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間歇性、周期性下頜前伸力對髁突軟骨Sox9、Ⅱ型膠原表達的影響

發(fā)布時間:2020-05-15 13:55
【摘要】:目的:安氏Ⅱ類錯牙合是正畸臨床中常見的錯牙合畸形,約占正畸就診患者的30%,其不僅影響患者的顏面美觀,咀嚼功能及顳下頜關(guān)節(jié)的健康,甚至還會誘發(fā)心理問題。目前臨床上常采用功能矯治器矯治青春高峰前期及高峰期骨性下頜后縮,然而,功能矯治器尚存在種種弊端,例如增加患者的痛苦,療效的不確定性等,因此正畸臨床醫(yī)生一直致力于在現(xiàn)有臨床技術(shù)的基礎(chǔ)上,尋找更快速、高效的方法促進顳下頜關(guān)節(jié)的改建及下頜骨的生長。目前研究發(fā)現(xiàn)周期性機械刺激可以促進軟骨細胞合成代謝,并上調(diào)細胞外基質(zhì)的合成,加速軟骨細胞增殖。作為軟骨增殖分化的重要調(diào)控因子及標志物,Sox9及Ⅱ型膠原的表達水平反映了髁突軟骨增殖、分化情況,因此本實驗擬通過建立動物模型來探討間歇性、周期性下頜前伸力對大鼠髁突Sox9、Ⅱ型膠原表達的影響。 方法:選擇5周齡雄性Wistar大鼠28只,隨機分為四組,周期性加力組,靜止性加力組,功能性矯治器組,對照組(n=7)。功能組動物每天24小時戴用自制統(tǒng)一規(guī)格的上頜固定功能矯治器,周期性加力組及靜止性加力組大鼠每日上午麻醉后,運用自行研制的下頜前伸裝置分別給予周期性下頜前伸力,頻率0.5Hz,時間60min,及靜止性下頜前伸力,頻率為0Hz,時間60min。對照組僅麻醉不給予下頜前伸力。于實驗后2周乙醚深度麻醉處死大鼠,取顳下頜關(guān)節(jié)標本,常規(guī)固定脫鈣后石蠟切片,進行免疫組織化學(xué)染色,觀察髁突軟骨各層組織形態(tài)學(xué)變化,運用Image-pro plus6.0軟件對各組切片髁突軟骨厚度、Sox9及Ⅱ型膠原的陽性表達進行半定量分析。應(yīng)用SPSS for windows(Version17.0SPSS Inc.)統(tǒng)計分析軟件包對各組數(shù)據(jù)之間利用單因素方差分析LSD法進行兩兩比較。 結(jié)果: 1、動態(tài)組及功能組Sox9陽性表達細胞數(shù)目明顯高于對照組,具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001);靜態(tài)組Sox9陽性表達細胞數(shù)目稍低于對照組,但無明顯統(tǒng)計學(xué)差異;另外,動態(tài)組Sox9陽性表達細胞數(shù)目明顯高于靜態(tài)組,具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.001)。 2、動態(tài)組Sox9陽性表達面積明顯高于對照組,且有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);功能組及靜態(tài)組Sox9陽性表達面積低于稍對照組,但無統(tǒng)計學(xué)差異;動態(tài)組Sox9陽性表達面積數(shù)目明顯高于靜態(tài)組,有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.001)。 3、動態(tài)組及功能組Ⅱ型膠原陽性表達面積明顯高于對照組,且具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001);靜態(tài)組Ⅱ型膠原陽性表達面積稍高于對照組,但無統(tǒng)計學(xué)差異;動態(tài)組Ⅱ型膠原陽性表達面積顯著高于靜態(tài)組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001) 結(jié)論: 1、2周后短期間歇性、周期性下頜前伸力(1h)可顯著增加Sox9、Ⅱ型膠原的表達,這提示其可促進髁突軟骨細胞增殖、分化,引發(fā)顳下頜關(guān)節(jié)適應(yīng)性改建。 2、短期間歇性靜止拉應(yīng)力的作用與對照組相比并不明顯,尚需進一步驗證。 3、2周后功能矯治器引導(dǎo)大鼠下頜前伸使髁突軟骨厚度、Sox9陽性細胞表達數(shù)目及Ⅱ型膠原表達面積均較對照組增加,這提示其在髁突成軟骨方面作用顯著。
【圖文】:

牽引裝置,大鼠,靜止性,支架上


物實驗需要設(shè)計、制作了“大鼠下頜前伸牽引分組成(圖 3.1.1)。每日上午同一時間乙醚麻體重,以 100mg/kg 的劑量腹腔注射氯胺酮及,仰臥于裝置的支架上,將大鼠頭部與身體,同時將四肢固定在支架上,將裝置的機械節(jié)牽引方向與大鼠牙合平面約呈 30 度角進行牽伸位,力值為 100g(圖 3.1.3)。周期性下間 60min 周期性下頜前伸力,靜止性下頜 靜止性下頜前伸力。在實驗中為避免大鼠上次定期磨短上下切牙。

測量區(qū)


干標本周圍多余水分,于標本上滴加顯色劑各 50μl,顯,終止顯色反應(yīng);木精復(fù)染 1min;在 80%酒精Ⅰ、Ⅱ,90%酒精Ⅰ、Ⅱ,,二甲苯Ⅰ、Ⅱ中分別脫水 5min;中性樹膠封片。像分析組化圖像采集應(yīng)用光學(xué)顯微鏡,,選取 200 倍放大率,每張上部作為重點觀察部位,選取圖像。利用 Image-pro plus6,感興趣區(qū)域(Area of Interest, AOI)為以關(guān)節(jié)盤纖維增殖層開始大小為 400×150μm 的矩形框(圖 3.3),對 A)內(nèi) Sox9、Ⅱ型膠原的表達進行半定量分析。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R783.5

【共引文獻】

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5 劉瑩;間歇性、周期性下頜前伸力對髁突Runx2,X型膠原表達的影響[D];吉林大學(xué);2012年



本文編號:2665140

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