【摘要】： 牙根吸收是正畸治療的常見并發(fā)癥之一。有學(xué)者指出在完成正畸治療后,幾乎所有的患者都會出現(xiàn)一定程度的牙根吸收。目前對于牙根吸收問題的處理一般是從預(yù)防入手,即矯治過程中要控制矯治力的使用,避免使用過大矯治力、避免超限矯治,但這并不能完全杜絕牙根吸收的發(fā)生。而一旦發(fā)生牙根吸收,目前臨床上一般的處理措施就是停止正畸加力作用,觀察其變化。這種被動的觀察性處理措施有時會讓正畸醫(yī)生喪失對牙根吸收的控制,且即便停止加力,牙根的吸收仍有一定的持續(xù)性。如對一些正畸治療后復(fù)發(fā)的病人進行二次矯治,牙根吸收又會出現(xiàn)新的進展。因此從牙根吸收的機制入手,尋找牙根吸收的預(yù)防、阻斷途徑是有必要的。很多關(guān)于正畸治療與牙根吸收關(guān)系的研究表明,在治療過程中基質(zhì)金屬蛋白酶( Matrix metalloproteinase MMPs)對于牙周組織的改建起著至關(guān)重要的作用,其中屬于膠原酶類的MMP-1可由人牙周膜成纖維細胞(Human periodontal ligament fibroblasts HPDLFs)表達分泌,其作用底物為細胞外基質(zhì)中的I, II, III,VII, X型膠原纖維,而牙周膜及牙骨質(zhì)的主要纖維構(gòu)成恰是I和III型膠原纖維。由此不難推斷MMP-1的表達分泌直接影響到牙周組織的改建,與牙根吸收的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。而HPDLF細胞則是牙周組織中數(shù)量最多,功能最重要的細胞。研究表明包括TGF-β1在內(nèi)的多種生物因子均能夠調(diào)節(jié)HPDLF細胞的活性,進而影響牙周組織改建。TGF-β1是一種具有多項調(diào)節(jié)功能的生物因子,有文獻提示其在牙根吸收的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用。那么TGF-β1究竟是通過什么樣的生物學(xué)途徑,影響到牙周組織的改建?是否會通過調(diào)控HPDLF細胞分泌MMP-1進而調(diào)節(jié)牙根吸收的進程?本研究旨在通過研究TGF-β1對人牙周膜成纖維細胞分泌MMP-1的調(diào)控作用,進而探討TGF-β1在牙根吸收發(fā)生、發(fā)展過程中的具體生物功能,是抑制、阻礙還是會促進其發(fā)展?以備為通過生物學(xué)途徑建立正畸過程中牙根吸收的防治策略提供理論依據(jù)和實踐基礎(chǔ)。本研究主要從以下兩個方面進行: 實驗一HPDLF細胞體外分泌MMP-1的相關(guān)研究 目的:通過在體外原代培養(yǎng)HPDLF細胞,獲得性狀穩(wěn)定、狀態(tài)良好的人HPDLF細胞;后通過雙抗體夾心ELISA方法研究在無干預(yù)狀態(tài)下,體外培養(yǎng)HPDLF細胞分泌MMP-1的情況,為下一步研究TGF-β1的生物功能打下基礎(chǔ)。 方法: 1.體外分離培養(yǎng)HPDLF細胞 2.應(yīng)用雙抗體夾心ELISA方法檢測HPDLF細胞在沒有特定生物因子干預(yù)狀態(tài)下分泌MMP-1的情況。 結(jié)果: 1.原代培養(yǎng)HPDLF細胞從組織塊中爬出時間為10～14天,細胞為長梭形或多突起星形,由細胞形態(tài)和組織來源可鑒定該細胞確為人牙周膜成纖維細胞。傳代后細胞生長旺盛,狀態(tài)良好,性狀穩(wěn)定。 2.經(jīng)雙抗體夾心ELISA方法檢測,在無特定生物因子干預(yù)狀態(tài)下HPDLF細胞上清中MMP-1含量的均值為6.542ng/ml。 結(jié)論:分離培養(yǎng)所獲得的HPDLF細胞在體外環(huán)境下能夠分泌MMP-1出胞,表明本階段實驗所收獲HPDLF細胞可作為MMP-1來源細胞,為第二階段研究TGF-β1對HPDLF細胞分泌MMP-1的調(diào)控作用打下基礎(chǔ)。 實驗二TGF-β1對HPDLF細胞分泌MMP-1調(diào)控作用的相關(guān)研究 目的:通過研究TGF-β1在體外對HPDLF細胞分泌MMP-1的影響,闡明TGF-β1對HPDLF細胞分泌MMP-1的調(diào)控作用,進而探討TGF-β1在牙根吸收過程中的生物功能,以期為通過生物學(xué)途徑建立正畸過程中牙根吸收的防治策略提供理論依據(jù)和實踐基礎(chǔ)。 方法:分別設(shè)立TGF-β1對HPDLF細胞作用的濃度梯度和時間梯度,采用雙抗體夾心ELISA方法檢測各實驗樣本HPDLF細胞上清中MMP-1的分泌量,以明確HPDLF細胞分泌MMP-1與TGF-β1的作用是否同時存在劑量依賴性和時間依賴性。 結(jié)果:經(jīng)多元線性回歸分析,以P=0.05為檢驗水準;與對照組相比,按TGF-β1工作濃度所分各實驗組細胞上清中MMP-1含量與TGF-β1的作用時間總體上存在時間依賴性,具有統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05。在實驗設(shè)計的48h內(nèi),TGF-β1作用時間越長,所檢測到各實驗樣本HPDLF細胞上清中MMP-1的濃度越高。但在不同作用時間下MMP-1分泌量與TGF-β1的工作濃度并沒有表現(xiàn)出一致的劑量依賴關(guān)系:4h時各實驗組MMP-1分泌量隨TGF-β1濃度的遞增而下降; 8h、12h、24h時,各實驗組MMP-1分泌量與TGF-β1的工作濃度基本呈正相關(guān);48h時各組MMP-1分泌量變化較大沒有明顯趨勢。 結(jié)論:MMP-1分泌量與TGF-β1作用時間存在顯著的時間依賴性。而在各TGF-β1作用時間梯度下,MMP-1的分泌量與TGF-β1的工作濃度并沒有一致的劑量依賴關(guān)系�；诒狙芯拷Y(jié)果,我們推測通過抑制或降低牙根吸收發(fā)生區(qū)域TGF-β1的生物活性、減少其作用時間,從而抑制或下調(diào)HPDLF細胞表達、分泌MMP-1,降低局部MMP-1濃度,減緩其對細胞外基質(zhì)中膠原纖維的降解,可達到干預(yù)、阻礙牙根吸收發(fā)生、發(fā)展的目的。該生物途徑可作為正畸過程中牙根吸收的有效防治策略之一。
【圖文】：

