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210促進(jìn)人牙周膜干細(xì)胞血管向分化作用的體外研究

發(fā)布時(shí)間:2016-12-24 10:40

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《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2015年

miR-210促進(jìn)人牙周膜干細(xì)胞血管向分化作用的體外研究

古月  

【摘要】:目的構(gòu)建mi R-210的慢病毒載體(Lenti-mi R-210-Luciferase),然后轉(zhuǎn)染人牙周膜干細(xì)胞(human periodontal ligament stem cells,h PDLSC)后,檢測(cè)成血管因子低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在h PDLSCs的表達(dá)。方法在體外分離培養(yǎng)h PDLSC,構(gòu)建慢病毒載體Lenti-mi R-210-Luciferase(Lenti-Lac Z-Luciferase為對(duì)照組),檢測(cè)慢病毒滴度后,將慢病毒轉(zhuǎn)染h PDLSCs,通過(guò)q PCR和細(xì)胞免疫組織化學(xué)法來(lái)檢測(cè)HIF-1α及VEGF的表達(dá)。結(jié)果用Lenti-mi R-210-Luciferase轉(zhuǎn)染h PDLSCs,0、1、4、7和14 d后q PCR檢測(cè),結(jié)果表明轉(zhuǎn)染后的第4 d,HIF-1α和VEGF明顯過(guò)表達(dá),HIF-1α在第7天達(dá)到峰值,第14天時(shí)仍處于較高水平;VEGF直到第14d仍有上升趨勢(shì)。細(xì)胞免疫組織化學(xué)結(jié)果是:mi R-210轉(zhuǎn)染PDLSC后,抗HIF-1α和抗VEGF染色呈陽(yáng)性,對(duì)照組呈陰性。結(jié)論成功構(gòu)建了慢病毒載體Lenti-mi R-210-Luciferase,并證明了miR-210具有促進(jìn)PDLSCs血管向分化的作用。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R782
【目錄】:

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  本文關(guān)鍵詞:miR-210促進(jìn)人牙周膜干細(xì)胞血管向分化作用的體外研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):225305

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