【摘要】： 目的:在建立骨膜牽張成骨犬實(shí)驗(yàn)腭裂模型的基礎(chǔ)上,通過自行設(shè)計(jì)的鎳鈦記憶合金牽張器對腭裂裂隙緣的骨膜進(jìn)行牽張,檢測不同時期激活素A(activin,ACT A)和卵泡抑素(follistatin,FS)mRNA的表達(dá),探討ACT A/F S系統(tǒng)對腭裂邊緣骨膜牽張成骨修復(fù)的調(diào)節(jié)模式,同時觀察不同時期新骨形成的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),研究新骨形成的連續(xù)過程及規(guī)律,對骨膜牽張成骨修復(fù)腭裂的機(jī)理進(jìn)行初步探討。 材料與方法: 本研究分為兩個部分: 1.犬硬腭骨膜牽張成骨術(shù)中激活素A和卵泡抑素表達(dá)的研究 1.1選用健康雜種幼犬15只,手術(shù)建立骨膜牽張成骨的犬實(shí)驗(yàn)腭裂模型,并于腭裂模型制作后兩個月,于腭裂裂隙緣骨膜下安放鎳鈦合金骨膜牽張器,以鈦釘固定,牽張器即以250±20g牽張力持續(xù)牽引骨膜。 1.2在骨膜牽張器放置后10、20、30、40和60天,各處死3只動物,切取牽張側(cè)的新生骨組織及對照側(cè)骨切開處未牽張的骨組織提取RNA,用RT-PCR檢測ACTA、FSmRNA各時期的表達(dá)。 2.腭裂緣骨膜牽張成骨的新骨形成研究 2.1選用健康雜種幼犬10R,其中8只動物的手術(shù)及牽張器的放置方法同第一部分,2只動物不作任何處理。 2.2在骨膜牽張器放置后20、30、40和60天,各處死動物2只,共8只,骨膜牽張器放置一側(cè)為實(shí)驗(yàn)組,未放置一側(cè)為對照組。另2只不作任何處理動物為空白對照組,于飼養(yǎng)60天后處死。在處死動物前14天和前3天肌肉注射四環(huán)素(50 mg/kg),處死后切取含實(shí)驗(yàn)組新骨組織、對照組以及空白對照組骨組織的0.5cm×1cm大小骨塊,采用硬組織骨切片技術(shù),進(jìn)行組織學(xué)分析和骨組織計(jì)量學(xué)動態(tài)參數(shù)檢測,探討新骨形成規(guī)律。 結(jié)果:(1)RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果:對照側(cè)骨切開未牽張的骨組織10至60天標(biāo)本檢測出少量ACT A和FS mRNA,各組間比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。牽張側(cè)的新骨組織在骨膜牽張器放置后10天已有ACT A和FS mRNA的表達(dá),隨著骨膜牽張器放置時間延長,ACT A和FS mRNA的表達(dá)量逐漸上升,骨膜牽張器放置后20、30、40及60天ACT A mRNA表達(dá)量分別為lO天的1.78、2.82、4.27及3.04倍;骨膜牽張器放置后20、30、40及60天FS mRNA表達(dá)量分別為10天的1.52、2.12、2.47及1.90倍。牽張側(cè)ACT A mRNA的表達(dá)量10天與20天標(biāo)本比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);10天與30、40及60天標(biāo)本比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);20天與30天標(biāo)本比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);20天與40、60天標(biāo)本比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);30天與40、60天標(biāo)本比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);40與60天標(biāo)本比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。牽張側(cè)FSmRNA的表達(dá)量10天與20天標(biāo)本比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);10天與30、40及60天標(biāo)本比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);20天與30、40、60天標(biāo)本比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05):30天與40、60天標(biāo)本比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);40與60天標(biāo)本比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。ACT A mRNA表達(dá)量對照側(cè)與牽張側(cè)10天樣本比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);對照側(cè)與牽張側(cè)20天樣本比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);對照側(cè)與牽張側(cè)30、40、60天樣本比較,差異有非常顯著意義(p＜0.01)。FS mRNA的表達(dá)量對照側(cè)與牽張側(cè)10、20天樣本比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);對照側(cè)與牽張側(cè)30、40、60天樣本比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);(2)腭裂模型的裂隙緣骨膜受牽張后,最終在骨膜下形成了新骨。組織學(xué)觀察結(jié)果顯示了新生骨在成骨細(xì)胞數(shù)量上的增長,以及膠原纖維和骨小梁排列方向上的變化。大量沿牽張方向排列的膠原纖維組織在增生成骨細(xì)胞作用下,鈣化沉積為新骨,并逐漸改建成熟;(3)四環(huán)素?zé)晒鈽?biāo)記結(jié)果:在骨膜牽張器放置后不同牽張時期熒光標(biāo)記帶長度及面積上的變化,熒光亮度由弱變強(qiáng),雙標(biāo)記線由無到有,雙標(biāo)間距由窄變寬,顯示了新骨形成過程的一個動態(tài)變化規(guī)律;(4)骨組織計(jì)量學(xué)動態(tài)參數(shù)測量結(jié)果:對照組在靠近骨切開處僅見少量散在熒光帶分布,未見有明顯四環(huán)素雙標(biāo)線形成;實(shí)驗(yàn)組20、30、40及60天四環(huán)素雙標(biāo)平均間距分別為:46.07±0.58μm、77.36±2.5μm、97.18±1.6μm、115.2±2.91μm,各組間比較差異有非常顯著意義(p＜0.01);實(shí)驗(yàn)組20、30、40及60天平均礦化沉積率分別為:4.18±0.05μm/d、7.03±0.23μm/d、8.83±0.15μm/d、10.47±0.2μm/d,各組間比較差異有非常顯著意義(p＜0.01)。 結(jié)論:在犬硬腭骨膜牽張過程中ACT A可能通過直接或間接方式增強(qiáng)膜內(nèi)成骨,FS參與對ACT A生物活性的調(diào)節(jié),ACT A/F S系統(tǒng)起重要調(diào)節(jié)作用。新骨形成是沿牽張方向的膜內(nèi)成骨方式完成的,在骨膜牽張器放置20天牽張區(qū)已有新骨形成,隨著牽張時間延長成骨量逐漸增加,40天的成骨活動最活躍,至60天時新骨鈣化程度較成熟,以骨改建和塑形為主。本研究通過制造腭裂的動物模型后,在腭裂的裂隙緣安放自行設(shè)計(jì)的鎳鈦記憶合金牽張器,經(jīng)過鎳鈦合金的記憶效應(yīng)牽張骨膜,以原位產(chǎn)生新骨,最終在骨膜下形成新骨,表明了骨膜牽張能夠在口腔頜面部形成一定的新骨。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R782