第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文。這種根吸收在正畸治療中普遍存在，有報道指出幾乎所有的正畸療完成時所拍攝的全口曲面體層攝影都提示有不同程度的牙根吸圓盾的現(xiàn)象[1], 所幸停止正畸治療后這種根吸收會在一定程度上自且不會損害牙齒、牙周組織的正常生理功能。Brezniak[3]等也認為所導(dǎo)致的牙根吸收具有炎癥反應(yīng)的所有特征,應(yīng)將其命名為正畸導(dǎo)牙根吸收(orthodontically induced inflammatory root resorption ,OIIR其分為三度: ①牙骨質(zhì)表層吸收; ②牙本質(zhì)表層吸收; ③環(huán)狀面

[5]。圖2 牙根內(nèi)吸收發(fā)生于牙根的不同部位。1-1-2-2 牙根外吸收 牙根外吸收(external root resorption) 根據(jù)不同的臨床表現(xiàn)又可分為炎癥性外吸收、牙頸部外吸收和替代性外吸收。炎癥性外吸收主要源于牙髓炎癥、根尖周炎癥以及正畸治療，患牙一般都會出現(xiàn)根尖吸收。牙損傷可導(dǎo)致根尖孔區(qū)血管受壓、扭轉(zhuǎn), 進而產(chǎn)生牙髓缺血性壞死和局部牙周組織透明樣變，，并引起牙根吸收。由外傷引起的牙脫位,則會造成部分牙槽骨、類牙骨質(zhì),甚至部分根面牙骨質(zhì)喪失,感染根管內(nèi)的細菌代謝產(chǎn)物促使牙根吸收發(fā)生，經(jīng)過對患牙進行徹底的根管治療并在根管內(nèi)封藥(如Ca (OH)2)后可終止病變。牙頸部外吸收是指牙頸部的牙周附著組織受到損傷后發(fā)生的牙頸部根吸收,創(chuàng)傷、唇腭裂、正頜手術(shù)、死髓牙內(nèi)漂白、牙周刮治、翻瓣術(shù)、正畸治療、等都可引起牙頸部外吸收。吸收可一直擴散沿著前期牙本質(zhì)形成包繞而不侵及牙髓[6]。牙頸部吸收可累及鄰近的牙槽骨,X線片檢查容易誤診為牙周
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R783.5

【參考文獻】

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1 張曉東,林珠,李永明,陳曦;Ⅲ型膠原和基質(zhì)金屬蛋白酶-1在大鼠移動牙齒牙周組織中的表達[J];口腔醫(yī)學(xué);2005年05期

本文編號：2607077