本文選題：唾液腺 + 腺樣囊性癌�。� 參考：《河北醫(yī)科大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的: 唾液腺腺樣囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma, SACC）是唾液腺最為常見的惡性腫瘤之一，發(fā)生于唾液腺的任何部位。腫瘤惡性程度高，容易沿神經、血管浸潤性生長，術后常復發(fā)，也可發(fā)生肺、骨、腦和肝等遠處轉移。由于腫瘤的惡性生物學行為，直接威脅患者生命，目前術后尚無有效的治療方法。 B淋巴細胞瘤/白血病-2（B cell lymphoma/leukemia-2, bcl-2）基因是一種抑制細胞凋亡的癌基因，在眾多凋亡相關基因中bcl-2是目前最受關注的基因之一。定位于人的濾泡性淋巴瘤和正常B淋巴細胞染色體18號21區(qū)，含3個外顯子和2個內含子，可編碼26kD的bcl-2α和22kD的bcl-2β兩種蛋白，其中bcl-2α是抑制凋亡作用發(fā)揮的主要蛋白，為線粒體膜的整合蛋白。它最先是在人類濾泡型淋巴瘤中發(fā)現(xiàn)，被認為是人類濾泡型淋巴瘤的細胞遺傳學標志，但后來研究發(fā)現(xiàn)，它在人類腫瘤中有廣泛意義。在許多腫瘤組織中，bcl-2基因的表達水平通常會發(fā)生改變，它與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后有關。 RANi（RNA interference）即RNA干擾，是目前應用較廣的一種基因研究技術，是由外源或內源的雙鏈RNA（double strand RNA, dsRNA）導入細胞而引起的與dsRNA同源的mRNA降解，從而抑制其相應的基因表達。RNAi具有高特異性、高效性、高穩(wěn)定性、可遺傳性、可擴散性和濃度時間依賴性等特點。利用RNAi技術，，在RNA水平特異性抑制特定基因的表達，使特定基因獲得功能性喪失，從而成為研究基因功能的良好工具。 本實驗采用RNA干擾（RNAi）技術特異性沉默人唾液腺腺樣囊性癌SACC-83細胞中的bcl-2基因，探討基因沉默后SACC-83細胞的形態(tài)變化及凋亡情況。 方法： 1重組腺病毒的構建與鑒定：武漢淅瑪生物技術公司受本實驗室委托，設計并構建重組腺病毒包裹的shRNA-bcl-2，使用雙酶切進行鑒定。 2細胞培養(yǎng)：采用含15%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液培養(yǎng)人唾液腺腺樣囊性癌細胞株SACC-83。 3細胞轉染及滴度測定：將腺病毒介導的shRNA真核表達載體shRNA-bcl-2（沉默組）和shRNA-HK（陰性對照）轉染SACC-83細胞，沉默其bcl-2基因的表達（最佳腺病毒滴度MOI為腺病毒

本文編號：1799309