【摘要】:研究背景牙列的缺損與缺失是威脅人類(lèi)健康的常見(jiàn)疾病,口腔種植牙技術(shù)是牙列缺損缺失修復(fù)治療的有效手段,目前已廣泛應(yīng)用于臨床。其中鈦及鈦合金種植體憑借其良好的生物相容性、耐腐蝕性、較高的機(jī)械強(qiáng)度等優(yōu)點(diǎn)廣泛應(yīng)用于臨床。雖然鈦材料具有良好的生物相容性,但是其暴露于空氣中5 min即可在表面形成一層二氧化鈦薄膜,表現(xiàn)為生物惰性,影響了種植體與周?chē)墙M織之間的結(jié)合。另外,種植體與周?chē)墙M織的結(jié)合方式為機(jī)械結(jié)合,而非強(qiáng)有力的化學(xué)結(jié)合,主要依靠成骨相關(guān)細(xì)胞分化產(chǎn)生的骨組織嵌入種植體表面形成機(jī)械結(jié)合,因此其結(jié)合強(qiáng)度與種植體表面形貌有關(guān)。為了改善種植體表面形貌,提高其與周?chē)墙M織的結(jié)合能力,縮短種植體愈合周期,進(jìn)而提高其臨床治療的成功率,研究人員采用多種方法對(duì)種植體表面進(jìn)行改性。常用的改性方法包括物理改性、化學(xué)改性以及電化學(xué)改性。目前趨向于復(fù)合兩種以上的方法,即依次采用不同的手段,在種植體表面形成復(fù)合的形態(tài)特征,從而達(dá)到優(yōu)化種植體表面結(jié)構(gòu)并增加其表面活性的目的。隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展,納米改性處理可使種植體表面更好地模擬細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等納米尺寸結(jié)構(gòu),因此更接近于生物體內(nèi)的微環(huán)境。目前,通過(guò)陽(yáng)極氧化法可以在鈦片表面形成整齊均一的納米管狀結(jié)構(gòu),其具有納米結(jié)構(gòu)的尺寸效應(yīng)及量子效應(yīng),具有更大的比表面積,更有利于蛋白分子的粘附和沉積。同時(shí)這種納米管狀結(jié)構(gòu)具有加載藥物及生物活性因子的潛能,因此在種植體改性方面受到廣泛關(guān)注。淫羊藿苷(C33H40O15,分子量為676.67)是一種非常重要的用于治療骨質(zhì)疏松的中藥成分。許多研究證實(shí)其可以促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖及成骨相關(guān)基因的表達(dá),同時(shí)能夠抑制破骨細(xì)胞的活性,因此有利于骨質(zhì)疏松患者骨組織的愈合。另外淫羊藿苷還具有提取工藝簡(jiǎn)單、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、易于儲(chǔ)存等優(yōu)點(diǎn),因此逐漸應(yīng)用于骨組織工程方面,但是其在種植體涂層方面的研究非常少見(jiàn)。層層自組裝技術(shù)是上世紀(jì)90年代快速發(fā)展起來(lái)的一種簡(jiǎn)易、多功能的表面修飾方法,利用帶相反電荷的聚陰離子材料與聚陽(yáng)離子材料的交替沉積來(lái)制備聚電解質(zhì)自組裝多層膜。目前已有大量研究利用該技術(shù)制備殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉、殼聚糖/DNA、殼聚糖/明膠等多種自組裝膜,應(yīng)用于骨組織工程領(lǐng)域及種植體表面改性方面。殼聚糖是一種可降解的、無(wú)毒的天然糖類(lèi),具有良好的生物相容性及止血抗菌效果。有研究將殼聚糖、明膠混合制備出生物支架,表現(xiàn)出較好的親水性及細(xì)胞粘附分化能力。另外,殼聚糖、明膠具有骨誘導(dǎo)能力,增強(qiáng)了其在骨組織工程領(lǐng)域的應(yīng)用前景,可以作為種植體改性的良好涂層材料。因此,本研究擬利用陽(yáng)極氧化法制備不同管徑的納米管,并利用納米管結(jié)構(gòu)較強(qiáng)的吸附能力負(fù)載淫羊藿苷,探索淫羊藿苷的緩釋時(shí)間及改性后的種植體對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物活性的影響;篩選出較為理想的二氧化鈦納米管和淫羊藿苷的結(jié)合方式,進(jìn)一步在納米管表面進(jìn)行殼聚糖/明膠自組裝涂層,以期更好地模擬種植體周?chē)奈h(huán)境,探索其對(duì)成骨細(xì)胞的影響。