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《河北聯(lián)合大學(xué)》 2014年

透鈣磷石涂層浸提液溶入不同濃度鍶后聯(lián)合應(yīng)用的生物學(xué)評價

員麗穎  

【摘要】：目的通過體外細胞毒性、增殖實驗和動物毒性試驗及相關(guān)基因表達的檢測，對透鈣磷石涂層浸提液中溶入不同濃度鍶后聯(lián)合應(yīng)用的生物學(xué)行為進行初步評估，為其實驗及臨床發(fā)展提供了可能。 方法本實驗采用電化學(xué)沉積法對純鈦進行表面改性處理，在其表面制備出透鈣磷石涂層，用掃描電子顯微鏡觀察涂層試樣的表面形貌，并制備成浸提液，通過向浸提液中加入不同濃度的鍶元素，分組并發(fā)揮共同作用。將摻有不同含量鍶濃度的透鈣磷石試樣浸提液直接作用于MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細胞，通過采用CCK-8法，檢測各個濃度組的細胞毒性及增殖情況。通過倒置相差顯微鏡，觀察各個濃度組下成骨細胞的生長形態(tài)，并綜合研究以確定實驗分組；通過向SD大鼠體內(nèi)注射摻有不同含量鍶濃度的透鈣磷石試樣浸提液，行體外急性毒性試驗、熱原試驗以及皮膚刺激實驗，，觀察注射即刻、24小時、48小時、72小時內(nèi)實驗組和對照組大鼠的呼吸、體溫、有無中毒死亡反應(yīng)及體質(zhì)量變化，大鼠注射點部位的皮膚有無水腫及紅斑，以初步評估生物相容性；通過吉姆薩染色和實時定量PCR技術(shù)，觀察并檢測不同濃度分組下成骨細胞株的生長形態(tài)及相關(guān)基因的表達情況。數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理，所有數(shù)據(jù)均為均數(shù)±標準差（x±s），細胞毒性確定分組試驗和PCR實驗時各組間的比較采用單因素方差分析，動物毒性試驗行重復(fù)測量資料的方差分析，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果1通過改變透鈣磷石涂層試樣浸提液中鍶的含量，所制成的不同含鍶濃度組，細胞毒性分級為≤2級，顯示了鍶的摻入并沒有產(chǎn)生明顯的細胞毒性，確定實驗分組為純鈦浸提液組、透鈣磷石涂層浸提液組、摻鍶量分別為1％、5％、10％的透鈣磷石涂層浸提液組。2急性毒性試驗、熱原試驗和皮膚刺激試驗的結(jié)果顯示，實驗組與對照組在試驗中的反應(yīng)大體相同，沒有明顯的差異，說明該材料的摻鍶浸提液對大鼠無明顯毒性，無致熱作用、無刺激性。能夠初步評估該生物材料與鍶元素聯(lián)合應(yīng)用的作用模式對鼠是安全無毒的，具有良好的生物相容性。3吉姆薩染色結(jié)果表明，1％組的成骨細胞形態(tài)能發(fā)生較多的增殖；實時定量PCR的結(jié)果表明，在成骨細胞培養(yǎng)3天后，骨鈣素（OCN）在透鈣磷石組和1％組均高于其余組，且兩者間無顯著性差異。骨橋蛋白（OPN）在透鈣磷石組和1％組均低于其余組，且兩者間無顯著性差異；5天后，OCN在摻鍶濃度為1％組的成骨細胞的表達量顯著高于其余任意組，且其余組之間無顯著性差異。OPN在摻鍶濃度為5％組和10％組的成骨細胞的表達量顯著性高于其余組，透鈣磷石組與1％組無顯著性差異。 結(jié)論電化學(xué)沉積法制得的透鈣磷石涂層試樣的浸提液中溶入1％、5％、10％的鍶元素共同作用，1％組這個模式作用下的透鈣磷石生物材料具有良好的生物相容性，能更好的促進成骨細胞的增殖。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河北聯(lián)合大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R783.1
【目錄】：

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【參考文獻】

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本文編號：174378