本文選題：多能干細(xì)胞 + 細(xì)胞代次��； 參考：《北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年01期

【摘要】：目的:研究不同代次誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)在增殖及向牙周定向分化能力上的區(qū)別,為今后深入研究和可能的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。方法:復(fù)蘇不同代次(P5、P10、P15、P20)人牙齦成纖維細(xì)胞來源的i PSCs,觀察細(xì)胞形態(tài)并比較其增殖能力,進(jìn)一步將各代次細(xì)胞形成擬胚體,于含生長分化因子-5(growth/differentiation factor-5,GDF-5)的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)分化14 d,同時(shí)分別設(shè)置未誘導(dǎo)自發(fā)分化組為陰性對(duì)照,茜素紅染色觀察礦化結(jié)節(jié)并半定量分析鈣鹽沉積量,qRT-PCR及免疫熒光染色分別檢測牙周相關(guān)基因及蛋白的表達(dá),評(píng)價(jià)各代次間分化能力的差異。結(jié)果:不同代次的i PSCs均具有很強(qiáng)的體外增殖能力,經(jīng)牙周定向誘導(dǎo)的細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞樣生長,茜素紅染色可形成"礦化"結(jié)節(jié),細(xì)胞鈣鹽沉積量較自發(fā)分化組顯著增高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P5:t=2.125,P=0.003;P10:t=2.246,P=0.021;P15:t=3.754,P=0.004;P20:t=3.933,P=0.002),但相同誘導(dǎo)條件下不同代次間鈣鹽沉積量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(牙周定向誘導(dǎo)組:F=2.365,P=0.109;自發(fā)分化對(duì)照組:F=2.901,P=0.067),此外,相同代次細(xì)胞中誘導(dǎo)組牙周相關(guān)標(biāo)記物的表達(dá)均高于對(duì)照組且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但不同代次間的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(骨涎蛋白:F=0.9267,P=0.450;波形蛋白:F=0.9171,P=0.455;牙骨質(zhì)蛋白1:F=2.129,P=0.137)。結(jié)論:不同代次不會(huì)影響i PSCs的增殖及分化能力,體外長期培養(yǎng)的i PSCs易于擴(kuò)增,較高代次者經(jīng)誘導(dǎo)仍可高效定向分化,適合作為牙周組織工程的種子細(xì)胞。
[Abstract]:Objective: to study the difference of proliferation and periodontal directional differentiation between different generations of induced pluripotent stem cells in order to provide a theoretical basis for further research and possible clinical application. Methods: I PSCs derived from human gingival fibroblasts were resuscitated from different generations of P5, P10, P15 and P20. The morphology of the cells was observed and their proliferative abilities were compared. The differentiation was induced in the medium containing growth factor -5 (GDF-5) for 14 days, and the group without spontaneous differentiation was set as negative control. Alizarin red staining was used to observe the mineralized nodules and semi-quantitative analysis of calcium salt deposition. The expression of periodontal related genes and proteins were detected by RT-PCR and immunofluorescence staining respectively, and the differentiation ability of different generations was evaluated. Results: I PSCs of different generations had strong proliferative ability in vitro. The cells induced by periodontal orientation grew like fibroblasts, and alizarin red staining could form "mineralized" nodules. Cell calcium deposition was significantly higher than that of spontaneous differentiation group (P 5: t 2. 125% P0. 003) P10t1 2. 246U P0. 021 + P15: t 3. 754 + P0. 004 + P20: t 3. 933 P0. 002, but there was no significant difference in calcium deposition between different generations under the same inducement condition (periodontal orientation induction group: F 2. 365U P0. 109; spontaneous control group: F 2. 901P 0.067, P 0. 067), but under the same inducement condition, there was no significant difference in the amount of calcium deposit between different generations (P = 2. 365P0. 109); the spontaneous control group: F2. 901P0. 067, in addition, there was no significant difference in the amount of calcium deposition between different generations under the same inducement. In the same generation, the expression of periodontal markers in the induction group was higher than that in the control group, and the difference was statistically significant (P 0.05), but there was no significant difference in protein expression among different generations (bone sialoprotein: F0. 9267 P0. 450; vimentin 1: F0. 9171, P0. 455; cementum protein: 1: F2. 129, P0. 137). Conclusion: the ability of proliferation and differentiation of I PSCs is not affected by different generations. The long term cultured I PSCs are easy to expand, and the higher generation can still be induced to differentiate effectively, which is suitable for periodontal tissue engineering seed cells.
【作者單位】： 北京大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院·口腔醫(yī)院牙周科口腔數(shù)字化醫(yī)療技術(shù)和材料國家工程實(shí)驗(yàn)室口腔數(shù)字醫(yī)學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81470739)資助~~
【分類號(hào)】：R781

