【摘要】：目的研究沉默TCA8113舌癌細(xì)胞整合素連接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因的表達(dá),對(duì)其下游底物Akt和GSK3β磷酸化狀態(tài)及對(duì)移植瘤生長(zhǎng)和自發(fā)性轉(zhuǎn)移的影響。方法通過(guò)Lipofectamine 2000介導(dǎo)將特異性siILK表達(dá)載體和無(wú)同源性的對(duì)照載體,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人舌鱗癌TCA8113細(xì)胞,分為TCA8113組、TCA8113 vector組和TCA8113 siILK組,將3組細(xì)胞分別注入裸鼠皮下構(gòu)建移植瘤模型,5周后檢測(cè)瘤質(zhì)量,對(duì)裸鼠肺及瘤組織形態(tài)學(xué)行常規(guī)病理學(xué)檢查,使用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)體外和體內(nèi)癌細(xì)胞p-Akt和p-GSK3β等的表達(dá),并觀察瘤組織內(nèi)血管生成情況。結(jié)果 TCA8113組、TCA8113 vector組肺組織均發(fā)生自發(fā)性轉(zhuǎn)移瘤,TCA8113 siILK組肺組織未發(fā)現(xiàn)自發(fā)性轉(zhuǎn)移瘤;TCA8113 siILK組移植瘤細(xì)胞形態(tài)較其他2組體積減小,核分裂象較少,核漿比例縮小;TCA8113 siILK組在體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)中的p-Akt和p-GSK3β表達(dá)較其他2組均明顯下降(P0.05);TCA8113 siILK組移植瘤質(zhì)量較其他2組顯著降低(P0.05),抑瘤率分別為84%和92%;TCA8113 siILK組移植瘤血管生成較其他2組也明顯減少(P0.05)。結(jié)論沉默TCA8113舌癌細(xì)胞ILK表達(dá)可抑制其下游信號(hào)傳導(dǎo)分子Akt和GSK3β的磷酸化,并抑制移植瘤血管生成,從而抑制移植瘤的生長(zhǎng)。
[Abstract]:Objective to study the expression of integrin-linked kinase (integrin-linked kinase,ILK) gene in TCA8113 tongue cancer cells, and to investigate the effects of silencing the expression of integrin-linked kinase (integrin-linked kinase,ILK) gene on the phosphorylation of Akt and GSK3 尾 downstream substrates and on the growth and spontaneous metastasis of transplanted tumors. Methods Human tongue squamous cell carcinoma (TCA8113) cells were stably transfected with specific siILK expression vector and non-homologous control vector mediated by Lipofectamine 2000. The cells were divided into TCA8113 group (TCA8113 vector group) and TCA8113 siILK group (control group). Three groups of cells were injected into nude mice subcutaneously to construct transplanted tumor model for 5 weeks. The tumor quality was detected by routine pathological examination of lung and tumor histomorphology in nude mice, and the expression of p-Akt and p-GSK3 尾 in cancer cells in vitro and in vivo were detected by immunofluorescence technique. The angiogenesis in tumor tissue was observed. Results spontaneous metastatic tumor was found in lung tissue of TCA8113 group TCA8113 vector group and TCA8113 siILK group. The size of transplanted tumor cells in TCA8113 siILK group was smaller than that in other two groups, and the mitosis was less in TCA8113 siILK group than in the other two groups. The expression of p-Akt and p-GSK3 尾 in TCA8113 siILK group was significantly lower than that in other two groups in vivo and in vitro (P0.05). The tumor quality in TCA8113 siILK group was significantly lower than that in the other two groups (P0.05). The tumor inhibition rates were 84% and 92% in TCA8113 siILK group respectively. Compared with the other two groups, also significantly decreased (P0.05). Conclusion silencing the expression of ILK in TCA8113 tongue cancer cells can inhibit the phosphorylation of Akt and GSK3 尾, and the angiogenesis of xenografts, thus inhibit the growth of transplanted tumors.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)生物信息學(xué)研究室;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法細(xì)胞生物學(xué)及遺傳學(xué)教研室 分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙體牙髓科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81172424) 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院院辦課題(0800280016)~~
【分類號(hào)】：R739.86

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10 范萌;多態(tài)性MICA基因同種異體移植瘤模型的建立與研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：2229991