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局部注射木通皂苷D對(duì)大鼠正畸牙周組織改建的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-02-20 17:25

  本文關(guān)鍵詞:大鼠正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中張力側(cè)牙周組織RUNX2、OSX、OPN的表達(dá),,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《山東大學(xué)》 2012年

局部注射木通皂苷D對(duì)大鼠正畸牙周組織改建的影響

王媛  

【摘要】:正畸治療周期一般為1-2年,拔牙矯治時(shí)間更長(zhǎng),隨著矯治時(shí)間的延長(zhǎng),患者發(fā)生齲病、牙周病的機(jī)率也會(huì)隨之增大,患者的配合的可能性會(huì)逐漸降低。因此自20世紀(jì)70年代以來(lái),國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者便開(kāi)始了對(duì)加快正畸牙齒移動(dòng),縮短正畸治療療程的探索。1982年,日本學(xué)者Yamasaki率先在移動(dòng)牙齒周圍局部注射前列腺素,并取得肯定療效。隨后,越來(lái)越多的藥物逐漸被應(yīng)用于加速正畸牙齒移動(dòng)的研究中,如維生素D,降鈣素等。近年來(lái),傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的治療理念正逐漸為世界所接受,傳統(tǒng)醫(yī)藥受到國(guó)際社會(huì)越來(lái)越多的關(guān)注,因此,許多正畸學(xué)者將目光轉(zhuǎn)向傳統(tǒng)中藥,并進(jìn)行了深入細(xì)致的研究。但由于中藥化學(xué)成分很繁雜,有效成分定性定量還存在有困難,中藥療效的發(fā)揮可能涉及到多個(gè)作用靶點(diǎn)。故無(wú)論在細(xì)胞水平還是動(dòng)物整體水平上,中藥的研究難度都很大。在以往的研究中,往往是對(duì)一種中藥或者復(fù)方制劑在正畸牙齒移動(dòng)中的作用進(jìn)行研究,很難揭示中藥促進(jìn)牙齒移動(dòng)的具體機(jī)制。隨著生物技術(shù)的發(fā)展和中藥現(xiàn)代化的深入,越來(lái)越多的中藥有效成分被分離和鑒定,中藥有效成分的單體逐漸被應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)研究中,使從細(xì)胞分子水平研究中藥的作用機(jī)制成為可能。本研究以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,在成功建立大鼠正畸牙齒移動(dòng)模型的基礎(chǔ)上,局部注射不同濃度補(bǔ)腎中藥川續(xù)斷的活性化學(xué)成分木通皂苷D(川續(xù)斷皂苷Ⅵ, Asperosaponin D, ASD),通過(guò)組織學(xué)、酶化學(xué)、免疫組織化學(xué)等技術(shù)觀察大鼠正畸牙齒移動(dòng)速度、牙周組織改建、牙周組織中破骨細(xì)胞分化因子(ODF)的表達(dá)變化,并與前列腺素E2(PGE2)進(jìn)行對(duì)比,試圖探索一種新的安全有效的加快正畸牙齒移動(dòng)的方法,為臨床治療提供一定的理論依據(jù)。 目的:本研究通過(guò)對(duì)大鼠正畸牙齒腭側(cè)黏骨膜下局部注射PGE2以及不同濃度ASD溶液,探討不同濃度ASD溶液對(duì)正畸牙齒移動(dòng)速度的影響,以及對(duì)正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中牙周組織ODF表達(dá)的影響,并與PGE2對(duì)正畸牙齒移動(dòng)的影響進(jìn)行比較,分析不同濃度的ASD溶液在大鼠正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中的作用,推測(cè)ASD對(duì)正畸牙移動(dòng)影響的可能機(jī)理,為臨床正畸局部使用ASD促進(jìn)正畸牙齒移動(dòng),提供可供參考的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:選取48只SPF級(jí)雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為ASD1組、ASD2組、PGE2組和對(duì)照組,每組12只。首先建立大鼠正畸牙齒移動(dòng)實(shí)驗(yàn)?zāi)P?ASD1組在上頜第一磨牙近中腭側(cè)黏骨膜下以5mg/kg的比例局部注射ASD溶液;ASD2組在同樣部位以10mg/kg的比例局部注射ASD溶液;PGE2組按照25gg/kg的比例局部注射PGE2溶液;對(duì)照組注射生理鹽水。四組動(dòng)物分別于正畸加力3、7、14、21、28天后,分批處死,分離大鼠上下頜骨,取上頜骨作為標(biāo)本,測(cè)量各期上頜第一磨牙牙齒移動(dòng)的距離,隨后,所有標(biāo)本制成上頜牙周組織切片,分別采用HE染色觀察大鼠第一磨牙加力過(guò)程中牙周組織的改建情況,酶化學(xué)染色觀察牙周組織中破骨細(xì)胞的形態(tài)及數(shù)量變化,免疫組化檢測(cè)牙周組織壓力側(cè)ODF的表達(dá)變化。四組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,采用方差分析和t檢驗(yàn),P0.05認(rèn)為差異有顯著性。 結(jié)果: 1.四組動(dòng)物于正畸加力3、7、14、21、28天牙齒移動(dòng)距離依次遞增。