研究目的1.采用陽(yáng)極氧化法成功制備不同管徑的二氧化鈦納米管2.探索不同管徑的二氧化鈦納米管對(duì)淫羊藿苷的負(fù)載及緩釋能力3.探索淫羊藿苷改性后的二氧化鈦納米管對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的影響4. 采用旋轉(zhuǎn)涂布法成功構(gòu)建殼聚糖/明膠多層膜結(jié)構(gòu)5.探索殼聚糖/明膠多層膜對(duì)淫羊藿苷緩釋時(shí)間的影響6. 殼聚糖/明膠復(fù)合涂層改性二氧化鈦納米管對(duì)成骨細(xì)胞的影響本論文主要包括以下兩章內(nèi)容:第一章二氧化鈦納米管負(fù)載淫羊藿苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的影響材料與方法1.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定1)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)無(wú)菌條件下分離SD大鼠的脛骨及股骨,剪掉其干骺端,使用注射器吸取完全培養(yǎng)基反復(fù)沖洗骨髓腔。將含有骨髓的完全培養(yǎng)基離心后重懸,37℃C、5%CO2孵箱內(nèi)常規(guī)培養(yǎng)。2)生長(zhǎng)曲線的測(cè)定取第2代生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞,采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)1、3、5、7、9 d后的吸光光度值,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。3)表面標(biāo)志物的檢測(cè)取第3代生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD 29、CD 44、CD 90以及造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD 45和CD 34的表達(dá)。4)多向分化能力的檢測(cè)取第2代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,以5×104/孔的密度接種于培養(yǎng)皿中,成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)21d,成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)14d,分別使用茜素紅及油紅“O”染色,倒置顯微鏡下觀察。2.TiO2納米管的制備及淫羊藿苷的負(fù)載1)TiO2納米管的制備通過(guò)陽(yáng)極氧化法在純鈦片表面分別制備30 nm和80 nm兩種不同管徑的納米管,得到表面規(guī)整的納米結(jié)構(gòu)形貌。2)淫羊藿苷的負(fù)載采用無(wú)水乙醇IDMSO作為有機(jī)溶劑溶解淫羊藿苷,并通過(guò)物理吸附的方法將鈦片浸泡于不同濃度的淫羊藿苷溶液中,超聲處理后于空氣中干燥。3)TiO2納米管的表征通過(guò)場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡觀察陽(yáng)極氧化處理前后鈦片表面形貌,通過(guò)水接觸角分析儀測(cè)定淫羊藿苷負(fù)載后各組鈦片表面的親水性。4)淫羊藿苷緩釋時(shí)間的檢測(cè)分別將負(fù)載不同濃度淫羊藿苷的鈦片置于PBS緩沖溶液中,于預(yù)定的時(shí)間點(diǎn)取出PBS溶液,采用高效液相色譜儀測(cè)定淫羊藿苷的緩釋濃度。3.TiO2納米管負(fù)載淫羊藿苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞粘附、增殖、遷移及分化的影響1)細(xì)胞骨架觀察將細(xì)胞以1×104/孔的密度接種于鈦片上,培養(yǎng)24 h使用4%多聚甲醛進(jìn)行細(xì)胞固定,加入TRITC Phalladin避光染色40 min,再加DAPI染色約1 min,PBS緩沖液沖洗。倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞粘附伸展的形態(tài)。2)細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)將鈦片置于24孔培養(yǎng)板中,每孔加入1×105/mL細(xì)胞懸液1 mL。