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腺病毒介導(dǎo)Epo基因?qū)撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞影響的體外研究

發(fā)布時(shí)間:2018-11-18 22:04
【摘要】:目的:研究促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,Epo)對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)增殖和分化的影響。方法:分離培養(yǎng)大鼠BMMSCs并進(jìn)行傳代;在成骨誘導(dǎo)條件下,以腺病毒為載體,分別攜帶Epo基因和EGFP基因作為實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組,轉(zhuǎn)染第3代BMMSCs,以加入相同體積無血清培養(yǎng)基作為空白對照組;通過MTT、RT-PCR、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色以及茜素紅染色方法檢測細(xì)胞的增殖和分化;采用配對t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:陰性對照組與空白對照組相比沒有差異;實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組相比,細(xì)胞數(shù)量增加(P0.05),ALP染色以及鈣結(jié)節(jié)形成明顯;實(shí)驗(yàn)組3 d時(shí)Runx2、Osx的表達(dá)及9 d時(shí)OCN的表達(dá)增加(P0.05)。結(jié)論:Epo能促進(jìn)BMMSCs的增殖及其向成骨細(xì)胞的分化。
[Abstract]:Aim: to study the effect of erythropoietin (erythropoietin,Epo) on proliferation and differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells (bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs). Methods: rat BMMSCs was isolated and subcultured. Under the condition of osteogenic induction, adenovirus was used as vector, Epo gene and EGFP gene were carried as experimental group and negative control group respectively. The third generation BMMSCs, was transfected into the same volume serum-free medium as blank control group. Cell proliferation and differentiation were detected by MTT,RT-PCR, alkaline phosphatase (alkaline phosphatase,ALP) staining and alizarin red staining. Results: there was no difference between the negative control group and the blank control group, and the number of cells in the experimental group was higher than that in the negative control group (P0.05). The expression of Runx2,Osx and OCN increased at 3 d and 9 d in the experimental group (P0.05). Conclusion: Epo can promote the proliferation of BMMSCs and its differentiation into osteoblasts.
【作者單位】: 吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院病理科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號:81271111)
【分類號】:R780.2

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號:2341398


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