牙齦卟啉單胞菌蛋白酶基因rgpA與rgpB催化結(jié)構(gòu)域的克隆和表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2020-05-28 20:45
【摘要】: 目的:克隆牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)rgpA、rgpB催化結(jié)構(gòu)域,構(gòu)建rgpA、rgpB催化結(jié)構(gòu)域原核表達(dá)系統(tǒng)。 方法:采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)從Pg ATCC 33277菌株中擴(kuò)增rgpA、rgpB催化結(jié)構(gòu)域,T-A克隆后測(cè)定核苷酸序列,構(gòu)建pET42a的rgpA/rgpB催化結(jié)構(gòu)域表達(dá)載體,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同濃度的IPTG誘導(dǎo)其表達(dá)。 結(jié)果:所克隆的Pg ATCC 33277菌株rgpA、rgpB基因催化結(jié)構(gòu)域的核苷酸序列與報(bào)道的相應(yīng)核苷酸序列同源性分別為98.9%、99.0%,氨基酸序列同源性分別高達(dá)99.2%、99.1%。pET42a-rgpA/rgp B-BL21DE3系統(tǒng)的蛋白表達(dá)量為細(xì)菌總蛋白的60%左右。 結(jié)論:本研究成功地構(gòu)建了Pg rgpA、rgpB催化結(jié)構(gòu)域高效表達(dá)系統(tǒng),為測(cè)定RgpA、RgpB免疫原性及作用提供前提。
【圖文】:
srnmo比、o.lmmol/LlpTG誘導(dǎo)pET42a-卿Aed一EcoliBLZIDE3的R即A
aIZ,11,21外傷冠折后X一ra)h!2,11,21根管治打后X一ray
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2009
【分類號(hào)】:R780.2
本文編號(hào):2685810
【圖文】:
srnmo比、o.lmmol/LlpTG誘導(dǎo)pET42a-卿Aed一EcoliBLZIDE3的R即A
aIZ,11,21外傷冠折后X一ra)h!2,11,21根管治打后X一ray
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2009
【分類號(hào)】:R780.2
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):2685810
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