,且二者相互影響已成為世界范圍內(nèi)的公共健康問題。因此,探討防治該類炎癥性疾病的新方法具有重要的科學(xué)意義和深遠(yuǎn)的社會(huì)意義。 近來,有研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群柔嫩梭菌(Clostridium leptum subgroup,C. leptum)能促進(jìn)Treg細(xì)胞的產(chǎn)生,并通過增殖和活化Treg細(xì)胞及分泌一些相關(guān)抗炎細(xì)胞因子(如IL-10)來抑制自身損傷性炎癥反應(yīng),從而減輕對機(jī)體的免疫病理損傷。最近的研究發(fā)現(xiàn),給予成年小鼠口服C. leptum可有效誘導(dǎo)Treg細(xì)胞的增殖和活化,并顯著減輕OVA致敏小鼠氣道內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤及炎性細(xì)胞因子的分泌。上述研究結(jié)果提示C. leptum可能參與了某些炎性疾病的發(fā)展過程并在一定程度上減輕機(jī)體的炎癥反應(yīng),這將對常見的口腔慢性炎性疾病牙周炎的科學(xué)研究和臨床治療產(chǎn)生重要的指導(dǎo)意義。 雖然C. leptum在炎性疾病中的作用愈來愈受到國內(nèi)外專家及學(xué)者的關(guān)注,但是目前有關(guān)該菌群與牙周組織健康狀況之間的研究尚未見報(bào)道。C. leptum是否與牙周組織局部炎癥狀態(tài)有關(guān),是否能發(fā)揮其抗炎特性減輕牙周組織的炎癥破壞至今尚不清楚。 目的： 應(yīng)用Real-time PCR方法對糞便中C. leptum進(jìn)行定量檢測,初步探討腸道C. leptum與牙周組織炎癥狀態(tài)之間的關(guān)系,為牙周炎的臨床治療提供新的思路。 方法： 選取慢性(中重度)牙周炎患者(CP組)、2型糖尿病患者(DM組)、伴2型糖尿病的慢性(中重度)牙周炎患者[(DM+CP)組]及健康對照者(HC組)各20例為研究對象,每位受試者均進(jìn)行問卷調(diào)查和牙周臨床檢查,并收集糞便標(biāo)本。根據(jù)C. leptum16S rRNA序列設(shè)計(jì)特異性引物,以常規(guī)PCR產(chǎn)物經(jīng)克隆后的質(zhì)粒DNA為標(biāo)準(zhǔn)品,經(jīng)梯度稀釋后制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。待測糞便標(biāo)本提取細(xì)菌基因組DNA,應(yīng)用SYBR Green I實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對標(biāo)本中的C. leptum進(jìn)行定量分析。采用SPSS17.0軟件對所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,各組間臨床指標(biāo)PD、AL和基因拷貝數(shù)的比較采用成組設(shè)計(jì)資料的t檢驗(yàn),BOP陽性率比較采用卡方檢驗(yàn),P＜0.05則認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.各組PD、AL和BOP陽性率比較：(DM+CP)組的PD和AL值均顯著大于HC組、CP組和DM組(P＜0.05);(DM+CP)組的BOP陽性率明顯高于HC組、CP組和DM組(P＜0.05)。 2.各組標(biāo)本每克濕便中C. leptum的16S rRNA基因拷貝數(shù)的對數(shù)值(10gcopies/g)分別為：HC組(7.09±0.17),CP組(6.31±0.58),DM組(5.79±0.52),(DM+CP)組(5.41±0.29)。CP組、DM組及(DM+CP)組C. leptum基因拷貝數(shù)明顯低于HC組(P＜0.01)。(DM+CP)組C. leptum基因拷貝數(shù)明顯低于CP組和DM組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。 結(jié)論： 腸道菌群C. leptum的數(shù)目與牙周組織局部炎癥狀態(tài)之間有一定的關(guān)系。與HC組、CP組和DM組相比,C. leptum數(shù)目最少的(DM+CP)組患者其牙周組織破壞最嚴(yán)重,提示在某種程度上低水平的C. leptum可能不足以抑制過度的自身損傷性免疫應(yīng)答,從而導(dǎo)致牙周組織的局部炎癥破壞加重。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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3 李亞男;李善玉;張影;盧清華;成煥吉;;口服柔嫩梭菌對OVA致敏小鼠氣道炎癥的影響[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2012年11期

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本文編號(hào)：2697821