【摘要】：正畸過程中,牙齒受到機械力,受壓側(cè)牙槽骨吸收,牽張側(cè)牙槽骨形成,骨質(zhì)發(fā)生緩慢改建,從而牙齒得以移動,隨著牙齒移動有可能發(fā)生根吸收。正畸源性根吸收,作為一種正畸并發(fā)癥,受到越來越多學(xué)者的關(guān)注。相關(guān)研究表明,正畸過程中影響根吸收的因素很多,如激素、基因、力大小、藥物、超聲、激光等,其因素復(fù)雜且多樣,需要進行大量而細(xì)致的研究。交感神經(jīng)系統(tǒng)不僅在調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)和內(nèi)臟器官功能方面發(fā)揮重要作用,其同樣參與骨改建過程,交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮后,其釋放的神經(jīng)遞質(zhì)可以作用于成骨細(xì)胞,與其表面的β2腎上腺素能受體結(jié)合,通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用,增加成骨細(xì)胞的核因子-κB受體活化因子配體(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)表達,破骨前體細(xì)胞與之結(jié)合,進一步分化成熟,形成破骨細(xì)胞,發(fā)揮骨吸收作用。根吸收和骨吸收類似,都包括無機物酸化和有機物降解過程,這一過程分別由破牙骨質(zhì)細(xì)胞和破骨細(xì)胞介導(dǎo),破牙骨質(zhì)細(xì)胞和破骨細(xì)胞無論是在形態(tài)結(jié)構(gòu)還是在生理功能上都具有相似性,那么交感神經(jīng)是否影響破牙骨質(zhì)細(xì)胞活動從而影響根吸收,這值得我們進行研究。因此,了解交感神經(jīng)對正畸源性根吸收的影響,以及其作用機制,這具有重要意義。目的:本研究以大鼠為實驗對象建立正畸牙移動模型,觀察β2受體抑制劑普萘洛爾(propranolol,PRO)和β2受體激動劑異丙腎上腺素(isoproterenol,ISO)對正畸源性根吸收的影響,并分析其相關(guān)作用機制,為臨床上關(guān)注正畸患者精神、神經(jīng)狀況對正畸過程的影響提供一定的參考依據(jù)。方法:選取36只8周齡無特定病原體(specific pathogen free,SPF)級健康雄性Sprague-Dawley大鼠建立正畸牙移動實驗?zāi)Ｐ?隨機分為普萘洛爾(PRO)組、異丙腎上腺素(ISO)組和對照組,每組各12只。每組大鼠分別腹腔注射PRO(20mg/kg/d)、ISO(5mg/kg/d)和等體積的生理鹽水。鎳鈦螺旋拉簧的加力周期為1w。3組動物于正畸加力14d后,采用心內(nèi)灌注法處死。分離大鼠上頜第一磨牙及其周圍牙槽骨,每組隨機選取6只標(biāo)本,經(jīng)脫鈣后切片染色觀察:1.HE染色:觀察牙根、牙周膜及對應(yīng)牙槽骨的組織形態(tài)。2.TRAP染色:破骨細(xì)胞和破牙骨質(zhì)細(xì)胞特異性染色,觀察并計數(shù)比較。3.免疫組織化學(xué)染色:檢測牙根周圍RANKL表達并計算吸光度值。4.MicroCT掃描:每組剩余的6只標(biāo)本,小心分離出上頜左側(cè)第一磨牙,采用影像學(xué)觀察分析,用MicroCT掃描大鼠離體上頜第一磨牙,測量分析第一磨牙近中根體積,取平均值,比較各組之間的差異。應(yīng)用SPSS19.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:1.大體觀察:實驗期間,三組大鼠安裝矯治器后,因手術(shù)創(chuàng)傷、飲食不便等逐漸體重下降,在第4天體重下降到最低,在第5天大鼠體重開始恢復(fù)正常增長。所有大鼠全部納入實驗。整個實驗期間,三組大鼠平均體重?zé)o明顯差異(P0.05)。2.HE染色:受壓側(cè)牙周膜變窄,壓力側(cè)牙根表面的連續(xù)性被破壞,牙根表面出現(xiàn)大小不一的凹陷,有的凹陷區(qū)內(nèi)可見多核巨細(xì)胞。三組大鼠的牙根表面吸收深度和范圍差異較大,吸收嚴(yán)重的區(qū)域,牙本質(zhì)吸收也較多。PRO組的牙根表面吸收程度與對照組相比,表現(xiàn)較輕;ISO組的根吸收程度與對照組相比,表現(xiàn)較重。3.TRAP染色:TRAP染色陽性的細(xì)胞較大,形態(tài)不規(guī)則,表現(xiàn)為胞漿紅染,胞核藍(lán)色且多核。TRAP染色陽性細(xì)胞主要位于牙根受壓力區(qū)域和與其對應(yīng)的牙槽骨附近,并且主要沿吸收區(qū)域分布。計數(shù)并分析染色陽性細(xì)胞數(shù)目,結(jié)果顯示PRO組染色陽性細(xì)胞平均數(shù)目低于對照組(P0.05);ISO組染色陽性細(xì)胞平均數(shù)目高于對照組(P0.05)。4.RANKL染色:RANKL的著色區(qū)域為細(xì)胞的胞漿。各組在牙周的壓力側(cè)均可見到RANKL的陽性表達,且各組的表達強度不同。利用圖像軟件半定量分析,得出各組平均光密度值,結(jié)果表明:PRO組的RANKL表達量低于對照組(P0.05),ISO組的RANKL表達量高于對照組(P0.01)。5.MicroCT分析:大鼠離體上頜第一磨牙表面不光滑,凹凸不平。通過對第一磨牙近中根的體積測量分析,三個組的平均牙根體積存在顯著差異,PRO組的平均牙根體積大于對照組(P0.01);ISO組的平均牙根體積小于對照組(P0.05)。結(jié)論:1.β2受體抑制劑使大鼠牙移動過程中壓力側(cè)破牙骨質(zhì)細(xì)胞減少,從而使根吸收減少;β2受體激動劑使壓力側(cè)破牙骨質(zhì)細(xì)胞增多,從而使根吸收增加。2.交感神經(jīng)可以通過β2受體影響大鼠正畸牙移動中的根吸收。3.交感神經(jīng)可以通過β2受體影響RANKL的表達從而影響大鼠正畸牙移動中的根吸收。
【圖文】：

大鼠正畸牙移動模型

異丙腎上腺素分子結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R783.5

【參考文獻】

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本文編號：2669920