本文關(guān)鍵詞：羊膜干細(xì)胞源性髁突軟骨細(xì)胞特征性鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《遵義醫(yī)學(xué)院》 2016年

羊膜干細(xì)胞源性髁突軟骨細(xì)胞特征性鑒定

楊曄  

【摘要】：目的:采用Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng),誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(HAMSCs)向髁突軟骨樣細(xì)胞分化,建立軟骨細(xì)胞種子庫,為顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病的治療探索新的途徑。方法:1.采用機(jī)械分離和二步酶消化法分離乳兔髁突軟骨細(xì)胞(MCCs),差速貼壁法純化細(xì)胞,鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原免疫組化染色鑒定MCCs。2.MCCs和HAMSCs以4:1的比例分別置于Transwell培養(yǎng)皿的上、下室,誘導(dǎo)培養(yǎng)7d、14d、21d,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原免疫組化染色鑒定誘導(dǎo)后細(xì)胞,并計(jì)算平均陽性染色面積。結(jié)果:1.原代MCCs細(xì)胞為短梭、多角形,呈鋪路石狀生長,并逐漸聚集成簇,細(xì)胞生長周期約10d;二代MCCs細(xì)胞呈多角形、三角形,細(xì)胞質(zhì)紫紅染,細(xì)胞核藍(lán)染,呈橢圓形或圓形,可見1-2個(gè)核仁;甲苯胺藍(lán)染色見細(xì)胞質(zhì)均勻藍(lán)染,可見藍(lán)紫色異染顆粒,細(xì)胞核深藍(lán)染;Ⅱ型膠原免疫組化染色可見細(xì)胞質(zhì)棕褐色異染顆粒,細(xì)胞核復(fù)染后呈深藍(lán)染;生長周期縮短為5d。2.Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)中,誘導(dǎo)組共培養(yǎng)7d,下層細(xì)胞仍呈長梭狀,甲苯胺藍(lán)和Ⅱ型膠原免疫組化染色偶見異染顆粒;共培養(yǎng)14d,下層細(xì)胞形態(tài)多樣,甲苯胺藍(lán)染色和Ⅱ型膠原免疫細(xì)胞化學(xué)染色可見細(xì)胞內(nèi)異染顆粒逐漸增多;共培養(yǎng)21d,下層細(xì)胞呈多角形,類MCCs樣形態(tài),甲苯胺藍(lán)染色和Ⅱ型膠原免疫細(xì)胞化學(xué)染色呈陽性;對(duì)照組細(xì)胞未見異染顆粒。3.Ⅱ型膠原平均陽性染色面積,MCCs組為35.8%,誘導(dǎo)組下層細(xì)胞平均陽性染色面積隨共培養(yǎng)時(shí)間延長逐漸增加,至21天達(dá)到33.6%,與MCCs組比較無明顯差異(P0.05);對(duì)照組下層細(xì)胞平均陽性染色面積僅為1.4%,與MCCs組和誘導(dǎo)組比較有明顯差異(P0.05)。結(jié)論:1.通過兩次酶消化法可以獲得高質(zhì)量的MCCs。2.應(yīng)用Transwell共培養(yǎng)體系可以誘導(dǎo)HAMSCs向MCCs分化。3.應(yīng)用Transwell共培養(yǎng)體系誘導(dǎo)HAMSCs向軟骨樣細(xì)胞的最佳共培養(yǎng)時(shí)間為21d。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R782
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳林松;史宏?duì)N;;胰酶聯(lián)合Ⅱ型膠原酶法體外分離培養(yǎng)軟骨細(xì)胞的分析[J];中國醫(yī)藥;2014年10期

2 Asim K Bag;Santhosh Gaddikeri;Aparna Singhal;Simms Hardin;Benson D Tran;Josue A Medina;Joel K Curé;;Imaging of the temporomandibular joint: An update[J];World Journal of Radiology;2014年08期

3 徐斌;周亮;王英明;錢三祥;;同種異體脫鈣骨與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞關(guān)節(jié)腔內(nèi)共培養(yǎng):與同腔軟骨性狀的對(duì)比[J];中國組織工程研究;2014年08期

4 黃林劍;張秀麗;李妙然;李輝;鄧亞偉;蔡協(xié)藝;;生長期兔髁突軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及其生物學(xué)特性研究[J];中國口腔頜面外科雜志;2014年01期

5 龐希寧;劉曉玉;施萍;王竟;林學(xué)文;張殿寶;譚麗萍;;人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞儲(chǔ)備庫的構(gòu)建[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年11期