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 曾建春;樊粵光;劉建仁;曾意榮;李顯彭;;“腎主骨、生髓”與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化的研究[J];中國中醫(yī)骨傷科雜志;2009年12期

2 胡峰;趙勁民;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化研究中蛋白質(zhì)組學(xué)的地位與應(yīng)用[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年14期

3 陳子興;吳偉林;謝文潔;;小鼠紅白血病細(xì)胞被誘導(dǎo)向終末期定向分化的觀察[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1986年01期

4 姬西團(tuán);章翔;費(fèi)舟;張劍寧;劉衛(wèi)平;蔣曉帆;林綠標(biāo);王西玲;梁景文;宋蕾;曹銳峰;潘灝;;不同促細(xì)胞分裂因子對(duì)人神經(jīng)干細(xì)胞定向分化的影響[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2006年01期

5 朱丹雁,樓宜嘉;藥物介導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞體外定向分化為心肌細(xì)胞[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2002年03期

6 董海,周之德,戴力揚(yáng);骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨定向分化的研究進(jìn)展[J];創(chuàng)傷外科雜志;2003年05期

7 李清剛;徐秀紅;王質(zhì)剛;劉文虎;李哲先;;犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為內(nèi)皮細(xì)胞的研究[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2007年06期

8 陳麗萍;郭力;馬順利;張靜;李振飛;姜紅;;骨形成蛋白對(duì)少突膠質(zhì)祖細(xì)胞體外定向分化的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年14期

9 傅杰;蔣迎九;姜蓉;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為心臟瓣膜構(gòu)成細(xì)胞及鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年27期

10 陳國玲;肖瑛;杜洋洋;劉艷麗;劉執(zhí)玉;張晗;;共培養(yǎng)誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的定向分化[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2013年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 華松;武浩;張涌;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化的研究進(jìn)展[A];全國首屆動(dòng)物生物技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

2 葉能勝;馮雪;張榮利;羅國安;王義明;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向分化為心肌細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要論文集[C];2004年

3 洪天配;;微小RNA在胰島β細(xì)胞定向分化中的調(diào)控作用及其潛在機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

4 李剛;;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與定向分化[A];寧夏醫(yī)學(xué)會(huì)第八屆骨科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

5 許敏華;歐麗麗;朱丹雁;樓宜嘉;俞永平;;組合庫內(nèi)六個(gè)化合物促胚胎干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞活性篩選[A];中國藥學(xué)會(huì)應(yīng)用藥理專業(yè)委員會(huì)第三屆學(xué)術(shù)會(huì)議、中國藥理學(xué)會(huì)制藥工業(yè)專業(yè)委員會(huì)第十三屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨2008生物醫(yī)藥學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2008年

6 朱靜;馮川;李莉;鄧兵;張曉萍;;干擾組蛋白乙酰化引發(fā)MSCs定向分化特定蛋白的異常表達(dá)[A];遺傳學(xué)進(jìn)步與人口健康高峰論壇論文集[C];2007年

7 李莉;岳鳳鳴;李航;趙秀軍;蔣彥;高福祿;;人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞定向分化為視細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];中國解剖學(xué)會(huì)2013年年會(huì)論文文摘匯編[C];2013年

8 謝松濤;陳璧;陶克;;人臍血來源內(nèi)皮細(xì)胞的純化、鑒定與定向分化的初步研究[A];第四屆全國燒傷救治專題研討會(huì)燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

9 孫雪榮;葛堅(jiān);段山;宋革;江儒章;段永恒;劉炳乾;;視網(wǎng)膜前體細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

10 謝松濤;陳璧;陶克;;人臍血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞的純化、鑒定與定向分化的初步研究[A];第六屆全國燒傷救治專題研討會(huì)論文匯編[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 白毅;浙大學(xué)者發(fā)現(xiàn)干細(xì)胞體外定向分化藥物調(diào)控關(guān)鍵靶點(diǎn)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

2 張中橋;西京醫(yī)院一項(xiàng)研究闡明白血病發(fā)病機(jī)制[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 安星蘭;豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)體系優(yōu)化、iPS誘導(dǎo)及miRNA介導(dǎo)的定向分化研究[D];吉林大學(xué);2016年

2 王啟偉;恒河猴骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的定向分化及其機(jī)制[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 姜敏;皮膚毛囊神經(jīng)嵴干細(xì)胞的黑素定向分化和衰老機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王娟;NF-κB抑制劑PDTC對(duì)人牙髓干細(xì)胞定向分化影響及其分子機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 鄧伏雪;心肌細(xì)胞間接接觸誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

3 傅杰;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化心臟瓣膜構(gòu)成細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

4 杜U，

本文編號(hào)：2007135