培養(yǎng)36 h后,采用已滅菌的20μL槍頭垂直于鈦片劃痕,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后進(jìn)行染色,倒置熒光顯微鏡下觀察。3)細(xì)胞粘附與增殖實(shí)驗(yàn)將生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞接種于各組鈦片表面進(jìn)行培養(yǎng),分別于選定的時(shí)間點(diǎn)采用CCK-8試劑檢測(cè)細(xì)胞的吸光光度值,計(jì)算細(xì)胞的粘附及增殖水平。4)成骨相關(guān)基因的表達(dá)采用qRT-PCR法檢測(cè)各組鈦片表面細(xì)胞表達(dá)成骨相關(guān)基因骨鈣素、Ⅰ型膠原、骨橋蛋白、骨涎蛋白以及Runt相關(guān)基因2的水平變化。采用堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)各組細(xì)胞堿性磷酸酶活性的差異。5)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,測(cè)定結(jié)果均以x±s表示,組間采用單因素方差分析(One Way ANOVA),檢驗(yàn)方差齊性,如果方差齊則對(duì)樣本均數(shù)進(jìn)行兩兩比較的LSD檢驗(yàn);如果方差不齊則采用Dunnett'sT3檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較,假設(shè)檢驗(yàn)為雙側(cè)檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。結(jié)果1.采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法獲得生長(zhǎng)狀態(tài)良好的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)及多向分化檢測(cè)結(jié)果顯示,所培養(yǎng)的細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞特性及多向分化潛能。2.采用陽(yáng)極氧化法以乙二醇為主要電解液制備出的納米管管壁光滑,管徑均勻。當(dāng)電壓為10v,20v,30v時(shí)制備的納米管管徑分別約為30 nm,50 nm, 80 nm。3.納米管處理后的鈦片表面接觸角較純鈦片明顯降低,并且80 nm管徑鈦片接觸角較30 nm管徑的接觸角小。而淫羊藿苷負(fù)載后,鈦片表面的接觸角變化不明顯。4.高效液相色譜儀檢測(cè)淫羊藿苷的緩釋時(shí)間及緩釋量,各組淫羊藿苷可以緩釋達(dá)3d,第1d釋放的量較多,之后釋放速率較平緩。納米管管徑越大,淫羊藿苷濃度越高,負(fù)載的量越多。5.細(xì)胞骨架:倒置熒光顯微鏡觀察可見(jiàn)純鈦組的細(xì)胞體積較小,細(xì)胞突起較少;NT1o組細(xì)胞有較多的板狀足,而NT30組細(xì)胞伸出較多絲狀偽足,淫羊藿苷加載后細(xì)胞形態(tài)改變不明顯。6.細(xì)胞遷移:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在10v電壓處理的納米管組遷移能力稍優(yōu)于純鈦組及30v電壓處理的各組,其中NT10+ICA0.05組細(xì)胞遷移能力最強(qiáng),提示淫羊藿苷負(fù)載后有利于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的遷移。7.細(xì)胞粘附與增殖:在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)純鈦組及10v處理組粘附的細(xì)胞數(shù)目較多,明顯多于30v處理組,2h和4h時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。淫羊藿苷的負(fù)載未能明顯促進(jìn)細(xì)胞早期粘附。增殖測(cè)試結(jié)果顯示細(xì)胞培養(yǎng)第1d各實(shí)驗(yàn)組與純鈦組相比均無(wú)顯著差異;第3d及第5d純鈦組及10v電壓處理組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,明顯高于30v電壓處理的各組;第7dNT30+ICA0.05組的細(xì)胞增殖能力最強(qiáng),明顯高于其他組,提示淫羊藿苷促進(jìn)了細(xì)胞增殖。