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 周毅;韓澤民;;母血中預(yù)測子vN前期標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J];天津醫(yī)藥;2011年09期

2 陳銀銀;薛志剛;謝渭芬;范國平;;胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞源性肝細(xì)胞樣細(xì)胞研究進(jìn)展[J];胃腸病學(xué);2011年01期

3 ;[J];;年期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

相關(guān)會議論文 前10條

1 柳忠輝;馬迪;王軼楠;閆楓;劉海巖;陳芳芳;于f ;臺桂香;;激活素A介導(dǎo)Con A誘導(dǎo)的小鼠肝損傷作用研究[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

2 李奕;;胎盤抑制素、激活素和卵泡抑素系統(tǒng)與妊娠進(jìn)展關(guān)系的研究[A];第八次全國婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

3 戴紅;陳宏君;;血清激活素A對胎兒窘迫的預(yù)測價值[A];中華醫(yī)學(xué)會第五次全國圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

4 柳忠輝;張鵬宇;張紅軍;張學(xué)軍;王世瑤;臺桂香;;ActRIPs介導(dǎo)的激活素調(diào)控小鼠巨噬細(xì)胞活性的信號傳導(dǎo)機(jī)制研究[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

5 柳忠輝;張學(xué)軍;勞鳳學(xué);李一;;激活素受體相互作用蛋白3的基因克隆和鑒定[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

6 鄧金勇;宋慶高;陳尚;蔣練;;犬硬腭骨膜牽張成骨術(shù)中激活素A和卵泡抑素表達(dá)的研究[A];第七屆全國唇腭裂學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

7 董輝;黃志紅;王蘭;;健康成年人外周血激活素A及FSH水平的隨齡變化[A];第十屆全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

8 柳忠輝;臺桂香;方琳;葛敬巖;劉海巖;于f ;;激活素A促進(jìn)背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元存活、神經(jīng)突起生長作用及其機(jī)制研究[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

9 陳穎;何方方;王增艷;;激活素-抑制素-卵泡抑素系統(tǒng)對小鼠卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎發(fā)育潛能的影響機(jī)制[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)分會、中國動物學(xué)會生殖生物學(xué)分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

