本文選題：花青素　切入點：抗癌　出處：《遺傳》2014年06期

【摘要】：文章從內(nèi)蒙古野生藍莓(Vaccinium uliginosum Lim)中提取花青素,觀察其對口腔癌細胞株KB的增殖及凋亡的作用,探討其作用機制與p53基因甲基化的相關(guān)性。利用含0.1%鹽酸的甲醇提取花青素,用高效液相色譜-質(zhì)譜(High performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS)鑒定花青素的成分。利用四甲基偶氮唑藍(Methylthiazolyl-tetrazolium,MTT)比色法、流式細胞術(shù)、免疫熒光法、免疫細胞化學(xué)法和Western blot法分析藍莓花青素對KB細胞增殖、細胞周期、細胞凋亡和p53蛋白表達的影響;利用甲基化特異性PCR法(Methylation-specific PCR,MSP)分析藍莓花青素誘導(dǎo)細胞凋亡與p53基因甲基化的關(guān)系。結(jié)果顯示,內(nèi)蒙古自治區(qū)的野生藍莓中至少存在14種花青素成分;藍莓花青素呈劑量依賴的方式抑制KB細胞增殖,誘導(dǎo)細胞周期阻滯在G2/M期,而且能誘導(dǎo)細胞凋亡;藍莓花青素處理后Caspase-9蛋白和細胞色素C的表達明顯增加;Western blot結(jié)果表明藍莓花青素可以誘導(dǎo)KB細胞中p53蛋白表達上調(diào);MSP結(jié)果表明隨藍莓花青素濃度增加,未甲基化的p53的比例增加,說明p53的甲基化狀態(tài)有所下調(diào)。
[Abstract]:Anthocyanins were extracted from wild blueberry Vaccinium uliginosum Lims in Inner Mongolia. The effects of anthocyanins on proliferation and apoptosis of oral cancer cell line KB were observed, and the relationship between the mechanism of anthocyanin and p53 gene methylation was discussed. Anthocyanins were extracted by methanol containing 0.1% hydrochloric acid. The anthocyanins were identified by high performance liquid chromatography-mass chromatography-mass HPLC-MS.Methylthiazolyl-tetrazoliumium (MTT) colorimetric assay, flow cytometry, immunofluorescence, immunocytochemistry and Western blot were used to determine the proliferation of KB cells. Effects of cell cycle, cell apoptosis and p53 protein expression. The relationship between apoptosis induced by blueberry anthocyanin and p53 gene methylation was analyzed by methylation-specific PCR. There are at least 14 anthocyanins in wild blueberries in Inner Mongolia Autonomous region, and blueberry anthocyanins inhibit the proliferation of KB cells in a dose-dependent manner, induce cell cycle arrest in G _ 2 / M phase, and induce apoptosis. The expression of Caspase-9 protein and cytochrome C increased significantly after treatment with blueberry anthocyanin. The results showed that blueberry anthocyanin could induce the up-regulation of p53 protein expression in KB cells. The results showed that the expression of p53 protein increased with the concentration of blueberry anthocyanin. The proportion of unmethylated p53 increased, indicating that the methylation of p53 was down-regulated.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)分子生物學(xué)研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(編號:81341139) 內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金項目(編號:2013MS11100)資助
【分類號】：R739.8

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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【相似文獻】

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本文編號：1676576