【摘要】：目的：通過(guò)膠原酶消化法體外分離培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞并構(gòu)建細(xì)胞牽張應(yīng)力加載模型，研究牽張應(yīng)力對(duì)人牙周膜細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的影響及其與MMP-2表達(dá)的關(guān)系. 方法：①膠原酶消化法體外分離培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞，觀察人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)特性，免疫組織化學(xué)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行抗角蛋白及抗波形蛋白抗體檢測(cè)判定其來(lái)源，并構(gòu)建細(xì)胞牽張應(yīng)力加載模型。 ②選取4-6代細(xì)胞，對(duì)細(xì)胞施加不同時(shí)間的12%周期性牽張應(yīng)力，結(jié)合信號(hào)通路抑制劑及蛋白印跡的檢測(cè)方法，研究不同應(yīng)力條件對(duì)人牙周膜細(xì)胞NF-κB、IκB、 MMP-2蛋白的表達(dá)、IKK激酶的活性及磷酸化水平的影響，及MMP-2在人牙周膜細(xì)胞中表達(dá)的可能的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。 結(jié)果：①膠原酶消化法體外成功分離培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞，免疫組織化學(xué)鑒定其來(lái)源可靠；應(yīng)用多通道細(xì)胞牽張應(yīng)力加載系統(tǒng)成功構(gòu)建人牙周膜細(xì)胞體外培養(yǎng)-力學(xué)刺激模型。 ②蛋白印跡結(jié)果顯示：人牙周膜細(xì)胞受到12%形變率的周期性牽張應(yīng)力作用時(shí)，，NF-κB信號(hào)通路被激活， p-IKK磷酸化程度升高，與對(duì)照組相比均具有顯著性差異（P0.05）。PDTC組, NF-κB蛋白、p-IKK表達(dá)明顯降低，與12h組相比具有顯著性差異（P0.05）。對(duì)照組胞漿I-κBα蛋白有較強(qiáng)的表達(dá)，加力后，胞漿I-κBα蛋白發(fā)生磷酸化并降解表達(dá)顯著降低與對(duì)照組相比具有顯著差異（P0.05），加入PDTC后，胞漿I-κBα蛋白表達(dá)增加，與12h相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 ③蛋白印跡結(jié)果顯示：當(dāng)牙周膜細(xì)胞受到12%形變率的周期性牽張應(yīng)力作用時(shí)，MMP-2蛋白的表達(dá)增加，與對(duì)照組相比具有顯著性差異（P0.05），12h時(shí)MMP-2蛋白表達(dá)最高。NF-κB通路抑制劑PDTC可抑制機(jī)械牽張應(yīng)力作用下牙周膜細(xì)胞MMP-2表達(dá)的增加，與單純加力組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論：①采用膠原酶消化法成功的分離培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞并構(gòu)建hPDLCs-力學(xué)刺激模型。 ②12%形變率的周期性牽張應(yīng)力作用于牙周膜細(xì)胞時(shí)，NF-κB通路被激活，胞漿I-κBα蛋白表達(dá)水平的降低，I-κBα降解是NF-κB信號(hào)通路激活的機(jī)制之一。 ③12%形變率的周期性機(jī)械牽張應(yīng)力可誘導(dǎo)人牙周膜細(xì)胞MMP-2的表達(dá)增加，從而影響牙周組織細(xì)胞外基質(zhì)代謝同時(shí)機(jī)械牽張應(yīng)力可通過(guò)NF-κB通路影響MMP-2蛋白的表達(dá)。
[Abstract]:Aim: to study the effect of distraction stress on the NF- 魏 B signaling pathway of human periodontal ligament cells and its relationship with the expression of MMP-2 in vitro by collagenase digestion and to construct a model of tensile stress loading in human periodontal ligament cells. Methods: human periodontal ligament cells were cultured by collagenase digestion in vitro and the model of tensile stress loading was constructed. 鏂規(guī)硶: 1 鑳跺師 閰

本文編號(hào)：2455739