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牽張應(yīng)力對人牙周膜成纖維細(xì)胞細(xì)胞外金屬基質(zhì)蛋白酶誘導(dǎo)劑表達(dá)的影響及相關(guān)信號通路的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-10-23 10:53
【摘要】:目的研究人牙周膜成纖維細(xì)胞(PDLFs)在循環(huán)牽張力下細(xì)胞外金屬基質(zhì)蛋白酶誘導(dǎo)劑(EMMPRIN)(CD147/basgin)的表達(dá)變化以及對血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達(dá)的影響,推測EMMPRIN在應(yīng)力作用下牙周組織改建過程中的可能作用。方法采用熒光免疫組織化學(xué)法檢測EMMPRIN和VEGF在PDLFs中的表達(dá)定位;使用Flexcell System對PDLFs加載6%、12%、20%的循環(huán)牽張力0.5、2、6、12、24、36、48及72 h后,采用實(shí)時(shí)PCR和Western blotting的方法分別觀察PDLFs內(nèi)EMMPRIN及VEGF的基因及蛋白的表達(dá)變化;在PDLFs培養(yǎng)液中加入外源性EMMPRIN蛋白6、12、24 h后,分別觀察PDLFs內(nèi)VEGF的基因及蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果 EMMPRIN蛋白主要表達(dá)于PDLFs的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì),而VEGF則在PDLFs的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中有較強(qiáng)表達(dá)。對PDLFs分別施加6%、12%及20%的機(jī)械牽張力后,細(xì)胞內(nèi)EMMPRIN與VEGF的基因和蛋白表達(dá)均特異性上調(diào);外源性的EMMPRIN蛋白可以促進(jìn)PDLFs中VEGF mRNA的表達(dá)。結(jié)論機(jī)械牽張力可特異性上調(diào)PDLFs中EMMPRIN和VEGF的表達(dá);EMMPRIN可能調(diào)控VEGF的表達(dá)并與之共同參與應(yīng)力作用下的牙周組織改建的過程。
[Abstract]:Objective to study the expression of extracellular matrix proteinase (EMMPRIN) (CD147/basgin) and the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in human periodontal ligament fibroblasts (PDLFs) under cyclic tension. The possible role of EMMPRIN in the process of periodontal tissue remodeling under stress was inferred. Methods the expression localization of EMMPRIN and VEGF in PDLFs was detected by fluorescence immunohistochemical method, and the cyclic tension of PDLFs loaded with Flexcell System was 0.5% and 20%. The expression of EMMPRIN and VEGF genes and proteins in PDLFs were observed by real-time PCR and Western blotting, and the expression of VEGF genes and proteins in PDLFs were observed after the addition of exogenous EMMPRIN protein 612C 24 h into PDLFs medium. Results EMMPRIN protein was mainly expressed in the cell membrane and cytoplasm of PDLFs, while VEGF was strongly expressed in the nucleus and cytoplasm of PDLFs. The gene and protein expression of EMMPRIN and VEGF in PDLFs were up-regulated by mechanical tension of 12% and 20%, respectively. Exogenous EMMPRIN protein could promote the expression of VEGF mRNA in PDLFs. Conclusion Mechanical tension can specifically up-regulate the expression of EMMPRIN and VEGF in PDLFs and EMMPRIN may regulate the expression of VEGF and participate in the process of periodontal tissue remodeling under stress.
【作者單位】: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院口腔修復(fù)科上海口腔醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【分類號】:R78

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號:2289023

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