【摘要】：目的:初步探討發(fā)育期根端復(fù)合體(developing apical complex,DAC)條件培養(yǎng)基(DAC conditioned medium,DACCM)對脂肪干細胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)增殖和分化的影響。方法:取出生20 d SD大鼠分離其下頜磨牙DAC,并采用組織塊聯(lián)合酶消化法培養(yǎng)DAC細胞;經(jīng)HE、免疫組化染色鑒定DAC后,收集原代培養(yǎng)的DAC細胞上清,分別用過濾和不過濾的方式制備不同條件培養(yǎng)基并用其對ADSCs進行培養(yǎng);分別于培養(yǎng)3、5、7 d各時間點,MTT法檢測ADSCs增殖能力;用堿性磷酸酶(ALP)試劑盒及反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測ADSCs的ALP蛋白活性及其基因的表達水平。結(jié)果:免疫組化染色顯示,培養(yǎng)的DAC細胞CK-14、vimentin均為陽性表達;DACCM-未濾培養(yǎng)組ADSCs的增殖活性、ALP蛋白活性以及ALP基因表達水平均高于單純α-MEM培養(yǎng)組和DACCM-過濾培養(yǎng)組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:不經(jīng)過濾的DAC細胞上清制備的條件培養(yǎng)基對ADSCs增殖、分化的促進作用更明顯。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of (DAC conditioned medium,DACCM on the proliferation and differentiation of adipose stem cells (adipose tissue-derived stem cells,ADSCs). Methods: the DAC, of mandibular molars was isolated from 20 day old SD rats and DAC cells were cultured by tissue mass and enzyme digestion. The supernatants of DAC cells were collected after DAC was identified by HE, immunohistochemical staining. ADSCs was cultured in different condition culture medium by filtration and unfiltration, and the proliferation ability of ADSCs was detected by MTT assay at each time point of 57-day culture. Alkaline phosphatase (ALP) kit and reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) were used to detect ALP protein activity and gene expression of ADSCs. Results: the results of immunohistochemical staining showed that the positive expression of CK-14,vimentin in DAC cells was positive, and the activity of ADSCs and the expression of ALP gene were higher in cultured DAC cells than those in 偽 -MEM culture group and DACCM- filtration culture group. The difference was statistically significant (P0.05). Conclusion: the conditioned medium prepared by the supernatant of unfiltered DAC cells can promote the proliferation and differentiation of ADSCs.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;安徽醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙周科 安徽省口腔疾病研究中心實驗室;安徽醫(yī)科大學(xué)人獸共患病安徽省重點實驗室;
【基金】：安徽省自然科學(xué)基金資助項目(1308085MH130)
【分類號】：R781.4

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2204221