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FGF8輔助牙源性上皮誘導(dǎo)hDPSCs分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓細(xì)胞

發(fā)布時間:2018-06-27 03:03

  本文選題:成纖維細(xì)胞生長因子 + 成人牙髓干細(xì)胞。 參考:《中國病理生理雜志》2017年04期


【摘要】:目的:研究成纖維細(xì)胞生長因子8(FGF8)對成人牙髓干細(xì)胞(hDPSCs)定向分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓組織的影響。方法:首先分離、克隆培養(yǎng)hDPSCs,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物鑒定hDPSCs;礦化液中添加50μg/L的FGF8誘導(dǎo)hDPSCs分化,通過real-time PCR檢測分化后的細(xì)胞中牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)、堿性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)和核心結(jié)合因子α1(Cbfa-1)在mRNA水平的表達(dá);E11.5小鼠牙源性上皮聯(lián)合FGF8與hDPSCs細(xì)胞團(tuán)重組,再將組織塊種植于裸鼠腎囊膜下培養(yǎng),通過DNA原位雜交鑒定成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓細(xì)胞的來源。結(jié)果:成功分離培養(yǎng)hDPSCs,其表面標(biāo)志物CD29和CD90呈陽性表達(dá);經(jīng)FGF8誘導(dǎo)的hDPSCs形成較明顯的礦化結(jié)節(jié),并且牙本質(zhì)特異性蛋白DSPP、BSP及Cbfa-1表達(dá)量上調(diào);E11.5小鼠牙源性上皮聯(lián)合FGF8可以誘導(dǎo)hDPSCs分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓細(xì)胞。結(jié)論:FGF8能夠輔助牙源性上皮定向誘導(dǎo)hDPSCs分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓細(xì)胞,并形成牙本質(zhì)及牙髓腔結(jié)構(gòu)。
[Abstract]:Aim: to study the effect of fibroblast growth factor 8 (FGF8) on the differentiation of adult dental pulp stem cells (hDPSCs) into odontoblast and pulp tissue. Methods: firstly, hDPSCswere isolated, cloned and cultured, hDPSCswere identified by flow cytometry, 50 渭 g / L FGF8 was added to mineralized solution to induce the differentiation of hDPSCs. The expression of dentin sialophosphate protein (DSPP), alkaline phosphatase (ALP), bone sialoprotein (BSP) and core binding factor 偽 1 (Cbfa-1) in differentiated E11.5 mouse odontogenic epithelium combined with recombination of FGF8 and hDPSCs were detected by real-time. The tissue blocks were cultured under the capsule of kidney capsule of nude mice, and the origin of odontoblast and dental pulp cells were identified by DNA in situ hybridization. Results: the positive expression of CD29 and CD90 on the surface markers of hDPSCswas observed, and the mineralized nodules of hDPSCs induced by FGF8 were observed. In addition, the expression of DSPP- BSP and Cbfa-1 up-regulated the odontogenic epithelium of E11.5 mice combined with FGF8, which could induce the differentiation of hDPSCs into odontoblast and dental pulp cells. Conclusion: FGF8 can assist odontogenic epithelium to induce the differentiation of hDPSCs into odontoblast and dental pulp cells, and form dentin and dental pulp cavity structure.
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;濰坊市中醫(yī)院腦病康復(fù)科;濰坊醫(yī)學(xué)院口腔教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81441107) 山東省自然科學(xué)基金資助項目(No.ZR2013HQ019) 山東省高等學(xué)?萍加媱濏椖(No.J15LK09) 濰坊醫(yī)學(xué)院大學(xué)生科技創(chuàng)新項目(No.KX2016002)
【分類號】:R781

【參考文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2072417

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