8.納米管處理后上調(diào)了成骨相關(guān)基因的表達(dá),尤其是骨鈣素、骨橋蛋白和骨涎蛋白,而對(duì)Ⅰ型膠原及Runt相關(guān)基因2的影響較小。淫羊藿苷負(fù)載組進(jìn)一步上調(diào)了部分成骨相關(guān)基因的表達(dá)。9.除了NT10+ICA0.05組及NT30+ICA0.05組在第7d堿性磷酸酶的活性增高外,其他各組在7d和14d堿性磷酸酶的表達(dá)無(wú)顯著差異。第二章殼聚糖/明膠多層膜改性二氧化鈦納米管對(duì)成骨細(xì)胞的影響材料與方法1.大鼠原代成骨細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定本實(shí)驗(yàn)通過(guò)胰蛋白酶、膠原酶消化法獲得SD乳鼠的顱骨成骨細(xì)胞,采用差速貼壁法純化成骨細(xì)胞,觀察其形態(tài)學(xué)特性。通過(guò)堿性磷酸酶染色、Ⅰ型膠原免疫組化染色以及礦化結(jié)節(jié)茜素紅染色對(duì)成骨細(xì)胞特性進(jìn)行鑒定。2.殼聚糖/明膠多層膜改性TiO2納米管的制備及表征1)配制殼聚糖溶液和明膠溶液,濃度均為10 mg/mL。采用旋轉(zhuǎn)涂布法在納米管表面交互涂布?xì)ぞ厶呛兔髂z,旋轉(zhuǎn)速度為4000rpm,每層旋轉(zhuǎn)時(shí)間為40s。共涂布層數(shù)記為T(mén)/(Chi/Gel)5Chi和T/ICA/(Chi/Gel)5Chi。2)采用接觸角分析儀測(cè)量水滴在鈦片表面的靜態(tài)接觸角大;X射線光電子能譜儀分析各組鈦片表面元素的化合狀態(tài);原子力顯微鏡對(duì)各組鈦片表面進(jìn)行面掃描,分析鈦片表面形貌結(jié)構(gòu)及表面粗糙度;高效液相色譜儀測(cè)定淫羊藿苷的緩釋時(shí)間。3.殼聚糖/明膠多層膜改性TiO2納米管對(duì)成骨細(xì)胞粘附、增殖及分化的影響1)細(xì)胞骨架取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的成骨細(xì)胞以2×104/mL的密度接種于鈦片上,培養(yǎng)1d后取出鈦片,進(jìn)行免疫熒光染色,倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。2)細(xì)胞增殖取第3代生長(zhǎng)狀態(tài)良好的成骨細(xì)胞,以2×104/mL的密度接種于各組鈦片表面,分別培養(yǎng)1、3、5、7 d,采用CCK-8試劑檢測(cè)成骨細(xì)胞相對(duì)增殖水平。3)成骨相關(guān)基因表達(dá)qRT-PCR法檢測(cè)各組鈦片表面成骨基因Ⅰ型膠原、骨橋蛋白、骨保護(hù)素及破骨細(xì)胞分化因子RANKL mRNA水平的表達(dá)。4)堿性磷酸酶活性檢測(cè)分別在培養(yǎng)7d和14d后收集細(xì)胞培養(yǎng)液,根據(jù)試劑盒說(shuō)明檢測(cè)各組堿性磷酸酶分泌量。5) Western Blot檢測(cè)成骨相關(guān)蛋白表達(dá)細(xì)胞接種于各組鈦片表面,培養(yǎng)10d后提取細(xì)胞內(nèi)的蛋白,通過(guò)Western Blot檢測(cè)各組細(xì)胞骨橋蛋白及Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)水平。6)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,測(cè)定結(jié)果均以x±s來(lái)表示,組間采用單因素方差分析(One Way ANOVA),檢驗(yàn)方差齊性,如果方差齊則進(jìn)一步對(duì)樣本均數(shù)進(jìn)行兩兩比較的LSD檢驗(yàn);反之,如果方差不齊則采用Dunnett's T3檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較,假設(shè)檢驗(yàn)為雙側(cè)檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果1.原代成骨細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定通過(guò)酶消化法及差速貼壁法分離純化后,可獲得生長(zhǎng)狀態(tài)良好的成骨細(xì)胞。