五種牙科合金細(xì)胞遺傳毒性的體外實(shí)驗(yàn)和頰粘膜細(xì)胞微核試驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2020-06-01 08:21
【摘要】:目的:研究五種牙科合金(三種Ni-Cr合金VeraBond, Kera N, TILITF "V",兩種Co-Cr合金N.P. Partial,StarLoy C)體外誘發(fā)人B淋巴母細(xì)胞的細(xì)胞毒性和遺傳毒性以及Ni-Cr合金修復(fù)體對(duì)人口腔頰粘膜細(xì)胞的遺傳損傷。 方法:人B淋巴母細(xì)胞為體外試驗(yàn)靶細(xì)胞,長(zhǎng)春新堿為陽(yáng)性對(duì)照,培養(yǎng)基(IMDM)為陰性對(duì)照。五種合金在IMDM中浸泡72小時(shí)制備浸出液。采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS)檢測(cè)浸出液中Ni、Cr、Co等主要金屬成分離子濃度。分別用CCK-8、中性紅攝入(NRU)試驗(yàn)檢測(cè)五種合金的細(xì)胞毒性,用彗星試驗(yàn)和胞質(zhì)阻斷微核試驗(yàn)(CBMN)檢測(cè)遺傳毒性。暴露濃度分別為56.5、112.5、225、450和900μl浸出液/ml,暴露時(shí)間為48h。采用微核試驗(yàn)檢測(cè)68名患者的頰粘膜細(xì)胞的遺傳損傷(34名戴用Ni-Cr合金全冠修復(fù)體患者為實(shí)驗(yàn)組,平均冠修復(fù)時(shí)間為5.32年;34名與實(shí)驗(yàn)組年齡、性別匹配志愿者為對(duì)照組)。 結(jié)果:五種合金浸出液中,VeraBond浸出液中Ni的含量(87.6ug/L)高于KeraN浸出液(57.6ug/L)和TILITE "V"浸出液(70.0ug/L),差異有顯著性(P0.05)。TILITE "V"浸出液中Cr的含量(19.6ug/L)明顯低于Kera N浸出液(28.7ug/L)和N.P.Partial浸出液(29.1ug/L)(P0.05)。StarLoy C浸出液中Mo的含量(6.7ug/L)明顯低于Kera N浸出液(15.4ug/L)和VeraBond浸出液(15.9ug/L)(P0.05)。僅在VeraBond浸出液中檢出Be。NRU試驗(yàn)中,除暴露濃度為56.5μl/ml的N.P. Partial浸出液外,其它各組細(xì)胞活性均低于陰性對(duì)照組(P0.01or P0.05)。在相同暴露濃度下,112.5-900μl/ml的VeraBond各組浸出液細(xì)胞活性均低于Kera N, TILITF "V", N.P. Partial和StarLoy C(P0.01)。暴露濃度為450-900μl/ml的Kera N浸出液細(xì)胞活性低于N.P. Partial (P0.01).TILITE"V"浸出液在暴露濃度為225和900μl/ml時(shí),細(xì)胞活性低于N.P. Partial (P0.01). StarLoy C浸出液在暴露濃度為112.5和900μ1/ml時(shí)細(xì)胞活性低于N.P. Partial (P0.01).CCK-8試驗(yàn)結(jié)果顯示,N.P. Partial浸出液在暴露濃度為112.5-900μl/ml時(shí)細(xì)胞活性明顯高于、/eraBond (P0.01),在暴露濃度為900μl/ml時(shí)細(xì)胞活性明顯高于Kera N (P0.01). StarLoy C浸出液在暴露濃度為900μl/ml時(shí)細(xì)胞活性明顯高于VeraBond (P0.01). CBMN試驗(yàn)中,五種合金浸出液在各暴露濃度誘發(fā)的人B淋巴母細(xì)胞的微核率(MNF)和核分裂指數(shù)(NDI)與陰性對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P0.05)。彗星試驗(yàn)結(jié)果顯示,人B淋巴母細(xì)胞暴露于五組合金浸出液誘發(fā)的%tail DNA(尾部DNA百分比)和Olive尾矩(OTM)與陰性對(duì)照組比較,均無(wú)明顯增加(P0.05)。人群口腔頰粘膜微核試驗(yàn)調(diào)查結(jié)果表明,Ni-Cr合金修復(fù)體戴入后頰粘膜細(xì)胞MNF和微核細(xì)胞率(MCF)分別為1.68±2.04‰和1.29±1.43‰,對(duì)照組MNF和MCF分別為1.62±1.89‰和1.09±1.16‰,兩組之間無(wú)顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論:五種牙科合金用彗星試驗(yàn)和CBMN試驗(yàn)體外實(shí)驗(yàn)未能檢測(cè)出有明顯的遺傳毒性,與人群調(diào)查口腔粘膜微核試驗(yàn)也未檢測(cè)出使用牙科合金病人的口腔粘膜細(xì)胞有明顯的遺傳損傷的結(jié)果相符合,根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明這些牙科合金使用還是基本安全的。但NRU和CCK-8體外試驗(yàn)檢測(cè)五種牙科合金細(xì)胞毒性,發(fā)現(xiàn)有明顯的差異,而且這些差異與合金中析出的Ni和Be離子濃度有關(guān),建議臨床應(yīng)選用細(xì)胞毒性低的牙科合金,以提高合金與周圍組織的相容性及減少對(duì)周圍組織的刺激。
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R783.1
本文編號(hào):2691209
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R783.1
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):2691209
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