貝伐單抗聯(lián)合紫杉醇對黏液表皮樣癌裸鼠移植瘤影響的實驗研究
發(fā)布時間:2018-03-25 12:04
本文選題:