發(fā)布時間：2019-02-16 16:08

【摘要】：目的研究在不同pH培養(yǎng)條件下,變異鏈球菌菌株的sRNA SpR19及其潛在靶向的GroEL蛋白在不同致齲力菌株中的表達變化,探討其作為高致齲變異鏈球菌的分子鑒別標志物的可能性。方法提取高致齲性變異鏈球菌的臨床分離株(菌株17)和低致齲性變異鏈球菌的臨床分離株(菌株5)的總RNA,建庫后進行高通量測序獲得差異表達的sRNA;結(jié)合生物信息學與文獻,挑選關(guān)鍵sRNA與蛋白進行不同致齲菌株表達水平的研究:qRT-PCR驗證目的sRNA SpR19在pH5.5和pH7培養(yǎng)條件下不同致齲能力菌株中的表達水平;合成變異鏈球菌GroEL蛋白抗原多肽并制備多克隆抗體,Western blotting鑒定不同pH培養(yǎng)條件下高、低致齲菌中GroEL的表達水平;qRT-PCR驗證不同pH培養(yǎng)條件下不同致齲能力菌株GroEL的mRNA的表達水平。結(jié)果生物信息學提示SpR19可能靶向GroEL的mRNA及上下游基因間區(qū);不同pH條件下,相較于低致齲菌,高致齲菌中sRNA SpR19表達下降(P0.05),而GroEL蛋白與mRNA高表達(P0.05),二者表達趨勢相反。結(jié)論不同pH條件培養(yǎng)的高致齲性變異鏈球菌中,sRNA SpR19均低表達,GroEL的蛋白水平與RNA水平均存在高表達,結(jié)合生物信息學分析提示sRNA SpR19可能通過靶向GroEL負調(diào)控變異鏈球菌的致齲能力。
[Abstract]:Objective to study the expression of sRNA SpR19 and its potential target GroEL protein in different cariogenic strains of Streptococcus mutans under different pH culture conditions, and to explore the possibility of using them as molecular markers for identification of Streptococcus mutans with high caries. Methods the total RNA, of the clinical isolates of Streptococcus mutans with high caries (strain 17) and the clinical isolates of Streptococcus mutans with low caries (strain 5) were obtained by high throughput sequencing. Combined with bioinformatics and literature, the key sRNA and protein were selected to study the expression level of different caries causing strains: qRT-PCR was used to verify the expression level of sRNA SpR19 in different cariogenic strains under pH5.5 and pH7 culture conditions. Streptococcus mutans GroEL protein antigen peptide was synthesized and polyclonal antibody, Western blotting was prepared to identify the GroEL expression level of high and low cariogenic bacteria under different pH culture conditions. QRT-PCR was used to test the mRNA expression level of different cariogenic strains GroEL under different pH culture conditions. Results Bioinformatics suggested that SpR19 might target the mRNA and the upstream and downstream regions of GroEL. Compared with low cariogenic bacteria, the expression of sRNA SpR19 in high cariogenic bacteria decreased (P0.05), but GroEL protein and mRNA were highly expressed (P0.05) under different pH conditions. Conclusion in Streptococcus mutans with high caries induced by different pH conditions, the expression of sRNA SpR19 is low, and the protein level of GroEL and RNA level are high. Combined with bioinformatics analysis, sRNA SpR19 may negatively regulate the cariogenic ability of Streptococcus mutans by targeting GroEL.
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院口腔科;軍事醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所;解放軍總后勤部第一門診部口腔中心;
【基金】：軍隊十二五面上項目(CWS12J126)
【分類號】：R780.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 肖斌;陳瑜;李林海;羅樹紅;郝文波;;兔抗弓形蟲CorA家族Mg~(2+)轉(zhuǎn)運蛋白多肽抗體的制備及鑒定[J];生物技術(shù)通訊;2016年06期

