【摘要】： 研究背景 口腔種植的臨床應(yīng)用是20世紀(jì)牙科史上最令人囑目的一大進(jìn)展,而在臨床實(shí)踐中,大量的牙種植病員由于各種原因而都需行骨增量手術(shù),但骨增量的成功與否很大程度上依賴于骨代用品材料的引導(dǎo)骨再生的效能。通過不斷的臨床治療,人們充分認(rèn)識(shí)到引導(dǎo)骨再生術(shù)及骨代品的重要價(jià)值,并努力通過科學(xué)研究提高骨代用品的骨引導(dǎo)及骨誘導(dǎo)能力促進(jìn)骨生成作用。從骨代用品的結(jié)構(gòu)和物理特性出發(fā),鈣磷成份越合理,生物相容性越好,三維立體結(jié)構(gòu)越接近人類松質(zhì)骨,骨代用品的骨引導(dǎo)作用就能最大程度的發(fā)揮,而且結(jié)構(gòu)和成份也影響著骨代用品可吸收可重建的能力。常用的骨代用品只能提供引導(dǎo)新骨生長的物理支架,那么要誘導(dǎo)相關(guān)細(xì)胞成份進(jìn)而促進(jìn)骨代謝仍需要加入刺激因子,通過影響成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的分化、增生、成熟和活化,作用于骨質(zhì)重建過程�；仡櫘�(dāng)前所常用的骨替代品,它們雖然都具有良好的生物相容性,但是也存在很多缺陷,如自體骨容易吸收不能維持足夠的骨量,脫鈣小牛無機(jī)骨基本不能吸收,影響植骨區(qū)域骨重建等一些特性都很大程度上影響了它們引導(dǎo)骨再生的效果。另外在已研究發(fā)現(xiàn)的一些骨代謝刺激因子方面也同樣存在著制備難度大、成本高以及副作用難以預(yù)料等實(shí)踐應(yīng)用難點(diǎn),未來仍需要作進(jìn)一步研究,待改進(jìn)后方能被真正應(yīng)用于臨床。人們正通過多方面的研究試圖尋找具有更高成骨效能的代用材料,以及更具實(shí)用價(jià)值骨刺激因子,而近來,新型珊瑚骨羥基磷灰石人工骨的研制開發(fā),以及氟離子對(duì)種植體骨界面成骨效應(yīng)影響的發(fā)現(xiàn),都將使制造更高性能的復(fù)合骨替代材料并將其應(yīng)用于臨床成為可能。本論文將通過動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)對(duì)新型珊瑚骨羥基磷灰石人工骨在引導(dǎo)骨再生能力上的表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)估,以及觀察在此其基礎(chǔ)上加入一定濃度的氟離子對(duì)骨代用品引導(dǎo)骨再生效能所帶來的變化。 目的 探索Y500R珊瑚骨羥基磷灰石(CHA)人工骨在兔顱面成骨效應(yīng)以及氟離子對(duì)Y500R珊瑚骨羥基磷灰石(CHA)人工骨成骨效應(yīng)的影響。 方法 1.利用直徑11.5mm醫(yī)學(xué)純鈦棒,機(jī)械加工成一定規(guī)格的鈦金屬隔離杯,充分拋光后進(jìn)行多次超聲及化學(xué)試劑表面清洗,分裝、高溫高壓消毒、干燥備用。 2.制備Y500R CHA人工骨,規(guī)格顆粒大小Φ0.25-1.0mm,配置一定濃度的氟化鈉溶液,將CHA人工骨浸泡于氟化鈉溶液中,使氟離子吸附于骨粉表面,在烘箱(80℃)烘干至完全干燥狀態(tài),分別包裝,消毒滅菌(鈷60)備用。 3.新西蘭大白兔48只,隨機(jī)分成A、B、C三組動(dòng)物,A組24只大白兔,通過手術(shù)方法于顱面制備環(huán)形骨陷窩及新鮮骨創(chuàng)面后,各固定一個(gè)裝有自體骨的鈦隔離帽及一個(gè)充滿骨髓血的鈦隔離帽,B組12只大白兔,顱面各固定兩個(gè)裝有Y500R CHA人工骨的鈦隔離帽,C組12只大白兔,顱面各固定兩個(gè)裝有含氟CHA人工骨的鈦隔離帽,松解皮膚嚴(yán)密縫合關(guān)閉創(chuàng)口,術(shù)后3天均肌注青霉素20萬單位以預(yù)防感染,單獨(dú)喂養(yǎng)。于術(shù)后10日、11日皮下注射四環(huán)素,而處死前3日、4日皮下注射鈣黃綠素。分別于2、4、6周后A組各處殺8只動(dòng)物,而B、C組各處殺4只動(dòng)物,將鈦帽連同顱骨完整取下并修整后以10%福爾馬林4℃浸泡固定,進(jìn)行大體標(biāo)本的觀察,以酒精梯度脫水,三氯甲烷浸泡透明,塑料包埋制作帶金屬硬組織切片,熒光顯微鏡下以及經(jīng)過甲苯胺藍(lán)-酸性品紅染色后在光學(xué)顯微鏡下作組織學(xué)觀察,通過應(yīng)用圖像測量軟件對(duì)硬組織切片進(jìn)行分析并獲取相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料,把不同組間的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比分析后,得出相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)論。 結(jié)果 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后生長恢復(fù)良好,傷口無炎癥無裂開,鈦隔離帽穩(wěn)固無松脫,動(dòng)物飲食活動(dòng)無障礙。 