在加力第3天,與對(duì)照組相比,各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物牙齒移動(dòng)距離均大于對(duì)照組,但只有PGE2組與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其他各組與對(duì)照組之間相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與PGE2組相比,ASD1組和ASD2組牙齒移動(dòng)距離均減小,但只有ASD1組與PGE2組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在加力第7天,與對(duì)照組相比,各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物牙齒移動(dòng)距離明顯大于對(duì)照組,ASD2組和PGE2組與對(duì)照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而ASD1組與對(duì)照組之間相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與PGE2組相比,ASD1組和ASD2組牙齒移動(dòng)距離均減小,但ASD1組與PGE2組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在加力第14、21、28天,ASD1組、ASD2組和PGE2組牙齒移動(dòng)距離與對(duì)照組相比明顯增大,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);ASD1組與ASD2組和PGE2組相比牙齒移動(dòng)距離減小,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各時(shí)間段ASD2組和PGE2組之間牙齒移動(dòng)距離相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)(見(jiàn)表2、圖3) 2.蘇木精-伊紅(HE)染色顯示(見(jiàn)圖5-18):各組動(dòng)物遠(yuǎn)中張力側(cè)牙周膜隨時(shí)間增加間隙增寬,牙周組織血管擴(kuò)張,牙槽骨表面成骨細(xì)胞出現(xiàn),新骨形成;近中壓力側(cè)牙周膜間隙縮窄,膠原纖維排列紊亂,牙周組織出現(xiàn)透明樣變,牙槽骨呈蠶食狀的吸收陷窩,可見(jiàn)多核細(xì)胞的聚集。多核破骨細(xì)胞的數(shù)目隨著時(shí)間的推移逐漸呈上升趨勢(shì),到第21天多核破骨細(xì)胞的數(shù)目達(dá)到高峰,隨后,多核破骨細(xì)胞的數(shù)目逐漸減少(見(jiàn)表3、圖4) 3.抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色顯示(見(jiàn)圖19-23):壓力側(cè)牙周膜中TRAP陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目隨著時(shí)間的推移逐漸增多,到第21天破骨細(xì)胞的數(shù)目達(dá)到高峰,隨后破骨細(xì)胞的數(shù)目開(kāi)始下降,這與HE染色的結(jié)果保持一致(見(jiàn)圖4)。在加力第3天,各組動(dòng)物之間多核破骨細(xì)胞數(shù)目沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。在加力第7天,與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組動(dòng)物多核破骨細(xì)胞數(shù)目均增加。ASD2組和PGE2組與對(duì)照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而ASD1組與對(duì)照組之間相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與PGE2組相比,ASD1組和ASD2組多核破骨細(xì)胞數(shù)目均減少,但只有ASD1組與PGE2組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在加力第14、21天,與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組動(dòng)物多核破骨細(xì)胞數(shù)目均顯著性增加(P0.05);與PGE2組相比,ASD1組和ASD2組多核破骨細(xì)胞數(shù)目均減小,但ASD1組與PGE2組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在加力第28天,與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組動(dòng)物多核破骨細(xì)胞數(shù)目均顯著性增加(P0.05);與PGE2組相比,ASD2組多核破骨細(xì)胞數(shù)目增加,但二者之間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而ASD1組多核破骨細(xì)胞數(shù)目減小,且與PGE2組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05) 4.免疫組化染色結(jié)果顯示(見(jiàn)圖24-29):在牙槽骨壓力側(cè)出現(xiàn)ODF的表達(dá),且ODF的表達(dá)量隨著時(shí)間的推移逐漸增加,到第21天ODF的表達(dá)量達(dá)到高峰,隨后ODF的表達(dá)量逐漸降低。這與HE染色以及TRAP染色的結(jié)果保持一致。 結(jié)論: 1.局部注射ASD可有效提高大鼠正畸牙齒移動(dòng)速度,增加了牙齒移動(dòng)距離。 2.ASD可減少壓力側(cè)牙周組織透明樣變的形成,增加了牙周組織破骨細(xì)胞的數(shù)量,加快骨改建速度。 3.ASD能增強(qiáng)牙周組織中ODF的表達(dá),從而加快了正畸牙齒移動(dòng)。 4.ASD以1Omg/kg的比例局部注射可以有效的促進(jìn)正畸牙齒移動(dòng),其作用與PGE2促進(jìn)正畸牙齒移動(dòng)的效果相似,而ASD以5mg/kg的比例局部注射促進(jìn)牙齒移動(dòng)的效果不如PGE2明顯。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R782.054
【目錄】:

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4 楊美祥,丁寅,鄒邦新,金作林;大鼠正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中牙周組織超微結(jié)構(gòu)的改變[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2002年10期

5 楊美祥,丁寅,鄒邦新,金作霖;骨質(zhì)疏松大鼠正畸牙齒移動(dòng)中牙周組織超微結(jié)構(gòu)的變化[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年01期

6 李東;段銀鐘;陳華;;前列腺素與正畸牙齒移動(dòng)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè);1989年05期

7 張丁;傅民魁;任玉香;武登誠(chéng);;丹參對(duì)鼠齒槽骨破骨活動(dòng)的影響[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;1993年02期

8 陳文靜;;超聲波與加速正畸牙齒移動(dòng)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè);1992年03期

9 王媛;王旭霞;賈玉龍;顏淑云;張君;;灌服川續(xù)斷水煎液對(duì)大鼠正畸牙移動(dòng)及骨密度的影響[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年06期

10 李寶勇;丁寅;潘峰;王光;沈煥;;牙周炎大鼠正畸牙齒移動(dòng)中牙周組織內(nèi)iNOS的表達(dá)變化[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王燕;荀文興;丁寅;;牙周膜微循環(huán)對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖和分化的影響[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)全科口腔醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)第一次學(xué)術(shù)年會(huì)會(huì)議論文集[C];2009年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 馬文盛;牽張成骨快速正畸牙齒移動(dòng)的實(shí)驗(yàn)與應(yīng)用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

2 侯旭;ODN MT01通過(guò)MAPK通路調(diào)控成骨細(xì)胞分化的機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙秀敏;正畸牙齒移動(dòng)和腫瘤壞死因子α表達(dá)關(guān)系的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2010年

2 安陽(yáng);巨噬細(xì)胞集落刺激因子油包水型微乳對(duì)大鼠正畸牙齒移動(dòng)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

3 王媛;局部注射木通皂苷D對(duì)大鼠正畸牙周組織改建的影響[D];山東大學(xué);2012年

4 閆欣;正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中Follistatin在牙周組織中表達(dá)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

5 楊琳琳;正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中BMP-2在牙周組織中表達(dá)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2010年

6 鄒聰;正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中BMP-1在牙周組織中表達(dá)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

7 姜婷婷;正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中Smurf1在牙周組織中表達(dá)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

8 宋楠;灌服中藥骨碎補(bǔ)、川續(xù)斷、丹參對(duì)大鼠正畸牙移動(dòng)過(guò)程中破骨細(xì)胞的影響[D];山東大學(xué);2011年

9 王雅楠;骨質(zhì)疏松大鼠正畸牙齒移動(dòng)對(duì)牙根吸收的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

10 韓旻軒;大鼠正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中張力側(cè)牙周組織RUNX2、OSX、OPN的表達(dá)[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年


  本文關(guān)鍵詞:大鼠正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中張力側(cè)牙周組織RUNX2、OSX、OPN的表達(dá),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):244214

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