10 池海虹;周穎;;激活素A對凍融人胎兒卵巢組織原始卵泡體外發(fā)育的影響[A];2008年浙江省婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)年會暨浙江省醫(yī)師協(xié)會婦產(chǎn)科醫(yī)師分會成立大會論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 張?zhí)锟?你從哪里來 要到哪里去[N];科技日報(bào);2002年

2 見習(xí)記者　 李建波;消費(fèi)者請謹(jǐn)慎購買美白祛斑產(chǎn)品 標(biāo)注天然植物配置卻高含重金屬[N];麗水日報(bào);2006年

3 張積顯;生產(chǎn)出口標(biāo)準(zhǔn)大粒紅提新技術(shù)[N];陜西科技報(bào);2007年

4 本報(bào)記者 劉莉;讓微笑留在每個人的臉上[N];科技日報(bào);2005年

5 記者 馬艷玲;吃發(fā)芽食物治病又長壽[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2010年

6 本報(bào)記者 楊雪松 通訊員 潘虹;“體藝2+1”激活素質(zhì)教育[N];本溪日報(bào);2011年

7 武新;懸壺濟(jì)世路[N];消費(fèi)日報(bào);2003年

8 張稼;遏制癌細(xì)胞流竄：就地“擊斃”[N];大眾科技報(bào);2002年

9 張超群 范曉莉;細(xì)胞免疫功能與IETM水平呈負(fù)相關(guān)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

10 記者 李杜　通訊員 甘永雄;夏家輝多項(xiàng)成果獲歐美專利[N];長沙晚報(bào);2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張學(xué)軍;激活素受體相互作用蛋白2在巨噬細(xì)胞中介導(dǎo)激活素信號傳導(dǎo)機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2004年

2 關(guān)愛華;激活素A與乳腺癌相關(guān)性的研究[D];吉林大學(xué);2007年

3 安麗;激活素對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2004年

4 鮑永利;激活素受體II結(jié)合蛋白基因的克隆、鑒定及激活素A和bFGF對紋狀體多巴胺能神經(jīng)誘導(dǎo)作用的研究[D];吉林大學(xué);2001年

5 劉飆;激活素和bFGF對神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞定向分化誘導(dǎo)作用的研究[D];吉林大學(xué);2007年

6 崔雪玲;激活素受體相互作用蛋白2a全長基因克隆及其與ActRIP1-3的比較研究[D];吉林大學(xué);2006年

7 張鵬宇;激活素調(diào)控小鼠巨噬細(xì)胞活性的信號傳導(dǎo)機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2006年

8 陳穎;激活素—抑制素—卵泡抑素系統(tǒng)在卵母細(xì)胞成熟過程中的影響機(jī)制及其在未成熟卵母細(xì)胞體外成熟技術(shù)中的應(yīng)用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

9 周靜;激活素A誘導(dǎo)樹突樣細(xì)胞分化及巨噬細(xì)胞成熟的作用研究[D];吉林大學(xué);2009年

10 王世瑤;激活素受體相互作用蛋白4的基因克隆及其特性研究[D];吉林大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李楠;激活素A誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細(xì)胞分化和成熟的作用研究[D];吉林大學(xué);2010年

2 楊玉健;胎盤抑制素、激活素和卵泡抑素系統(tǒng)與妊娠進(jìn)展關(guān)系的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2004年

3 陳小平;INH-ACT-FS系統(tǒng)與多囊卵巢綜合征及卵巢功能[D];蘇州大學(xué);2004年

4 劉津;血清中FSH、inhibin A、activin A的含量與卵巢腫瘤的相關(guān)性研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

5 錢海燕;誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];武漢大學(xué);2004年

6 智月麗;激活素-A、環(huán)氧化酶-2與早產(chǎn)兒腦損傷關(guān)系的研究[D];鄭州大學(xué);2009年

7 葉展超;腺病毒介導(dǎo)的人骨形成蛋白2基因轉(zhuǎn)染促進(jìn)骨膜牽張成骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2006年

8 馬鋒;牽張成骨與骨膜牽張成骨過程中肝細(xì)胞生長因子mRNA表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2007年

9 馬迪;激活素A介導(dǎo)的Con A誘導(dǎo)小鼠肝損傷作用[D];吉林大學(xué);2008年

10 程序;激活素A的真核表達(dá)以及中藥抗腫瘤激活素A相關(guān)機(jī)制的初步探討[D];東北師范大學(xué);2008年

，

本文編號：2647797