發(fā)布時間：2019-04-19 11:20

【摘要】：目的:探討經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路對牙周膜混合細胞群成骨分化過程中的調(diào)控作用。方法:體外組織塊結(jié)合酶消化法培養(yǎng)牙周膜混合細胞群,通過RT-PCR、real-time PCR證實經(jīng)典Wnt信號通路在牙周膜細胞中的表達,并運用細胞免疫熒光分析檢測了β-catenin的表達位置及表達量;通過不同濃度的Licl激活牙周膜細胞中經(jīng)典Wnt信號通路,并進行相應(yīng)的誘導(dǎo)培養(yǎng)。培養(yǎng)14d后,茜素紅染色觀察礦化結(jié)節(jié)形成情況,堿性磷酸酶活性檢測ALP活性;通過CCK-8檢測Licl刺激24h、48h、72h后經(jīng)典Wnt信號通路對牙周膜細胞增殖的影響。以單因素重復(fù)測量方差分析比較差異。結(jié)果:經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路在牙周膜混合細胞群中明顯表達,可以通過Licl激活該信號通路,使β-catenin在細胞中累積引起下游變化;與對照組相比較,經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路的激活引起牙周膜細胞礦化過程中礦化結(jié)節(jié)的減少,顯著降低了ALP活性(P0.01);經(jīng)典Wnt通路對牙周膜混合細胞群增殖表現(xiàn)為顯著的抑制作用(P0.01)。結(jié)論:經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路抑制了牙周膜混合細胞群的礦化成骨過程,并抑制該細胞群的增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of classical Wnt/ 尾-catenin signaling pathway in osteoblast differentiation of periodontal ligament mixed cell group. Methods: the mixed periodontal ligament cells were cultured by tissue block-binding enzyme digestion in vitro. The expression of classical Wnt signaling pathway in periodontal ligament cells was confirmed by RT-PCR,real-time PCR. The expression position and expression of 尾-catenin were detected by cellular immunofluorescence analysis. The classical Wnt signaling pathway in periodontal ligament cells was activated by different concentrations of Licl, and the corresponding induction culture was carried out. After culture for 14 days, alizarin red staining was used to observe the formation of mineralized nodules and alkaline phosphatase activity to detect the activity of ALP, and the effects of classical Wnt signaling pathway on the proliferation of periodontal ligament cells were detected by CCK-8 for 24 h, 48 h and 72 h after stimulation with Licl. Single factor repeated measurement of variance analysis was used to compare the differences. Results: the classical Wnt/ 尾-catenin signaling pathway was obviously expressed in periodontal ligament mixed cell group, which could be activated by Licl. The accumulation of 尾-catenin in the cells resulted in downstream changes. Compared with the control group, the activation of classical Wnt/ 尾-catenin signaling pathway resulted in a decrease in mineralized nodules and a significant decrease in ALP activity during the mineralization of periodontal ligament cells (P0.01). Classical Wnt pathway significantly inhibited the proliferation of mixed periodontal ligament cells (P0.01). Conclusion: the classical Wnt/ 尾-catenin signaling pathway inhibits the mineralized osteogenesis of the mixed periodontal ligament cell group and inhibits the proliferation of the cell group.
【作者單位】： 武漢大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)省部共建國家重點實驗室培訓(xùn)基地和口腔生物醫(yī)學(xué)教育部重點實驗室;武漢大學(xué)口腔醫(yī)院牙周科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81170933;81570946) 湖北省自然科學(xué)基金(2015CFB259) 武漢市科技局青年晨光計劃(2014072704011255)
【分類號】：R781.4

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