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caveolin-1 siRNA對成釉細(xì)胞中CD147糖基化及MMP-2表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-06-26 18:23
【摘要】:目的:研究caveolin-1的表達(dá)對小鼠成釉細(xì)胞CD147糖基化及MMP-2表達(dá)的影響.方法:首先利用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測體外培養(yǎng)的小鼠成釉細(xì)胞中caveolin-1、CD147和MMP-2蛋白的表達(dá);然后利用siRNA技術(shù)封閉小鼠成釉細(xì)胞中caveolin-1的表達(dá),實(shí)時(shí)定量熒光PCR和免疫印跡試驗(yàn)分別檢測caveolin-1、CD147和MMP-2在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平的表達(dá)情況,并統(tǒng)計(jì)學(xué)分析.結(jié)果:caveolin-1、CD147和MMP-2蛋白表達(dá)于體外培養(yǎng)的小鼠成釉細(xì)胞中;caveolin-1siRNA轉(zhuǎn)染成釉細(xì)胞后caveolin-1mRNA和MMP-2mRNA的表達(dá)量明顯降低,但CD147mRNA的表達(dá)量沒有明顯變化;caveolin-1、高糖型CD147和MMP-2的蛋白表達(dá)量均降低.結(jié)論:caveolin-1、CD147和MMP-2表達(dá)于小鼠成釉細(xì)胞中,提示3者參與成釉細(xì)胞生物學(xué)過程;在體外培養(yǎng)的成釉細(xì)胞中,封閉caveolin-1基因的表達(dá)可降低HG-CD147和MMP-2的表達(dá).
[Abstract]:Aim: to study the effect of caveolin-1 expression on CD147 glycosylation and MMP-2 expression in mouse ameloblasts. Methods: the expression of caveolin-1,CD147 and MMP-2 protein in mouse ameloblast cultured in vitro was detected by cellular immunofluorescence technique, then the expression of caveolin-1 in mouse ameloblast was blocked by siRNA technique, and the expression of caveolin-1,CD147 and MMP-2 at transcriptional level and protein level were detected by real-time quantitative fluorescence PCR and immunoblotting, respectively. Results: caveolin-1,CD147 and MMP-2 proteins were expressed in mouse ameloblasts cultured in vitro, the expression of caveolin-1mRNA and MMP-2mRNA decreased significantly, but the expression of CD147mRNA did not change significantly, while the protein expression of caveolin-1, high glucose CD147 and MMP-2 decreased. Conclusion: caveolin-1,CD147 and MMP-2 are expressed in mouse ameloblasts, suggesting that the three of them are involved in the biological process of ameloblasts, and blocking the expression of caveolin-1 gene can decrease the expression of HG-CD147 and MMP-2 in ameloblasts cultured in vitro.
【作者單位】: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院∥鄭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;山東大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;濱州醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(U1204813) 河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(12A320045)
【分類號】:R78

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本文編號:2506383

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