6 周峰;王英振;張海寧;呂成昱;續(xù)宗耀;;人軟骨細(xì)胞培養(yǎng)上清誘導(dǎo)臍血間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化[J];中國組織工程研究;2013年40期

7 楊興華;彭琳;劉云生;邢再臣;李海峰;李玉慶;劉敏;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病[J];中國組織工程研究;2013年19期

8 劉小榮;張?bào)?高武;盧青云;孟研;;新西蘭兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離培養(yǎng)與鑒定的實(shí)驗(yàn)研究[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年19期

9 陳寧杰;張偉;梁曉琴;楊彪炳;;不同濃度的Ⅱ型膠原酶對(duì)軟骨細(xì)胞的影響[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2011年12期

10 詹興旺;姜艷;王文良;;SPIO標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)的研究[J];中國矯形外科雜志;2011年09期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郭偉;程敬亮;;MRI在顳下頜關(guān)節(jié)盤移位診斷中的應(yīng)用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合影像學(xué)雜志;2016年04期

2 楊明吾;閆虎;李志峰;;自體血清培養(yǎng)新西蘭大白兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞[J];臨床與病理雜志;2016年06期

3 王貴玲;仇麗鴻;龐希寧;;間充質(zhì)干細(xì)胞的旁分泌作用及其在顱頜面骨再生治療中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];中國實(shí)用口腔科雜志;2016年06期

4 沈曉玲;劉敏;黃海霞;王頻;;三維數(shù)字化解剖測量顳下頜關(guān)節(jié)的骨性結(jié)構(gòu)[J];中國組織工程研究;2016年20期

5 劉藝昌;周敬;;同種異體和異種來源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成軟骨修復(fù)喉軟骨缺損[J];中國組織工程研究;2016年07期

6 胡錦濤;賀兵;趙玉濛;成博倫;張楓;張燕;殷紅;;一株小麥內(nèi)生真菌的鑒定及其發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)兔軟骨細(xì)胞的影響[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2015年11期

7 呂順;周軍杰;謝曉濤;陳賢奇;高文武;劉鋮;張磊;;軟骨組織工程種子細(xì)胞獲取培養(yǎng)及鑒定研究進(jìn)展[J];中國骨與關(guān)節(jié)雜志;2015年11期

8 王月福;于錫欣;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在微損傷環(huán)境中修復(fù)骨不連[J];中國組織工程研究;2015年41期

9 朱志堅(jiān);于燕妮;陶欣;鄧超男;;沉默Smo基因?qū)Υ笫笤浌羌?xì)胞增殖與凋亡的影響[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2015年09期

10 朱志堅(jiān);于燕妮;陶欣;;慢病毒及脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染原代軟骨細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];貴州醫(yī)藥;2015年08期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃林劍;張秀麗;李妙然;李輝;鄧亞偉;蔡協(xié)藝;;生長期兔髁突軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及其生物學(xué)特性研究[J];中國口腔頜面外科雜志;2014年01期

2 張衛(wèi)東;章方彪;史宏?duì)N;;組織工程氣管細(xì)胞-支架復(fù)合體構(gòu)建策略的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年20期

3 余強(qiáng);李浩鵬;郭雄;;MicroRNA在軟骨損傷退變中作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中國骨傷;2012年06期

4 戎麗娟;池穎;楊少光;陳丹丹;陳芳;徐淑霞;張冬雷;馬鳳霞;盧士紅;韓忠朝;;干擾素γ對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及免疫調(diào)節(jié)功能的影響[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2012年02期

5 霍雙枝;施萍;龐希寧;;人羊膜負(fù)載人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)SD大鼠皮膚創(chuàng)面愈合的影響[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2011年06期

6 李彩虹;施萍;龐希寧;;表皮生長因子影響人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞遷移的機(jī)制[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2011年06期

7 馮學(xué)濤;田少奇;孫康;張積華;張才龍;劉世海;周明;呂江濤;;血小板裂解液對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外成軟骨分化的影響[J];中國修復(fù)重建外科雜志;2011年10期

8 高楊;李立;冉江華;陳奕明;蔣益舟;;兩種分離臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的方法比較[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年19期

9 ;Culture and Identification of Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells[J];Chinese Medical Sciences Journal;2010年04期

10 胡志俊;胡波;唐德志;張有為;王世偉;王擁軍;;兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分離培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)特征[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年46期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 焦巖濤,馬緒臣,于世鳳,張震康;人髁突軟骨細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞庫建立[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2001年06期

