通體發(fā)光光纖聯(lián)合PDT抑制致齲菌及炎癥因子變化的實驗研究
發(fā)布時間:2018-05-24 00:53
本文選題:通體發(fā)光光纖 + 光動力療法 ; 參考:《天津醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文
【摘要】:目的:1.實驗創(chuàng)新使用通體發(fā)光光纖應(yīng)用于光動力療法(Photodynamic Therapy,PDT)中,研究對含有變形鏈球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)的大鼠口腔菌斑生物膜的抑制效果,以及連續(xù)多次治療相對于單次治療是否具有更顯著的菌斑抑制作用進(jìn)行探討,篩選出最適殺菌激光功率。2.研究在不同功率的通體發(fā)光光纖聯(lián)合PDT光照下,對于口腔頰、舌黏膜及牙齦軟組織的病理變化。3.從牙髓炎癥因子的角度分析,經(jīng)通體發(fā)光光纖一次及四次治療后的牙髓是否有炎癥反應(yīng),為進(jìn)一步論證抗菌光動力療法應(yīng)用于動物模型上的安全性提供理論支持。方法:實驗一:使用S.mutans菌液感染大鼠磨牙,建立致齲模型。將40只大鼠分為五組,17mW PDT、34mW PDT、68mW PDT作為實驗組,0.2%氯己定為陽性對照組、0.9%生理鹽水為陰性對照組。650nm半導(dǎo)體激光器連接通體發(fā)光光纖,以40μg/mL的血卟啉單甲醚(Hematoporyrin monomethyl Ether,HMME)為光敏劑對大鼠牙齒避光孵育五分鐘,配合不同功率的參數(shù)光照90 s,進(jìn)行為期四周的抗菌光動力療法,平板菌落計數(shù)。實驗二:實驗一結(jié)束后,取大鼠口腔軟組織進(jìn)行HE染色切片,觀察口腔頰、舌黏膜及牙齦軟組織的改變,是否有血管擴(kuò)張、水腫、炎癥細(xì)胞浸潤、組織壞死等病理變化。實驗三:通體發(fā)光光纖聯(lián)合PDT照射大鼠磨牙90s,平均功率34mW。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)在一次和四次治療后的1天、3天、7天、14天分別測量大鼠牙髓內(nèi)TNF-α和IL-1β的表達(dá)變化。結(jié)果:1.平板菌落計數(shù)結(jié)果顯示:S.mutans菌斑生物膜的抑制與時間因素?zé)o關(guān),與處理因素相關(guān)。17mW PDT、34mW PDT、68mW PDT、0.2%氯己定組與生理鹽水組比較菌落對數(shù)值顯著減少(P0.05)。34mWPDT、68mW PDT的抑菌效果顯著高于17mW PDT組、0.2%氯己定組(P0.05),且68mW PDT組殺菌效果最顯著。但是34mW PDT與68mW PDT菌落計數(shù)相比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),17mWPDT組與氯己定組的差異也無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.組織病理學(xué)檢測顯示:68mW PDT組舌黏膜輕度毛細(xì)血管擴(kuò)張,17mW、34mW PDT、氯己定組及對照組大鼠的頰、舌、牙齦黏膜均未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤,水腫,充血,壞死。3.炎癥因子測定結(jié)果顯示:TNF-α:PDT治療一次后的表達(dá)量1、3、7、14天不具有顯著差異(P0.05)。四次治療后顯示第一天表達(dá)量最高,但差異不具有顯著性(P0.05),隨后逐漸降低。T4-D14表達(dá)量達(dá)到最低(110.86±22.45),且明顯低于T-Control(335.62±25.41),具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。IL-1β:PDT治療一次后1、3、7、14天的表達(dá)量沒有明顯變化,不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。四次處理后I4-D1、I4-D3、I4-D7與I-Control相比較顯著升高(P0.05)。I4-D1達(dá)到最高(1162.72±29.36),隨后表達(dá)量下降。I4-D14無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1.應(yīng)用通體發(fā)光光纖于PDT對大鼠致齲模型的S.mutans的菌斑生物膜有顯著的抑制作用。在為期四周的實驗里,抑菌效果并沒有隨著治療次數(shù)增加而具有更顯著的療效。HMME-PDT抑菌作用與激光功率密切相關(guān)。HMME-PDT配合通體發(fā)光光纖的抑制大鼠致齲模型中S.mutans菌斑微生物膜的最佳功率是34mW,且抑菌效果優(yōu)于0.2%氯己定溶液。2.通體發(fā)光光纖聯(lián)合PDT在平均功率17mW、34mW、68mW光照下以及0.2%氯己定溶液對口腔黏膜組織的不會造成不可逆性損傷。3.通體發(fā)光光纖聯(lián)合PDT抑菌對牙髓的生物學(xué)刺激,從炎癥因子分泌的角度來看,一次治療是安全的。連續(xù)四次治療(治療間隔為一周)導(dǎo)致TNF-α分泌抑制,以及IL-1β表達(dá)量升高的現(xiàn)象發(fā)生。使用該參數(shù)進(jìn)行多次治療可能會增加牙髓炎癥、或者牙髓免疫抑制的風(fēng)險。多次使用光動力抑制致齲菌的安全參數(shù)以及合適治療間隔仍需進(jìn)一步討論。
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本文編號:1927060
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