堿性磷酸酶及Ⅰ型膠原表達(dá)陽(yáng)性,成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后可見(jiàn)礦化結(jié)節(jié)形成,符合成骨細(xì)胞特性。2.殼聚糖/明膠多層膜改性二氧化鈦納米管的表征1)原子力顯微鏡檢測(cè)結(jié)果:純鈦片的粗糙度最;納米管改性處理后,粗糙度明顯增大;淫羊藿苷的負(fù)載未明顯影響鈦片表面形貌;殼聚糖/明膠多層膜處理后粗糙度降低。2)光電子能譜及接觸角測(cè)試結(jié)果:殼聚糖/明膠多層膜完全覆蓋鈦片表面,表明已成功構(gòu)建多層膜結(jié)構(gòu)。3.殼聚糖/明膠多層膜改性TiO2納米管對(duì)成骨細(xì)胞粘附、增殖及分化的影響1)細(xì)胞骨架在倒置熒光顯微鏡下觀察可見(jiàn),成骨細(xì)胞在純鈦表面鋪展充分,形態(tài)不規(guī)則,有較多細(xì)長(zhǎng)的偽足;納米管組表面細(xì)胞體積變小,細(xì)胞伸展不充分,細(xì)胞突起較少;淫羊藿苷的負(fù)載未明顯改變細(xì)胞形態(tài);經(jīng)殼聚糖/明膠多層膜涂層后細(xì)胞鋪展較好,細(xì)胞呈現(xiàn)大量的板足及偽足,并且T+ICA+LBL組細(xì)胞鋪展較T+LBL組更加充分,細(xì)胞板狀足更多。2)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)第1d時(shí),納米管組細(xì)胞增殖數(shù)目最低,其他組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。培養(yǎng)3、5、7 d時(shí),T+ICA+LBL組細(xì)胞增殖明顯高于其他組,其次為T(mén)+LBL組,較其他組細(xì)胞增殖數(shù)目多,并且在第7d表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在各個(gè)時(shí)間點(diǎn),T+ICA組均大于NT組,說(shuō)明淫羊藿苷提高了細(xì)胞的增殖。3)成骨相關(guān)基因的表達(dá)成骨細(xì)胞在各組鈦片表面培養(yǎng)7d和14d之后,各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組成骨相關(guān)基因的表達(dá)存在差異。在7d時(shí),T+ICA組的Ⅰ型膠原表達(dá)水平高于T+LBL組,其余各組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各組的骨橋蛋白表達(dá)水平無(wú)顯著差異。T+ICA組的骨保護(hù)素表達(dá)水平明顯高于T+LBL組,且NT組及T+LBL組表達(dá)低于純鈦組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各實(shí)驗(yàn)組RANKL的表達(dá)明顯低于純鈦組。培養(yǎng)14d后,各實(shí)驗(yàn)組Ⅰ型膠原及骨橋蛋白的表達(dá)明顯高于純鈦組,而骨保護(hù)素及RANKL的表達(dá)在各組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4)堿性磷酸酶活性檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)7d時(shí)T+ICA+LBL以及T+ICA組堿性磷酸酶的表達(dá)水平明顯高于純鈦組;培養(yǎng)14d各組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5) Ⅰ型膠原和骨橋蛋白的表達(dá)除了NT組,各實(shí)驗(yàn)組骨橋蛋白的表達(dá)均顯著高于純鈦組;T+ICA+LBL及T+ICA的Ⅰ型膠原表達(dá)明顯高于其他組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1.通過(guò)全骨髓貼壁培養(yǎng)法成功獲得骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。2.采用陽(yáng)極氧化法成功制備TiO2納米管,并通過(guò)物理吸附法負(fù)載淫羊藿昔。各組納米管的淫羊藿苷可以緩釋長(zhǎng)達(dá)3 d。3.TiO2納米管負(fù)載淫羊藿苷可以提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的粘附、遷移及礦化相關(guān)基因的表達(dá)。