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去卵巢大鼠下頜下腺AQP-5的表達(dá)變化及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-20 20:13
【摘要】:目的:觀察低雌激素狀態(tài)對(duì)下頜下腺腺泡細(xì)胞中AQP-5表達(dá)分布的影響,探討雌激素經(jīng)SOCE通路以及TRPV1通路參與調(diào)控AQP-5表達(dá)分布的可能機(jī)制。方法:本研究采用成體SD雌性大鼠90只,隨機(jī)分為SHAM組,OVX組和OVX+E組,每組30只。大鼠去卵巢手術(shù)后恢復(fù)2周,β-雌二醇治療4周后,利用放射免疫法檢測(cè)大鼠血清雌二醇含量的變化,利用免疫組化和免疫熒光方法觀察AQP-5,STIM1,Orai1,M1,M3,NOS-1和TRPV1在頜下腺的變化情況,免疫印跡方法觀察STIM1和Orai1在蛋白水平表達(dá)量的改變,鈣成像技術(shù)觀察下頜下腺腺泡細(xì)胞內(nèi)鈣離子的改變,乙酰膽堿酯酶染色法觀察下頜下腺乙酰膽堿酯酶的變化情況。結(jié)果:大鼠去卵巢后,血清雌二醇含量明顯下降。免疫組化和免疫熒光結(jié)果顯示,AQP-5主要表達(dá)在下頜下腺腺泡細(xì)胞的頂膜和側(cè)膜,去卵巢后大鼠下頜下腺腺泡細(xì)胞AQP-5總表達(dá)量無(wú)顯著改變,但頂膜AQP-5表達(dá)顯著減少,側(cè)膜明顯增加,胞漿內(nèi)無(wú)顯著變化,雌激素干預(yù)后較OVX組相比,頂膜AQP-5表達(dá)增多,側(cè)膜表達(dá)減少,接近SHAM組水平。NOS-1,TRPV1,M1和M3主要表達(dá)在下頜下腺腺泡細(xì)胞和導(dǎo)管細(xì)胞,大鼠去卵巢后,表達(dá)較SHAM組均顯著降低,給予雌二醇干預(yù)后恢復(fù)到SHAM組水平。免疫熒光雙標(biāo)和免疫印跡結(jié)果顯示,STIM1和Orai1在下頜下腺腺泡細(xì)胞可以共定位,且OVX組STIM1和Orai1表達(dá)減少,雌激素干預(yù)后表達(dá)增多,接近SHAM組水平。鈣成像技術(shù)顯示,OVX組大鼠下頜下腺腺泡細(xì)胞中鈣離子濃度顯著下降,雌激素治療后得到改善,接近SHAM組水平。乙酰膽堿酯酶染色結(jié)果顯示,大鼠去卵巢后下頜下腺AchE表達(dá)較SHAM組顯著增加,雌激素干預(yù)后無(wú)顯著改善。結(jié)論:上述結(jié)果提示,STIM1-Orai1通路和TRPV1通路均可能通過(guò)調(diào)控AQP-5引發(fā)圍絕經(jīng)期下頜下腺唾液分泌障礙。
【圖文】:

動(dòng)情期,細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì),大鼠


圖 2.1.1 大鼠動(dòng)情期和非動(dòng)情期陰道細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)動(dòng)情期細(xì)胞較大,呈多邊形,細(xì)胞質(zhì)豐富,,非動(dòng)情期細(xì)胞小而圓。標(biāo)尺:30μm。2.2 大鼠血清雌二醇含量OVX 組血清雌二醇含量較 SHAM 組顯著降低(6.958±3.236 pg/ml vs 14.642±4.213 pg/ml, P<0.01),OVX+E 組與 OVX 組相比含量增加(13.858±5.138 pg/ml vs6.958±3.236 pg/ml, P<0.01),但較 SHAM 組無(wú)顯著差異(13.858±5.138 pg/ml vs14.642±4.213 pg/ml, P>0.05)(圖 2.2.1)。

動(dòng)情期,標(biāo)尺,細(xì)胞質(zhì),大鼠


圖 2.1.1 大鼠動(dòng)情期和非動(dòng)情期陰道細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)較大,呈多邊形,細(xì)胞質(zhì)豐富,非動(dòng)情期細(xì)胞小而圓。標(biāo)尺:3雌二醇含量雌二醇含量較 SHAM 組顯著降低(6.958±3.236 pg/m.01),OVX+E 組與 OVX 組相比含量增加(13.858±5/ml, P<0.01),但較 SHAM 組無(wú)顯著差異(13.858±5/ml, P>0.05)(圖 2.2.1)。
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R781

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本文編號(hào):2673138

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