【摘要】： [目的]研究噴砂表面、微弧氧化表面、仿生法表面、堿熱表面對成骨細胞形態(tài)、增殖及細胞骨架的影響。 [材料和方法]將直徑為15mm,厚度1mm的純鈦鈦片根據(jù)表面處理方法不同分為12組：機械打磨組(grooved, G)、噴砂組(sandblasted, SB)、堿熱1-4組(alkali heat, AH)、仿生法1-4組(SBF)、打磨微弧氧化組(grooved microarc oxidation, GMAO)和噴砂微弧氧化組(sandblasted microarc oxidation, SBMAO)。采用掃描電鏡、X射線衍射儀、能譜分析檢測鈦片表面理化性質(zhì)。采用掃描電鏡(SEM)、激光共聚焦顯微鏡(Laser scanning confocal microscope, LSCM)觀察研究鈦片表面成骨細胞生長情況及細胞骨架的改變,并采用MTT法、大鼠骨鈣素(BGP)ELISA檢測法對各組鈦片表面對成骨細胞增殖、功能變化進行研究。[結(jié)果]1.鈦片在機械打磨和噴砂的基礎(chǔ)上經(jīng)堿熱法,仿生法及微弧氧化法處理后,堿熱組出現(xiàn)了納米級均勻立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),仿生法組表面沉積了羥基磷灰石顆粒,微弧氧化組呈現(xiàn)出火山口狀層疊的孔洞。2.本研究采用改進后的貼壁組織塊分步消化法分離培養(yǎng)的成骨細胞符合成骨細胞的特征,具有成骨細胞的多種生物學(xué)特征,并且具有較高的純度。3.各種鈦表面成骨細胞增值測定,噴砂微弧氧化組各時間點OD值均高于其他組。骨鈣素檢測,14d時微弧氧化兩組均高于其余各組,噴砂微弧氧化組高于打磨微弧氧化組。4.成骨細胞接種12小時后,各組肌動蛋白纖維清晰可見,纖維束平行排列與細胞長軸一致；打磨組肌動蛋白纖維沿劃痕方向排列；噴砂組肌動蛋白纖維沿孔洞邊緣排列,細胞覆蓋在孔洞上方；仿生法1-4組肌動蛋白纖維依據(jù)附著點排列,包繞表面羥基磷灰石顆粒；堿熱1-4組細胞肌動蛋白纖維沿表面排列,細胞邊緣處有微絲伸入孔洞中；MAO組細胞肌動蛋白纖維平行排列,圈形排列的肌動蛋白纖維減少,肌動蛋白纖維在細胞邊緣出匯聚成束,伸向孔洞內(nèi)。 [結(jié)論]1.改進后的貼壁組織塊分步消化法可用有限的SD大鼠獲得更多的、來源穩(wěn)定的具有典型成骨細胞生物學(xué)特性的成骨細胞。2.不同目數(shù)噴砂顆粒造成的粗糙表面對堿熱法、仿生法、微弧氧化法制備表面有一定的影響。3.微弧氧化表面形貌對成骨細胞增殖、功能的促進作用強于其余各組。4.激光共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),成骨細胞肌動蛋白纖維的鋪展與鈦片表面形貌有關(guān)。
【圖文】：

打磨組

噴砂組
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R783.1

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本文編號：2603034