2 段小紅,吳軍正,劉斌;永生化髁突軟骨細(xì)胞軟骨表型的特征[J];口腔頜面外科雜志;2002年01期

3 張旻,王美青,王景杰;絲裂原活化蛋白激酶通路在髁突軟骨細(xì)胞力學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中的作用[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2004年06期

4 方澤強(qiáng);馬緒臣;;顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病髁突軟骨細(xì)胞雌激素受體β差異表達(dá)的研究[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年05期

5 李煌;李松;吳拓江;徐蕓;陳揚(yáng)熙;;周期性單軸壓應(yīng)力下大鼠髁突軟骨細(xì)胞早期應(yīng)答機(jī)制的蛋白質(zhì)組學(xué)初探[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年09期

6 李鋒;陳永進(jìn);張旻;李瑋;;髁突軟骨細(xì)胞受壓力刺激前后的差異蛋白質(zhì)電泳分析[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2008年05期

7 張躍蓉;韋紀(jì)英;龐磊;;人胚髁突軟骨細(xì)胞的分離和培養(yǎng)[J];貴州醫(yī)藥;2009年09期

8 吳拓江;李煌;馬巧玲;王文梅;;大鼠髁突軟骨細(xì)胞雙向電泳圖譜的比較[J];上海口腔醫(yī)學(xué);2010年04期

9 黃林劍;張秀麗;李妙然;李輝;鄧亞偉;蔡協(xié)藝;;生長期兔髁突軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及其生物學(xué)特性研究[J];中國口腔頜面外科雜志;2014年01期

10 李季;髁突軟骨細(xì)胞分離及體外快速擴(kuò)增[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);2000年18期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張旻;王美青;王景杰;;機(jī)械壓力及細(xì)胞內(nèi)鈣釋放通道阻滯對(duì)顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨細(xì)胞骨架影響的研究[A];第七屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

2 李煌;吳拓江;張翔宇;馬巧玲;華子春;;體內(nèi)壓應(yīng)力刺激下青春生長期大鼠髁突軟骨細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)觀察以及差異蛋白質(zhì)組學(xué)觀察[A];第九次全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及(牙合)學(xué)研討會(huì)論文匯編[C];2012年

3 張旻;陳永進(jìn);呂昕;周強(qiáng);吳舜;宋紅;;雌激素及壓力對(duì)髁突軟骨細(xì)胞聯(lián)合效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];第七次全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)研討會(huì)暨《顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病及口頜面疼痛的基礎(chǔ)與臨床進(jìn)展》國家級(jí)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2008年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李煌;體外壓應(yīng)力下髁突軟骨細(xì)胞早期應(yīng)答機(jī)制的蛋白質(zhì)組學(xué)初探[D];四川大學(xué);2005年

2 段小紅;永生化兔髁突軟骨細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

3 萬啟龍;間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH（1-34）對(duì)髁突軟骨細(xì)胞雙重效應(yīng)的研究[D];武漢大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬素偉;周期蛋白A2對(duì)功能性下頜前伸中髁突軟骨細(xì)胞周期的調(diào)控作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張建麗;靜磁場對(duì)SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞生物學(xué)特性的影響研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

3 楊曄;羊膜干細(xì)胞源性髁突軟骨細(xì)胞特征性鑒定[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

4 鄭菲菲;靜壓力對(duì)髁突軟骨細(xì)胞形態(tài)和IGF-I及其受體表達(dá)影響的研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2005年

5 王倩;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）在大鼠髁突軟骨細(xì)胞中的作用以及力學(xué)刺激對(duì)ERS的調(diào)控研究[D];南京大學(xué);2013年

6 曹雪;iNOS及cNOS在SD大鼠髁突軟骨細(xì)胞分化過程中作用的研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2007年

7 孟韡;TGF-β2對(duì)SD大鼠髁突軟骨細(xì)胞表型維持作用的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

8 李艦;SD乳鼠髁突軟骨細(xì)胞和鼻中隔軟骨細(xì)胞生物學(xué)特性的比較研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

9 鄭如松;張應(yīng)力刺激對(duì)大鼠髁突軟骨細(xì)胞col-Ⅱ和AGG mRNA表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2012年

10 黃慧萍;低氧對(duì)大鼠髁突軟骨細(xì)胞HIF-1α，VEGF，aggrecanase-1和TIMP-3的表達(dá)的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：205126