【摘要】：目的研究侵入牙周組織細胞內(nèi)的細菌對細胞表達環(huán)鳥苷-腺苷合成酶(c GAS)的影響。方法將SYTO9標(biāo)記的牙齦卟啉單胞菌(P.gingivalis)以感染復(fù)數(shù)(MOI)為10與人牙周膜細胞(hPDLCs)共培養(yǎng)24 h后,使用激光共聚焦顯微鏡觀察P.gingivalis對hPDLCs的侵襲情況,并應(yīng)用熒光標(biāo)記活細胞篩選(FACS)分選出被P.gingivalis入侵的hPDLCs,利用實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)和Western blot對hPDLCs中c GAS的表達變化進行檢測。此外還利用免疫組織化學(xué)技術(shù)對細菌感染性牙齦組織和正常牙齦組織中c GAS表達定位和表達水平變化進行分析。結(jié)果激光共聚焦顯微鏡下觀察,P.gingivalis和hPDLCs共培養(yǎng)24 h后,幾乎所有的細胞內(nèi)都可觀察到綠色熒光;被P.gingivalis感染的hPDLCs中c GAS表達水平明顯上調(diào);在牙齦組織中c GAS主要在上皮細胞和上皮下組織中的炎性細胞中表達;且細菌感染性的牙齦組織中c GAS的表達水平明顯高于正常牙齦組織。結(jié)論侵入hPDLCs內(nèi)的活體P.gingivalis,可以明顯上調(diào)細胞中c GAS的表達;且在細菌感染的炎性牙齦組織中c GAS的表達也明顯升高。該結(jié)果提示c GAS可能參與了牙周組織細胞中細菌來源的病原ds DNA的識別。
[Abstract]:Objective to study the effect of bacteria invading periodontal tissue on the expression of cyclic guanosine adenosine synthase (c GAS). Methods SYTO9 labeled porphyromonas gingivalis (P.gingivalis) was co-cultured with human periodontal ligament cells (hPDLCs) for 24 h with complex (MOI) of 10. The invasion of hPDLCs by P.gingivalis was observed by confocal laser microscopy. The expression of c GAS in hPDLCs was detected by real time quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (Q RT-PCR) and Western blot. The (FACS) was screened by fluorescent labeled living cells and the hPDLCs, which had been invaded by P.gingivalis was detected by real time quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (Q RT-PCR) and Western blot. The expression localization and expression level of c GAS in bacterial infected gingival tissues and normal gingival tissues were analyzed by immunohistochemistry. Results under confocal laser microscope, green fluorescence was observed in almost all cells after co-culture of P.gingivalis and hPDLCs for 24 h, and c GAS expression in hPDLCs infected with P.gingivalis was up-regulated. In gingival tissue, c GAS was mainly expressed in epithelial cells and inflammatory cells in subcutaneous tissue, and the expression level of c GAS in bacterial infective gingival tissue was significantly higher than that in normal gingival tissue. Conclusion in vivo P.gingivalis invading into hPDLCs can significantly up-regulate the expression of c GAS and increase the expression of c GAS in inflammatory gingival tissues infected by bacteria. These results suggest that c GAS may be involved in the identification of pathogenic ds DNA derived from bacteria in periodontal tissue cells.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院口腔科;南方醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81500870) 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院院長基金(2013C017)~~
【分類號】：R781.4

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王曉燕;王俊蓮;丁鰲;孫燕;王勤濤;;P．gingivalis對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞分泌炎性因子的影響[J];上海口腔醫(yī)學(xué);2008年04期

2 Joseph Katz;Mairelys D. Onate;Kaleb M. Pauley;Indraneel Bhattacharyya;Seunghee Cha;;Presence of Porphyromonas gingivalis in gingival squamous cell carcinoma[J];International Journal of Oral Science;2011年04期

3 ;Association between infection of different strains of Porphyromonas gingivalis and Actinobacillus actinomycetemcomitans in subgingival plaque and clinical parameters in chronic periodontitis[J];Journal of Zhejiang University(Science B:An International Biomedicine & Biotechnology Journal);2007年02期

4 David Ojcius;Association between coinfection of Porphyromonas gingivalis, Actinobacillus actinomycetemcomitans and Treponema denticola and periodontal tissue destruction in chronic periodontitis[J];Chinese Medical Journal;2005年11期