2 王一舟;張雅琪;牛雪微;張志民;;變異鏈球菌groE操縱子及其表達與調(diào)控[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2016年03期

3 夏麗;王成龍;儲冰峰;;生物信息學在預(yù)測和鑒定變形鏈球菌非編碼RNA中的應(yīng)用[J];中華老年口腔醫(yī)學雜志;2015年04期

4 何勝平;陳雅華;趙瑛瑛;王繼德;白楊;;肝螺桿菌甲基基團趨化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白多克隆抗體的制備及鑒定[J];南方醫(yī)科大學學報;2013年09期

5 王成龍;胡丹陽;劉佼佼;李少華;蘇東華;席慶;儲冰峰;夏偉;趙強;丁紅梅;羅燕萍;楊繼勇;鄧斌;徐娟;邵寧生;;不同致齲性變形鏈球菌臨床分離株差異ssDNA配基的篩選和鑒定[J];南方醫(yī)科大學學報;2013年05期

6 王成龍;劉佼佼;蘇東華;儲冰峰;李少華;夏偉;羅燕萍;楊繼勇;丁紅梅;趙強;鄧斌;席慶;徐娟;邵寧生;;高致齲性變異鏈球菌臨床分離株的初步篩選[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2013年02期

7 王立貴;趙雅琳;李伍舉;;細菌sRNA基因及其靶標預(yù)測研究進展[J];微生物學報;2009年01期

8 趙興福;黃曉晶;蔡志宇;閆福華;鐘聲;邱明;;高齲患者與無齲健康人口內(nèi)變形鏈球菌蛋白表達差異的初步分析[J];口腔醫(yī)學研究;2008年02期

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 閆嘯;分子伴侶GroEL/GroES介導(dǎo)重組蛋白可溶表達及折疊與組裝初步研究[D];浙江大學;2012年

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡桐楠;鄭偉;李少華;董潔;王心玲;王成龍;邵寧生;儲冰峰;;不同pH條件下高低致齲性變異鏈球菌sRNA SpR19及其潛在靶標GroEL的表達變化[J];南方醫(yī)科大學學報;2017年06期

2 胡桐楠;儲冰峰;;變形鏈球菌環(huán)境應(yīng)激反應(yīng)研究[J];口腔頜面修復(fù)學雜志;2017年02期

3 靳貴曉;李娟;楊黃浩;;核酸適體的篩選及其在生物醫(yī)學領(lǐng)域的研究進展[J];福州大學學報(自然科學版);2016年06期

4 崔偉;王成龍;;變形鏈球菌蛋白質(zhì)組學研究進展[J];中華老年口腔醫(yī)學雜志;2016年06期

5 王靜芳;黃利華;伍勇;楊林飛;任瑤;邢曉為;;SUN5特異性抗體的制備及其應(yīng)用[J];南方醫(yī)科大學學報;2016年05期

6 趙興福;江山;黃曉晶;閆福華;;變異鏈球菌臨床株表面相關(guān)蛋白表達差異的初步分析[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2016年03期

7 陳澤文;黎靜;李愷得;邱傳彬;譙躍銀;薛晶;李雨慶;;不同pH值對變異鏈球菌ffh基因表達的影響[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2016年01期

8 肖梅;;口服益生菌促進兒童早期齲損再礦化臨床研究[J];海南醫(yī)學;2016年02期

9 王天齊;陳穎鈺;郭愛珍;;結(jié)核分枝桿菌相關(guān)非編碼RNA研究進展[J];中國奶牛;2015年14期

10 趙興福;江山;黃曉晶;閆福華;;酸性條件下變異鏈球菌臨床株表面相關(guān)蛋白表達差異分析[J];天津醫(yī)藥;2015年07期

相關(guān)碩士學位論文 前2條

1 何姝穎;重組大腸桿菌D-1,2,4-丁三醇合成中副產(chǎn)物途徑的敲除及關(guān)鍵酶的強化表達[D];江南大學;2017年

2 黃壽錕;巰基微球協(xié)助含二硫鍵蛋白質(zhì)體外復(fù)性研究[D];浙江大學;2013年

【二級參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王靜芳;黃利華;伍勇;楊林飛;任瑤;邢曉為;;SUN5特異性抗體的制備及其應(yīng)用[J];南方醫(yī)科大學學報;2016年05期

