【摘要】：正畸過(guò)程中,牙齒受到機(jī)械力,受壓側(cè)牙槽骨吸收,牽張側(cè)牙槽骨形成,骨質(zhì)發(fā)生緩慢改建,從而牙齒得以移動(dòng),隨著牙齒移動(dòng)有可能發(fā)生根吸收。正畸源性根吸收,作為一種正畸并發(fā)癥,受到越來(lái)越多學(xué)者的關(guān)注。相關(guān)研究表明,正畸過(guò)程中影響根吸收的因素很多,如激素、基因、力大小、藥物、超聲、激光等,其因素復(fù)雜且多樣,需要進(jìn)行大量而細(xì)致的研究。交感神經(jīng)系統(tǒng)不僅在調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)和內(nèi)臟器官功能方面發(fā)揮重要作用,其同樣參與骨改建過(guò)程,交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮后,其釋放的神經(jīng)遞質(zhì)可以作用于成骨細(xì)胞,與其表面的β2腎上腺素能受體結(jié)合,通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用,增加成骨細(xì)胞的核因子-κB受體活化因子配體(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)表達(dá),破骨前體細(xì)胞與之結(jié)合,進(jìn)一步分化成熟,形成破骨細(xì)胞,發(fā)揮骨吸收作用。根吸收和骨吸收類(lèi)似,都包括無(wú)機(jī)物酸化和有機(jī)物降解過(guò)程,這一過(guò)程分別由破牙骨質(zhì)細(xì)胞和破骨細(xì)胞介導(dǎo),破牙骨質(zhì)細(xì)胞和破骨細(xì)胞無(wú)論是在形態(tài)結(jié)構(gòu)還是在生理功能上都具有相似性,那么交感神經(jīng)是否影響破牙骨質(zhì)細(xì)胞活動(dòng)從而影響根吸收,這值得我們進(jìn)行研究。因此,了解交感神經(jīng)對(duì)正畸源性根吸收的影響,以及其作用機(jī)制,這具有重要意義。目的:本研究以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象建立正畸牙移動(dòng)模型,觀察β2受體抑制劑普萘洛爾(propranolol,PRO)和β2受體激動(dòng)劑異丙腎上腺素(isoproterenol,ISO)對(duì)正畸源性根吸收的影響,并分析其相關(guān)作用機(jī)制,為臨床上關(guān)注正畸患者精神、神經(jīng)狀況對(duì)正畸過(guò)程的影響提供一定的參考依據(jù)。方法:選取36只8周齡無(wú)特定病原體(specific pathogen free,SPF)級(jí)健康雄性Sprague-Dawley大鼠建立正畸牙移動(dòng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?隨機(jī)分為普萘洛爾(PRO)組、異丙腎上腺素(ISO)組和對(duì)照組,每組各12只。每組大鼠分別腹腔注射PRO(20mg/kg/d)、ISO(5mg/kg/d)和等體積的生理鹽水。鎳鈦螺旋拉簧的加力周期為1w。3組動(dòng)物于正畸加力14d后,采用心內(nèi)灌注法處死。分離大鼠上頜第一磨牙及其周?chē)啦酃?每組隨機(jī)選取6只標(biāo)本,經(jīng)脫鈣后切片染色觀察:1.HE染色:觀察牙根、牙周膜及對(duì)應(yīng)牙槽骨的組織形態(tài)。2.TRAP染色:破骨細(xì)胞和破牙骨質(zhì)細(xì)胞特異性染色,觀察并計(jì)數(shù)比較。3.免疫組織化學(xué)染色:檢測(cè)牙根周?chē)鶵ANKL表達(dá)并計(jì)算吸光度值。4.MicroCT掃描:每組剩余的6只標(biāo)本,小心分離出上頜左側(cè)第一磨牙,采用影像學(xué)觀察分析,用MicroCT掃描大鼠離體上頜第一磨牙,測(cè)量分析第一磨牙近中根體積,取平均值,比較各組之間的差異。應(yīng)用SPSS19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1.大體觀察:實(shí)驗(yàn)期間,三組大鼠安裝矯治器后,因手術(shù)創(chuàng)傷、飲食不便等逐漸體重下降,在第4天體重下降到最低,在第5天大鼠體重開(kāi)始恢復(fù)正常增長(zhǎng)。所有大鼠全部納入實(shí)驗(yàn)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間,三組大鼠平均體重?zé)o明顯差異(P0.05)。2.HE染色:受壓側(cè)牙周膜變窄,壓力側(cè)牙根表面的連續(xù)性被破壞,牙根表面出現(xiàn)大小不一的凹陷,有的凹陷區(qū)內(nèi)可見(jiàn)多核巨細(xì)胞。三組大鼠的牙根表面吸收深度和范圍差異較大,吸收嚴(yán)重的區(qū)域,牙本質(zhì)吸收也較多。PRO組的牙根表面吸收程度與對(duì)照組相比,表現(xiàn)較輕;ISO組的根吸收程度與對(duì)照組相比,表現(xiàn)較重。3.TRAP染色:TRAP染色陽(yáng)性的細(xì)胞較大,形態(tài)不規(guī)則,表現(xiàn)為胞漿紅染,胞核藍(lán)色且多核。TRAP染色陽(yáng)性細(xì)胞主要位于牙根受壓力區(qū)域和與其對(duì)應(yīng)的牙槽骨附近,并且主要沿吸收區(qū)域分布。計(jì)數(shù)并分析染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目,結(jié)果顯示PRO組染色陽(yáng)性細(xì)胞平均數(shù)目低于對(duì)照組(P0.05);ISO組染色陽(yáng)性細(xì)胞平均數(shù)目高于對(duì)照組(P0.05)。4.RANKL染色:RANKL的著色區(qū)域?yàn)榧?xì)胞的胞漿。各組在牙周的壓力側(cè)均可見(jiàn)到RANKL的陽(yáng)性表達(dá),且各組的表達(dá)強(qiáng)度不同。利用圖像軟件半定量分析,得出各組平均光密度值,結(jié)果表明:PRO組的RANKL表達(dá)量低于對(duì)照組(P0.05),ISO組的RANKL表達(dá)量高于對(duì)照組(P0.01)。5.MicroCT分析:大鼠離體上頜第一磨牙表面不光滑,凹凸不平。通過(guò)對(duì)第一磨牙近中根的體積測(cè)量分析,三個(gè)組的平均牙根體積存在顯著差異,PRO組的平均牙根體積大于對(duì)照組(P0.01);ISO組的平均牙根體積小于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論:1.β2受體抑制劑使大鼠牙移動(dòng)過(guò)程中壓力側(cè)破牙骨質(zhì)細(xì)胞減少,從而使根吸收減少;β2受體激動(dòng)劑使壓力側(cè)破牙骨質(zhì)細(xì)胞增多,從而使根吸收增加。2.交感神經(jīng)可以通過(guò)β2受體影響大鼠正畸牙移動(dòng)中的根吸收。3.交感神經(jīng)可以通過(guò)β2受體影響RANKL的表達(dá)從而影響大鼠正畸牙移動(dòng)中的根吸收。
【圖文】：

大鼠正畸牙移動(dòng)模型

異丙腎上腺素分子結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R783.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2669920