【摘要】：目的 探測端粒酶卡侯體蛋白1(TCAB1)基因沉默對裸鼠移植瘤生長及腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法 采用定量熒光原位雜交(Q-FISH)方法測定RNA干擾慢病毒sh TCAB1和sh陰性對照(NC)處理后經(jīng)穩(wěn)定篩選26代人口腔鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)的Cal27細(xì)胞系染色體末端端粒的信號強(qiáng)度。然后將RNA干擾的Cal27細(xì)胞接種于裸鼠頸部皮下左、右兩側(cè),定期監(jiān)測腫瘤體積,繪制腫瘤生長曲線,稱取瘤體重量。采用免疫組織化學(xué)檢測移植瘤組織中TCAB1、B細(xì)胞淋巴瘤蛋白-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-3、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)。結(jié)果 Q-FISH結(jié)果顯示,sh TCAB1處理后的Cal27細(xì)胞較sh NC處理后及野生型Cal27細(xì)胞的端粒平均長度明顯縮短。sh TCAB1處理組OSCC移植瘤生長速度明顯較sh NC對照組減慢。移植瘤平均重量為0.06 g,對照組為0.26 g,抑瘤率達(dá)76.9%。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,sh TCAB1組移植瘤中TCAB1表達(dá)明顯降低,同時,Bcl-2、VEGF和細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)降低,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表達(dá)升高。結(jié)論 sh TCAB1慢病毒能夠明顯抑制裸鼠人OSCC移植瘤的生長,其抗腫瘤機(jī)制與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、延長腫瘤細(xì)胞分裂周期及抑制血管生成有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of telomerase card body protein 1 (TCAB1) gene silencing on the growth and biological behavior of tumor cells in nude mice. Methods the chromosome ends of Cal27 cell line of 26 generations of human luminal squamous cell carcinoma (OSCC) were stably screened by quantitative fluorescence in situ hybridization (Q-FISH) after treatment with RNA interference lentivirus sh TCAB1 and sh negative control (NC). The signal strength of telomere. Then the Cal27 cells interfered with RNA were inoculated on the left and right sides of the neck of nude mice. The tumor volume was monitored regularly and the tumor growth curve was drawn to weigh the weight of the tumor. The expressions of TCAB1,B cell lymphoma protein-2 (Bcl-2), cystine aspartate specific protease-3, vascular endothelial growth factor (VEGF) and cell cycle D1 were detected by immunohistochemistry. Results the results of Q-FISH showed that the average telomere length of Cal27 cells treated with sh TCAB1 was significantly shorter than that treated with sh NC and wild type Cal27 cells, and the growth rate of OSCC transplantation tumors in sh TCAB1 treatment group was significantly slower than that in sh NC control group. The average weight of the transplanted tumor was 0.06g, and that of the control group was 0.26g. The tumor inhibition rate was 76.9%. The results of immunohistochemistry showed that the expression of TCAB1 was significantly decreased, the expression of Bcl-2,VEGF and cell cycle D1 was decreased, and the expression of cystine aspartate protease-3 was increased in sh TCAB1 group. Conclusion sh TCAB1 lentivirus can significantly inhibit the growth of human OSCC transplantation tumor in nude mice, and its anti-tumor mechanism is related to inducing apoptosis of tumor cells, prolonging the division cycle of tumor cells and inhibiting angiogenesis.
【作者單位】： 口腔疾病研究國家重點實驗室華西口腔醫(yī)院(四川大學(xué));
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(81172579) 四川省科技廳科技支撐計劃項目(2013SZ0039)~~
【分類號】：R739.8

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本文編號：2486132