【摘要】：目的:(1)研究靜壓力對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞(HGFs)表達(dá)NDRG1和Smad3的影響;(2)檢測(cè)過(guò)表達(dá)NDRG1對(duì)HGFs增殖能力及表達(dá)Smad3和COL-Ⅰ的影響,探究NDRG1對(duì)靜壓力作用下牙齦組織改建的作用。方法:1、建立HGFs-PLGA三維培養(yǎng)重力加載模型,RT-qPCR、Western Blot檢測(cè)25g/cm~2靜壓力作用于PLGA支架上的HGFs0,12,24,48小時(shí)后,HGFs表達(dá)NDRG1、Smad3mRNA和蛋白的情況;2、以慢病毒為載體轉(zhuǎn)染HGFs,過(guò)表達(dá)NDRG1,CCK-8法檢測(cè)過(guò)表達(dá)NDRG1對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響,RT-qPCR、Western Blot檢測(cè)過(guò)表達(dá)NDRG1后HGFs表達(dá)COL-Ⅰ、Smad3mRNA和蛋白的情況。結(jié)果:(1)25g/cm~2靜壓力作用于PLGA支架上的HGFs后,相對(duì)于0小時(shí)組,不同時(shí)間點(diǎn)NDRG1mRNA和蛋白均明顯上調(diào),在24小時(shí)達(dá)到峰值,各組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)Smad3mRNA自加力后持續(xù)下降,除了24小時(shí)和48小時(shí)時(shí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外,其余各組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Smad3蛋白自加力起亦持續(xù)下降,且各組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)慢病毒轉(zhuǎn)染HGFs后第1天,各組細(xì)胞的增殖能力無(wú)差異;陰性對(duì)照組1到5天細(xì)胞的增殖能力呈輕微的持續(xù)上升,但均低于空白對(duì)照組,第7天時(shí)急劇下降;轉(zhuǎn)染后第3天起,過(guò)表達(dá)NDRG1組HGFs的增殖能力較陰性對(duì)照組的明顯增強(qiáng),并呈明顯的持續(xù)增殖趨勢(shì),且自第5天起與空白對(duì)照組的相同。(4)過(guò)表達(dá)NDRG1組COL-Ⅰ和Smad3 mRNA和蛋白的表達(dá)均低于陰性對(duì)照組(P0.05),陰性對(duì)照組COL-Ⅰ和Smad3 mRNA和蛋白的表達(dá)均高于未轉(zhuǎn)染細(xì)胞組(P0.05)。結(jié)論:25g/cm~2靜壓力作用于HGFs后上調(diào)NDRG1mRNA和蛋白的表達(dá),下調(diào)Smad3mRNA和蛋白的表達(dá);而過(guò)表達(dá)NDRG1可促進(jìn)HGFs增殖,抑制Smad3和COL-ⅠmRNA和蛋白的表達(dá)。提示在靜壓力作用于HGFs的過(guò)程中,NDRG1可阻斷Smad3信號(hào)通路,抑制COL-Ⅰ的表達(dá),促進(jìn)HGFs增殖,對(duì)靜壓力作用下牙齦組織的改建有重要作用。
【圖文】：

5）置于 37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 1 小時(shí)，待細(xì)胞貼 PLGA架生長(zhǎng)后再在每孔中滴加培養(yǎng)基 1ml，，繼續(xù)培養(yǎng)。6）2 天后觀察可見(jiàn) 24 孔板底壁已長(zhǎng)滿細(xì)胞，此時(shí)將 PLGA 支架至新的 24 孔板繼續(xù)培養(yǎng)，避免非支架上的細(xì)胞干擾。7）繼續(xù)培養(yǎng) 4 天后，在 PLGA 支架邊緣可見(jiàn)大量細(xì)胞游出，此時(shí)了便于重力加載，將 PLGA 支架移至新的 6 孔板，每孔 1 片,加.5ml10%FBS。分為對(duì)照組（0h）和加力 12h，24h，48h 的實(shí)驗(yàn)組，照組不施加壓力,實(shí)驗(yàn)組施加 25g/cm2靜壓力（如圖 1-1 所示）。組設(shè)置三個(gè)副孔。

NDRG1 對(duì)靜壓力作用下人牙齦成纖維細(xì)胞 COL-Ⅰ和 Smad3 表達(dá)的影響 2015 級(jí)碩士學(xué)位論文表 1-1 靜壓力對(duì) HGFs 表達(dá) NDRG1mRNA 的影響（Mean±SD）Table1-1 The mRNA expression of NDRG1 in HGFs under compressive force加力時(shí)間（h） 樣本數(shù)（n） NDRG1mRNA 相對(duì)表達(dá)量0 6 1.04±0.8912 6 4.38±1.0*24 6 6.45±1.12*#48 6 4.58±1.44*注釋：“*”表示不同加力時(shí)間組與未加力組（0h 組）比較 P＜0.05；“#”表示不同加力時(shí)間組間比較 P＜0.05。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R783.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張小薄;高峰;譚曉冬;周磊;王懷濤;石剛;;下調(diào)NDRG1表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖與凋亡的影響[J];中國(guó)普通外科雜志;2015年03期

2 鄭怡;yだ

本文編號(hào)：2623527