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NICD過表達對人牙髓干細胞細胞增殖及細胞遷移的影響

發(fā)布時間:2018-06-22 06:09

  本文選題:牙髓干細胞 + NICD; 參考:《牙體牙髓牙周病學雜志》2014年04期


【摘要】:目的:利用Notch1的胞內(nèi)段(Notch1 intracellular domain,NICD)基因過表達載體建立穩(wěn)定過表達NICD的人牙髓干細胞(dental pulp stem cells,DPSCs)株,觀察NICD過表達對DPSCs增殖、遷移能力的影響。方法:構(gòu)建含NICD過表達的慢病毒顆粒,并將其轉(zhuǎn)染至DPSCs構(gòu)建過表達NICD的細胞株(DPSCs/NICD);以DPSCs/NICD為實驗組,正常細胞株(DPSCs/wt)和空病毒轉(zhuǎn)染的空載組(DPSCs/vector)作為對照,通過RT-PCR和Western Blot檢測NICD mRNA及其蛋白的表達;細胞免疫熒光觀察NICD在DPSCs上的表達位置;CCK8法檢測細胞的增殖情況;流式細胞技術(shù)檢測細胞周期中S期的改變;Transwll檢測細胞的遷移能力。結(jié)果:與DPSCs/wt組和DPSCs/vector組相比,DPSCs/NICD組的NICDmRNA及其蛋白表達水平均明顯增強(P0.05),表達位置在胞膜、胞漿及胞核;細胞的增殖速度加快、細胞周期中S期比例升高、遷移能力增強。結(jié)論:NICD過表達使DPSCs細胞的增殖和遷移能力增強。
[Abstract]:Aim: to study the effect of NICD overexpression on the proliferation and migration of human dental pulp stem cells (dental pulp stem cells) by using the over expression vector of Notch1 intracellular domain NICD gene. Methods: the lentivirus particles containing NICD overexpression were constructed and transfected into DPSCs to construct NICD overexpressed cell lines (DPSCs / NICD), DPSCsr / NICD was used as experimental group, normal cell line (DPSCsrwt) and empty virus transfected group (DPSCsP vector) were used as control group. The expression of NICD mRNA and its protein was detected by RT-PCR and Western blot, the expression of NICD in DPSCs was detected by cell immunofluorescence and the proliferation of DPSCs was detected by CCK8 method. The changes of S phase in cell cycle were detected by flow cytometry and the migration ability of cells was detected by Transwll. Results: compared with DPSCS / wt group and DPSCS / vector group, the expression level of NICD mRNA and protein in DPSCs / NICD group was significantly increased (P0.05), the expression location was in the cell membrane, cytoplasm and nucleus, the proliferation rate was accelerated, the S phase proportion of cell cycle was increased, and the migration ability was enhanced. Conclusion the proliferation and migration of DPSCs cells were enhanced by the overexpression of the cell line.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院口腔科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81170934)
【分類號】:R780.2

【參考文獻】

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本文編號:2051890


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