兩種重編程系統(tǒng)誘導人牙源性多潛能干細胞的對比研究
發(fā)布時間:2018-05-02 18:28
本文選題:多潛能干細胞 + 乳頭; 參考:《重慶醫(yī)學》2017年01期
【摘要】:目的對比研究兩種人牙源性多潛能干細胞重編程體系的特點。方法分別利用STEMCCA慢病毒/飼養(yǎng)層和仙臺病毒/基質(zhì)膠兩種重編程系統(tǒng),將人根尖乳頭干細胞重編程為iPS細胞,比較兩種方法的誘導效率、誘導工作量、iPS細胞非整倍體核型比例、外源性基因消除難易程度等情況。結果STEMCCA重編程體系需要制備飼養(yǎng)層細胞MEF,重編程效率約為0.1%,后期經(jīng)Cre-Loxp酶切技術可得到無外源性轉錄基因的iPS細胞。仙臺病毒重編程體系為無飼養(yǎng)層培養(yǎng),基質(zhì)膠制備方便、標準統(tǒng)一,重編程效率約為0.7%,明顯高于STEMCCA系統(tǒng)(P0.05),外源性病毒和轉錄基因經(jīng)自然傳代后逐漸消除。結論與STEMCCA系統(tǒng)相比,仙臺病毒/基質(zhì)膠體系更適于人牙源性iPS細胞的誘導。
[Abstract]:Objective to compare the characteristics of two human odontogenic pluripotent stem cell reprogramming systems. Methods using two reprogramming systems of STEMCCA lentivirus / feeder layer and Sendai virus / matrix gel, human root tip papillary stem cells were reprogrammed into iPS cells, and the induction efficiency of the two methods, the induced workload, and the ratio of the aneuploidy karyotype of iPS cells were compared. The STEMCCA reprogramming system needs to prepare the feeder layer cell MEF, the reprogramming efficiency is about 0.1%, and the iPS cells without exogenous gene can be obtained by Cre-Loxp enzyme cutting technique in the later period. The reprogramming system of Sendai virus reprogramming system is no feeder layer culture, the preparation of matrix glue is convenient, the standard is unified and recompiled. The process efficiency was about 0.7%, obviously higher than the STEMCCA system (P0.05). The exogenous virus and the transcriptional gene were gradually eliminated after the natural passage. Conclusion compared with the STEMCCA system, Sendai virus / matrix glue system is more suitable for the induction of human odontogenic iPS cells.
【作者單位】: 云南省第一人民醫(yī)院/昆明理工大學附屬醫(yī)院口腔內(nèi)科;昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81360161) 云南省教育廳基金資助項目(2015Y153)
【分類號】:R781
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本文編號:1835002
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