【摘要】：目的:研究新疆博州地區(qū)3~5歲漢族、維吾爾族、蒙古族兒童口腔內(nèi)變形鏈球菌的檢出率,分析不同齲敏感兒童口腔中變形鏈球菌基因型與兒童齲病間的相關(guān)性。方法:從新疆博州地區(qū)兒童口腔流行病學(xué)調(diào)查資料樣本庫中分層隨機抽取90名兒童為研究對象,高齲組(齲失補牙數(shù)≥5)及無齲組(齲失補牙數(shù)=0)各45人,每組中漢族、維吾爾族、蒙古族兒童各15人,收集牙菌斑樣本,用輕唾-桿菌肽瓊脂培養(yǎng)基和腦心浸液培養(yǎng)基培養(yǎng)變形鏈球菌,通過革蘭染色,生化鑒定和聚合酶鏈反應(yīng)等方法進一步鑒定臨床分離株,并通過隨機引物聚合酶鏈式反應(yīng)檢測基因型分布。結(jié)果:(1)在90名受檢兒童中變形鏈球菌的檢出率為75.5%,高齲組變形鏈球菌的檢出率為86.7%,高于無齲組的64.4%(P=0.014)。漢族、維吾爾族、蒙古族比較時,變形鏈球菌的檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.457)。(2)本實驗共獲得549株變形鏈球菌臨床菌株,發(fā)現(xiàn)113種不同的基因型。高齲組中61.5%的個體具有兩種及兩種以上變形鏈球菌基因型,無齲組中僅有37.9%的個體具有兩種及兩種以上的基因型,高齲組的變形鏈球菌基因多態(tài)性高于無齲組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.035)。(3)趨勢卡方檢驗結(jié)果表明,三民族兒童口腔內(nèi)變形鏈球菌基因多態(tài)性與齲敏感度有線性相關(guān)關(guān)系(趨勢χ~2=4.767,P=0.029)。結(jié)論:博州地區(qū)兒童口腔內(nèi)變形鏈球菌在不同齲敏感組間的分布有差異,在民族間無差異,高齲組群體中存在的變形鏈球菌比無齲組擁有更多的基因型數(shù)量,其基因多態(tài)性可能與變形鏈球菌的致齲能力相關(guān)。
【圖文】：

1.1 變形鏈球菌菌落檢測和細菌形態(tài)學(xué)鑒定MSB培養(yǎng)基上菌落肉眼觀察結(jié)果：圓形，深藍色，直徑約1mm左右，菌落嵌入瓊脂中，高度凸起、堅硬、邊緣不整齊。（圖1A）革蘭染色后，油鏡下（×100）觀察到變形鏈球菌為革蘭陽性小球菌，菌落散在分布，部分菌落為短鏈或中等長鏈狀。（圖1B）圖 1 變形鏈球菌在 MSB 培養(yǎng)基形態(tài)(A)及革蘭氏染色后的鏡下形態(tài)(B)（×100）Fig.1 Streptococcus mutans morphology in MSB(A) and Gram stain(B)(×100)1.2 變形鏈球菌生化鑒定通過細菌微量生化反應(yīng)管鑒定具有變形鏈球菌典型形態(tài)的臨床分離株, 結(jié)果如圖 2。甘露醇、山梨醇、棉子糖、密二糖的發(fā)酵實驗陽性顯示為黃色，精氨酸陽性呈紅色，七葉苷水解陽性則呈深棕色。變形鏈球菌標準菌株 UA159 生化鑒定結(jié)果：甘露醇、山梨醇、棉子糖、密二糖、七葉苷呈陽性結(jié)果，，精氨酸為陰性結(jié)果；無菌生理鹽水反應(yīng)結(jié)果均為陰性。1.3 變形鏈球菌的 PCR 鑒定使用特異性引物 gtfB 和 gbpB 對變形鏈球菌標準菌株和臨床分離株的基因組DNA 進行擴增，PCR 擴增產(chǎn)物行瓊脂糖凝膠電泳，電泳圖譜顯示變形鏈球菌臨床分離株及陽性對照標準菌株 UA159 的擴增產(chǎn)物均為單一條帶

圖 2 變形鏈球菌生化鑒定結(jié)果Fig.2 Biochemical identification results of Streptococcus mutans甘：甘露醇；山：山梨醇；棉：棉子糖；蜜：蜜二糖；精：精氨酸；七：七葉苷；陽照組變形鏈球菌UA159；陰：陰性對照組無菌生理鹽水；1～14：變形鏈球菌臨床分離
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R788.1

【參考文獻】

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本文編號：2629878