2 門穎麗;王小龍;丁聰;王曉東;汲振余;王婷;康巧珍;劉鑫;;兔抗小鼠IL-23p19多克隆抗體的制備和鑒定[J];細胞與分子免疫學雜志;2016年05期

3 徐永娟;李馬超;陳雙雙;肖詩琪;劉海燦;趙秀芹;吳移謀;萬康林;;中國結(jié)核分枝桿菌五種特異性抗原人B細胞表位多態(tài)性分析[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2016年05期

4 周佼佼;陶莉莉;;無錫地區(qū)孕婦弓形蟲感染及危險因素調(diào)查[J];中國血吸蟲病防治雜志;2015年06期

5 沈繼龍;王林;;弓形蟲的基因型及其主要效應(yīng)分子的致病機制[J];中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志;2015年06期

6 張佳鳳;郝文波;肖斌;廖小青;羅樹紅;;抗弓形蟲水通道蛋白多肽抗體的制備及鑒定[J];中國人獸共患病學報;2015年10期

7 佟澄碧;郝文波;羅樹紅;肖斌;程莎莎;廖小青;潘迪;;兔抗弓形蟲Ⅰ型液泡型質(zhì)子焦磷酸酶多克隆抗體的制備及鑒定[J];南方醫(yī)科大學學報;2015年08期

8 華倩倩;李相志;萬玉靜;陳弟;趙徐寒暉;蔣凱;胡昕;潘長旺;譚峰;;剛地弓形蟲自噬相關(guān)蛋白3基因的克隆表達與多抗制備[J];中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志;2014年06期

9 王成龍;劉佼佼;蘇東華;儲冰峰;李少華;夏偉;羅燕萍;楊繼勇;丁紅梅;趙強;鄧斌;席慶;徐娟;邵寧生;;高致齲性變異鏈球菌臨床分離株的初步篩選[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2013年02期

10 王成龍;蘇東華;劉佼佼;儲冰峰;李少華;夏偉;羅燕萍;楊繼勇;丁紅梅;趙強;鄧斌;席慶;徐娟;邵寧生;;不同基因型變異鏈球菌臨床分離株的分離和鑒定[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2013年01期

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 王紅寅;疏水性電荷誘導(dǎo)層析分離抗體的分子模擬研究[D];浙江大學;2011年

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陸史俊;魏昕;;變異鏈球菌耐酸分子機制的研究進展[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2008年05期

2 李小明;茍建重;;變異鏈球菌黏結(jié)素的提取及檢測[J];陜西醫(yī)學雜志;2009年05期

3 李小明;茍建重;;全唾液中變異鏈球菌受體的檢測[J];西安交通大學學報(醫(yī)學版);2010年02期

4 劉朝一,范生堯;營養(yǎng)變異鏈球菌的分離及鑒定[J];臨床檢驗雜志;1992年01期

5 崔巖,李世杰,朱姝媛,李玉軍;變異鏈球菌致亞急性感染性心內(nèi)膜炎一例[J];中華醫(yī)學檢驗雜志;1999年05期

6 田曉蓓;何永紅;萬呼春;;變異鏈球菌蛋白質(zhì)組研究進展[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2008年03期

7 趙莉;林煥彩;;口腔變異鏈球菌表面蛋白與轉(zhuǎn)肽酶的關(guān)系[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2008年05期

8 何永紅;田曉蓓;萬呼春;溫艷麗;張菲菲;馬琴睿;;變異鏈球菌蛋白質(zhì)提取方法研究[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2009年01期

9 霍麗s，

本文編號：2424612