【摘要】： 正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中，牙周組織的改建是牙周組織細(xì)胞對(duì)機(jī)械力產(chǎn)生 生物學(xué)反應(yīng)的結(jié)果。具體表現(xiàn)為牙周組織細(xì)胞外基質(zhì)（extracellur matrix， ECM）的降解與合成，通過(guò)ECM降解與合成的動(dòng)態(tài)平衡實(shí)現(xiàn)牙齒矯正 的目的。但到目前為止，有關(guān)機(jī)械力作用下，牙周組織ECM代謝的分子 基礎(chǔ)及調(diào)節(jié)機(jī)制人們還并不清楚�；|(zhì)金屬蛋白酶/金屬蛋白酶組織抑制 因子（matrix metalloproteinases/tissue inhibitor of metalloproteinases， MMPs/TIMPs）系統(tǒng)對(duì)ECM的代謝進(jìn)行直接的調(diào)控，而這種調(diào)控作用又 受局部細(xì)胞因子的影響。MMP-3屬M(fèi)MPs家族中基質(zhì)溶解素類(lèi)的一種， 又稱基質(zhì)溶解素—1（stromelysin-1），其作用底物廣泛，不僅可以單獨(dú)降 解構(gòu)成ECM的大部分成份，同時(shí)可以激活MMP-1、MMP-8及MMP-9 等基質(zhì)金屬蛋白酶的活性，共同參與ECM的代謝過(guò)程。因此，圍繞著 MMP-3的表達(dá)與調(diào)控，本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)，結(jié)合細(xì)胞力學(xué) 實(shí)驗(yàn)方法和分子生物學(xué)測(cè)試技術(shù)，首次觀察了在機(jī)械力及白細(xì)胞介素—6 作用下，牙周膜成纖維細(xì)胞和破骨細(xì)胞MMP-3表達(dá)變化的情況，以進(jìn)一 步闡明正畸牙周組織改建過(guò)程中細(xì)胞外基質(zhì)代謝調(diào)節(jié)的分子機(jī)制，為揭 示正畸矯治機(jī)理，探索臨床干預(yù)的可能性和方法提供一條新思路。 本研究主要作了以下幾方面的工作： 一：MMP-3及TIMP-1在大鼠正畸牙周組織改建過(guò)程中的表達(dá) 目的：觀察大鼠正畸牙周組織改建過(guò)程中基質(zhì)金屬蛋白酶—3 （MMP-3）和金屬蛋白酶組織抑制因子-1（TIMP-1）表達(dá)的變化，探討 MMP-3及TIMP-1與正畸牙齒移動(dòng)的關(guān)系。方法：在SD成年大鼠上頜 第口旱巴大學(xué)饞士學(xué)優(yōu)餌文 右側(cè)第一磨牙與上頜切牙之間安置正畸裝置，建立大鼠磨牙移動(dòng)實(shí)驗(yàn)?zāi)?型。于牙齒移動(dòng)1、3、5、7、14天后取材分別進(jìn)行免疫組化染色、圖像 分析。結(jié)果：拋移動(dòng)1天后，牙周組織細(xì)胞MMP3表達(dá)增強(qiáng)，5天后 MMP－3表達(dá)達(dá)到高峰，此時(shí)破骨細(xì)胞胞漿亦呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。以后MMP．3 表達(dá)有所下降，但仍高與對(duì)照組。而TIMP－l于牙齒移動(dòng)3天后表達(dá)開(kāi)始 增強(qiáng)，7天后顯著表達(dá)。結(jié)論：MMP習(xí)及11MP－l參與了正畸牙周組織 改建過(guò)程，MMPS在破骨細(xì)胞性骨吸收中起著重要作用。 二：周期性牽張力對(duì)人牙周膜細(xì)胞MMI，3及TIMP4 的影響 目的：探服期性牽張力又屯廠牙周膜細(xì)胞 M3及 11：MP蛋白表 達(dá)的影響，進(jìn)一步闡明正畸牙周組織改酣程中ECM代猢節(jié)的肝機(jī) 制，e：通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)加載系統(tǒng)，選擇頻率為 6周／b，彈性基底 膜發(fā)生12％形變率的周期性牽張力，利用免疫組化及夾心EtoA檢測(cè)技 術(shù)，觀察HPDLC表達(dá)MMP－3及TIMP－l的相對(duì)強(qiáng)度。