4.通過(guò)酶消化法成功獲得原代成骨細(xì)胞,并通過(guò)差速貼壁法純化細(xì)胞。5.通過(guò)旋轉(zhuǎn)涂布法成功構(gòu)建殼聚糖/明膠多層膜結(jié)構(gòu),多層膜結(jié)構(gòu)延長(zhǎng)了淫羊藿苷的緩釋時(shí)間,可緩釋5 d。6.殼聚糖/明膠多層膜改性后的納米管及淫羊藿苷的負(fù)載有利于成骨細(xì)胞的增殖及粘附,可以上調(diào)礦化相關(guān)蛋白的表達(dá)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R783.6
【共引文獻(xiàn)】
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2 宿廣昊;取向膠原基材料的制備及影響因素的考察[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年
3 石志鋒;人工股骨頭表面硅碳氮薄膜生長(zhǎng)特性及其摩擦學(xué)性能研究[D];華南理工大學(xué);2012年
4 王琳;純鈦硬組織植入體表面膜層的仿生構(gòu)建及其生物學(xué)行為研究[D];華南理工大學(xué);2012年
5 來(lái)敏;鈦材表面納米結(jié)構(gòu)化及其對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的影響[D];重慶大學(xué);2013年
6 盧海賓;不同保存方法對(duì)純鈦表面理化性能以及生物活性的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年
7 成夙;微弧氧化鈦表面組織結(jié)構(gòu)調(diào)控和細(xì)胞行為及骨誘導(dǎo)性能[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2012年
8 付應(yīng)霄;OPG對(duì)破骨細(xì)胞活性的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[D];揚(yáng)州大學(xué);2013年
9 侯樂(lè)干;醫(yī)用多孔鈦基金屬材料制備及性能研究[D];哈爾濱工程大學(xué);2013年
10 李俊輝;新型人工頸椎間盤(pán)不同涂層體外生物相容性的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條
1 戚娟娟;不同表面種植體軟組織袖口臨床和組織學(xué)的比較研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年
2 王玉坤;鯽魚(yú)魚(yú)鱗的分級(jí)結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)性能[D];中國(guó)地質(zhì)大學(xué)(北京);2013年
3 李文兵;用形狀記憶功能聚合物調(diào)節(jié)表面微圖案的研究[D];西南交通大學(xué);2013年
4 王麗華;HF+陽(yáng)極氧化處理的微/納米表面種植體早期骨結(jié)合的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年
5 張曉旭;醫(yī)用AZ91D鎂合金表面改性研究[D];西南大學(xué);2013年
6 廖慧君;鈦基納米棒陣列及其表面涂層的制備和生物相容性研究[D];華中師范大學(xué);2013年
7 杜小穎;種植體表面兩種微弧氧化膜生物相容性的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年
8 孫彥維;TiO_2納米管種植體涂層的構(gòu)建及其消毒方式對(duì)蛋白質(zhì)吸附能力的評(píng)價(jià)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年
9 邢娟;低強(qiáng)度流體剪切力—材料表面化學(xué)共刺激對(duì)成骨細(xì)胞增殖和分化的影響[D];重慶大學(xué);2013年
10 劉馨;微弧氧化法在純鈦基體上制備含硅鈣元素涂層及其表面成骨細(xì)胞的黏附與增殖[D];佳木斯大學(xué);2013年
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2475920