5 張冬梅;趙戩;潘亞萍;林莉;李琛;;P. gingivalis感染對血管內(nèi)皮細胞VCAM-1表達的影響[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年03期

6 王琳源;靳贏;林曉萍;;CD4~+T細胞在不同菌株誘導(dǎo)小鼠牙周炎中的表達[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2014年01期

7 郭淑娟;苗棣;徐屹;;膜型基質(zhì)金屬蛋白酶-1與牙周炎的關(guān)系研究進展[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2008年03期

8 林曉萍;韓曉哲;魏巍;周曉佳;Martin A.Taubman;;抗RANKL多克隆抗體對P.gingivalis感染的大鼠牙周骨吸收的抑制作用[J];解剖科學(xué)進展;2009年03期

9 Carol L Fischer;Katherine S Walters;David R Drake;Deborah V Dawson;Derek R Blanchette;Kim A Brogden;Philip W Wertz;;Oral mucosal lipids are antibacterial against Porphyromonas gingivalis, induce ultrastructural damage, and alter bacterial lipid and protein compositions[J];International Journal of Oral Science;2013年03期

10 謝志剛,梁星,丁仲娟,宋宏杰,徐凌;F.nucleatum和P.gingivalis對種植體周齦溝液sICAM-1表達的影響[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2004年03期

相關(guān)會議論文 前4條

1 Chong Cao;LiangJun Zhong;;Effects of Gingipains on the Vascular Smooth Muscle Cells Proliferation[A];第十次全國牙周病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2014年

2 ;Research on Lys-gingipain Induced Apoptosis in HPDLCs[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會第14次全國口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議（2012年會）論文匯編[C];2012年

3 胡琳琳;顧飛;葛頌;;牙齦卟啉單胞菌菌毛蛋白誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)的信號通路研究[A];第十次全國牙周病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2014年

4 李霞;雷鄧;葛頌;;牙齦卟啉單胞菌脂多糖誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)的信號通路及產(chǎn)生內(nèi)皮素1和一氧化氮的研究[A];第十次全國牙周病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2014年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 孔凡芝;牙齦卟啉單胞菌Rag基因溯源研究及其蛋白免疫原性分析[D];江蘇大學(xué);2012年

2 張冬梅;牙齦卟啉單胞菌侵入血管內(nèi)皮細胞后粘附分子表達及信號調(diào)控的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

3 郭永華;牙齦卟啉單胞菌菌毛fimA基因遺傳多態(tài)性和致病性的研究[D];四川大學(xué);2005年

4 寇育榮;牙齦卟啉單胞菌對牙齦上皮細胞粘附和炎癥介質(zhì)的影響以及多酚對細胞炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)的體外研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

5 趙蕾;不同fimA基因型牙齦卟啉單胞菌致病機理的研究[D];四川大學(xué);2007年

6 雷浪;高脂血癥影響載脂蛋白E基因敲除小鼠對牙齦卟啉單胞菌的先天免疫并促進牙周病進展的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

7 張鳳秋;牙齦卟啉菌牙齦蛋白酶K催化結(jié)構(gòu)域基因克隆、表達、純化及預(yù)防牙周炎的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 喻麗;不同fimA型牙齦卟啉單胞菌脂多糖對人臍動脈平滑肌細胞功能的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

2 林玉祥;牙齦卟啉單胞菌脂多糖對血管內(nèi)皮細胞功能影響的實驗研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2010年

3 鄭重陽;血鏈球菌和/或牙齦卟啉單胞菌對血小板聚集作用的研究[D];浙江大學(xué);2011年

4 蔡樹玉;不同fimA基因型牙齦卟啉單胞菌對血管內(nèi)皮細胞功能影響的實驗研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2009年

5 費曉露;具核梭桿菌黏附和侵入上皮細胞的初步研究[D];四川大學(xué);2005年

6 楊潔;牙齦卟啉單胞菌感染的動脈粥樣硬化患者調(diào)節(jié)性T細胞的分布特征[D];南京大學(xué);2013年

7 歐陽玉玲;不同fimA基因型牙齦卟啉單胞菌致病力的比較[D];四川大學(xué);2007年

8 顧飛;牙齦卟啉單胞菌菌毛蛋白誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)的信號通路研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2011年

9 金晶;ⅣfimA型牙齦卟啉單胞菌重組菌毛蛋白誘導(dǎo)HUVECs天然免疫反應(yīng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2011年

，

本文編號：2351654