【摘要】：目的：基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)是原位組織工程中最重要的趨化因子之一,對(duì)人牙周膜干細(xì)胞有趨化和促增殖分化作用,局部應(yīng)用能夠促進(jìn)牙周組織再生。甲狀旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)作為唯一得到美國(guó)食品和藥物管理局(Food and Drug Administration, FDA)批準(zhǔn)的用于治療骨質(zhì)疏松的骨合成代謝藥物,能夠動(dòng)員骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)入血液,并抑制蛋白二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase-Ⅳ, DPP-Ⅳ)對(duì) SDF-1的降解。目前PTH和SDF-1聯(lián)合應(yīng)用促進(jìn)組織再生的研究更多的是集中心臟損傷方面,應(yīng)用于牙周組織再生方面的研究甚少。本研究的目的是探討PTH和SDF-1聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人牙周膜干細(xì)胞增殖、遷移及分化的影響,為牙周組織再生的深入研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：從因正畸需要而拔除的健康前磨牙上分離、培養(yǎng)人牙周膜干細(xì)胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSCs),用有限稀釋法篩選單細(xì)胞克隆；通過(guò)細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(cell-counting kit-8, CCK8)、細(xì)胞遷移試驗(yàn)、堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)活性測(cè)試、茜素紅染色法和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)測(cè)定PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用對(duì)hPDLSCs增殖、遷移能力和成骨分化能力的影響。使用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,數(shù)據(jù)均用Mean±SEM表示。P0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果：①成功分離培養(yǎng)出人牙周膜干細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)正常,狀態(tài)良好。②PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用能夠促進(jìn)PDLSCs的增殖和遷移能力：CCK8結(jié)果表明PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng)最強(qiáng)(P0.05)；遷移實(shí)驗(yàn)表明實(shí)驗(yàn)組均能夠促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞的遷移(P0.05),聯(lián)合PTH之后使SDF-1的促遷移效應(yīng)更強(qiáng)(P0.05)。③PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用能夠促進(jìn)PDLSCs的成骨分化：ALP活性測(cè)試結(jié)果是細(xì)胞培養(yǎng)7天時(shí)PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用能夠顯著增加ALP活性(P0.05),細(xì)胞培養(yǎng)14天時(shí)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間的ALP活性已無(wú)顯著性差異(P0.05),表明PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用在細(xì)胞培養(yǎng)的早期能增加ALP活性；茜素紅染色結(jié)果表明PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用能夠顯著促進(jìn)礦化結(jié)節(jié)的形成CP0.05)；qRT-PCR結(jié)果顯示PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用能夠上調(diào)成骨相關(guān)標(biāo)志物BSP、Runx2、OCN的基因表達(dá)水平(P0.05)。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)證實(shí)PTH與SDF-1聯(lián)合應(yīng)用能夠更大程度的促進(jìn)人牙周膜干細(xì)胞增殖、遷移及成骨分化。
[Abstract]:Objective: stromal cell derived factor-1 (stromal cell derived factor-1,SDF-1) is one of the most important chemokines in situ tissue engineering. Local application can promote periodontal tissue regeneration. Parathyroid hormone (parathyroid hormone, PTH), the only bone synthesis metabolic drug approved by the U.S. Food and Drug Administration (Food and Drug Administration, FDA) for the treatment of osteoporosis, mobilizes bone marrow stromal cells into the blood. The degradation of SDF-1 by protein dipeptidyl peptidase 鈪，

本文編號(hào)：2450855