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骨形態(tài)發(fā)生蛋白6對張應力下大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的影響

發(fā)布時間:2018-07-23 13:58
【摘要】:目的:探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白-6(BMP-6)對張應力作用下大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMMSCs)成骨向分化的影響。方法:應用四點彎曲加力系統(tǒng)對體外分離培養(yǎng)大鼠BMMSCs施加不同大小的周期單一張應力60min,2h后檢測檢測內(nèi)源性BMP-6的表達量,同時檢測堿性磷酸酶、骨鈣素表達量和進行成骨細胞轉(zhuǎn)錄因子-2mRNA定量分析。然后對體外分離培養(yǎng)轉(zhuǎn)染人BMP-6復制缺陷型病毒的大鼠BMMSCs施加4000μstrain的周期單一張應力60min,2h后檢測成骨標志表達。結(jié)果:隨著張應力的增大,BMP-6的表達逐漸增強,同時成骨能力亦增強,但2000μstrain以后BMP-6的表達與成骨能力均下降。4000μstrain條件下2h后轉(zhuǎn)染人BMP-6基因的大鼠BMMSCs各項成骨標志因子的檢測明顯強于轉(zhuǎn)染空白病毒。結(jié)論:適當?shù)膹垜纱龠MBMP-6表達上調(diào)和BMMSCs骨向分化,上調(diào)BMP-6的表達可以恢復過大張應力所致的成骨能力下降。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) on the osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs) under tensile stress. Methods: the expression of endogenous BMMSCs and alkaline phosphatase were detected by applying four point bending system to the isolated and cultured rat BMMSCs in vitro under a single stress of 60 mins for 2 min and alkaline phosphatase (ALP) at the same time. Osteocalcin expression and osteoblast transcription factor-2 mRNA were quantitatively analyzed. Then the rat BMMSCs transfected with human BMP-6 replication-deficient virus was isolated and cultured in vitro, and the expression of osteogenic marker was detected by single stress of 4000 渭 strain for 2 h. Results: with the increase of tensile stress, the expression of BMP-6 was gradually increased, and the osteogenic ability was also increased. However, after 2000 渭 strain, the expression of BMP-6 and the osteogenic ability of rat BMMSCs decreased significantly. The detection of osteogenic markers of rat BMMSCs transfected with human BMP-6 gene 2 h after transfection of BMP-6 gene was significantly stronger than that of blank virus transfection. Conclusion: appropriate tensile stress can promote the up-regulation of BMP-6 expression and the differentiation of BMMSCs bone, and up-regulate the expression of BMP-6 can restore the osteogenic ability of excessive tension stress.
【作者單位】: 南華大學附屬郴州市第一人民醫(yī)院口腔科;南華大學轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究所;
【基金】:國家自然基金(編號:81301651) 郴州市科技局項目(編號:CZ2013067)
【分類號】:R782

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號:2139634

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