2.大體標(biāo)本觀察切開大白兔頭部皮膚可見纖維軟組織將鈦隔離帽緊密包裹,未見空腔形成,鈦隔離帽與骨面嵌合良好,穩(wěn)固無松動(dòng)脫落,有效的屏蔽了結(jié)締組織長入,且形成新骨生長的理想空間。去除鈦隔離帽周圍包裹生長的軟組織,緩慢旋轉(zhuǎn)鈦帽并向上脫除,去掉鈦杯可見骨替代物規(guī)整一致呈圓柱形,未見有纖維組織長入,新生骨質(zhì)自骨面向上生長,由于附著了鈣黃綠素呈橙紅色可清晰判別并作比對(duì)分析。含氟CHA組新生骨量比CHA組要多,成骨效應(yīng)更顯著。 3.熒光顯微鏡下觀察新生骨質(zhì)因附著了熒光染色劑而發(fā)出綠色及黃色熒光,各組樣品間新生骨質(zhì)形成的熒光高度和面積對(duì)照清晰,可比性良好。測量鈦杯內(nèi)新生骨所發(fā)出的熒光面積顯示:2周及4周新生骨量含氟CHA組＞CHA組＞自體骨組＞空白組,而6周標(biāo)本新生骨量含氟CHA組＞CHA組≈自體骨組＞空白組。 4.光學(xué)顯微鏡下觀察甲苯胺藍(lán)-酸性品紅染色后,可見新生骨從骨面向鈦隔離帽中長入,成熟的骨質(zhì)被染成深紅色,而類骨質(zhì)被染成藍(lán)色。2周時(shí)新生骨量較少,空白組幾乎無新骨生成,而其他三組都可見骨質(zhì)從骨創(chuàng)面向上生長,含氟CHA組新生骨量最多,其次是CHA組,自體骨組較填入骨代用品組新生骨量明顯要少些;4周后各組都可見較多的呈小梁狀骨質(zhì)生成,含氟CHA組成骨效應(yīng)仍然比其他組要明顯,而空白組也可見一定量新生骨長入;6周后新生骨質(zhì)已成熟,呈致密板塊狀,類骨質(zhì)已充分占據(jù)鈦隔離帽的所有空間,含氟CHA組成骨效應(yīng)最顯著。 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果:2周后,自體骨組、空白組、含氟CHA組、CHA組的新生骨熒光面積分別是:(2.86±0.43)mm~2、(1.09±0.2)mm~2、(7.38±0.57)mm~2、(4.46±0.38)mm~2,方差分析結(jié)果:含氟CHA組＞CHA組＞自體骨組＞空白組(P＜0.01);4周后,自體骨組、空白組、含氟CHA組、CHA組的新生骨熒光面積分別是:(6.67±0.74)mm~2、(3.68±0.72)mm~2、(11.78±0.78)mm~2、(9.22±0.52)mm~2,方差分析結(jié)果:含氟CHA組＞CHA組＞自體骨組＞空白組(P＜0.01);6周后,自體骨組、空白組、含氟CHA組、CHA組的新生骨熒光面積分別是:(10.24±0.54)mm~2、(5.5±0.43)mm~2、(13.91±0.60)mm~2、(10.47±0.40)mm~2,方差分析結(jié)果:含氟CHA組＞CHA組≈自體骨組(組間P＞0.05)＞空白組(P＜0.01)。 結(jié)論 1.利用鈦隔離帽所制作的引導(dǎo)骨再生動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ筒僮鞣椒ê啽?創(chuàng)傷很小,所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性好,且數(shù)據(jù)更具有客觀性,可比性強(qiáng)。 2.空白組中充填骨髓血具有成骨細(xì)胞等大量細(xì)胞成份,但在缺少新骨生長支架情況下,成骨效應(yīng)也遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于其他各組。 3.與自體骨相比較,在骨生長早期(2周和4周)珊瑚骨羥基磷灰石具有更好的引導(dǎo)骨再生能力,到6周時(shí)其差異明顯變小。 4.低濃度狀態(tài)的氟離子能促進(jìn)骨代用品引導(dǎo)骨再生的作用,加速新骨的生成。
【圖文】：

純欽隔離帽Fig1Pietureofthetitaniumc)·linder

物 YS()0RCHA復(fù)合人工骨在兔顱面成骨效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究圖2一2組織塊塑料.包理及修整多余的包理材料F一92一 2Embedthet一 ssueus一 ngPlastiethellfititforthe51一ce‘(4)制作磨片將修整好的標(biāo)本正確放置在標(biāo)本座上，設(shè)定好參數(shù)及調(diào)整冷卻系統(tǒng)等，按程序進(jìn)行切片，切出100林m帶金屬骨片，，冉經(jīng)400目、600目、800目、1000日及1200111的砂紙逐級(jí)手工磨制成30林m厚的骨磨片，磨片過程使用石蠟油潤沼·降溫。圖2一3逐層磨薄，將冷磨片磨至3()pmFxgZ一 3Theseetions叭 eregroundto3()林一n.
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R318.1;R783

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2610050