結(jié)果：HPDLC在 體外表達(dá)MMP－3及TIMP－l。加載3天后，MMP－3表達(dá)明顯增強(qiáng)，與對(duì) 照組相比具有顯著性差異。而TIMP－l對(duì)機(jī)械力無(wú)應(yīng)答。結(jié)論：在一定條 件下，周期性牽張力可顯著影響HPDLC MMP3蛋白的表達(dá)。為機(jī)枷 ．作用下W3參與牙周組織ECM代謝提供了直接證據(jù)。 三：白娜介盆一6…膜細(xì)胞M3 InRNA及蛋白秘的影響 目的：觀察 IL—6對(duì)人牙周膜細(xì)胞W3蛋白及 W表達(dá)的影 響，探討IL—6介導(dǎo) M對(duì)牙周組織 ECM代獅響的機(jī)制。施： 在體外培養(yǎng)耕下，鵬不同濃度IL—6作用腿是否對(duì)人牙周膜細(xì)胞 MMP3表達(dá)的情況產(chǎn)生影響。采用原位雜交、贓組化及蛋白印跡分析 技術(shù)對(duì)HPDLC表達(dá)WP習(xí)的情況進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：當(dāng)IL—6的濃度為 邑 10w加及11＊M時(shí)，，可顯著刪廚周膜細(xì)胞MM卜31lllUvA及蛋 白的表達(dá)，且熊明顯的濃度喇艦。結(jié)論：IL—6的刺激作用，可使 HPDLC表達(dá) MMP3陽(yáng)性信號(hào)增強(qiáng)，表明 IL一6介導(dǎo) MMP－3參與調(diào)節(jié)牙 周膜細(xì)胞外基質(zhì)代謝。 四：IL一6體外誘導(dǎo)成年大鼠骨矚破骨細(xì)胞形成的實(shí)驗(yàn)觀奈 ．3． 第口罩巨大鈔博士學(xué)讓怕工 目的：探討幾一6對(duì)成年大鼠骨髓破骨細(xì)胞生成誘導(dǎo)的影響。施： 采用12周齡SD大鼠無(wú)菌條件下取出股骨，剪去兩肪端，以a—MEM 將骨髓細(xì)胞沖出，然后將細(xì)胞懸液接種于預(yù)置蓋玻片或牙本質(zhì)片的24 IL 培赧內(nèi)，次日實(shí)驗(yàn)鞭含 IL—6 （ OUhlil）的 Q—MEM培養(yǎng)液繼續(xù)培 養(yǎng)2周，對(duì)照組培養(yǎng)液不含IL—6。結(jié)果：培養(yǎng)一周左右光鏡下觀察實(shí)驗(yàn) 組可見(jiàn)明顯單核細(xì)胞融合成多核細(xì)胞現(xiàn)象，多核細(xì)胞數(shù)量增多。經(jīng)抗酒 石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色呈陽(yáng)性反應(yīng)。電鏡下可觀察到典型的破骨 細(xì)胞骨吸收現(xiàn)象。結(jié)論 幾一6門(mén)）可明顯誘導(dǎo)成年大鼠?
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類(lèi)號(hào)】：R783.5

【引證文獻(xiàn)】

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1 王國(guó)強(qiáng);犬乳恒牙替換過(guò)程中白介素的表達(dá)及意義的研究[D];中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

2 薛永峰;體外誘導(dǎo)培養(yǎng)雞胚破骨細(xì)胞及鈣、磷對(duì)其活性的影響[D];揚(yáng)州大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2644545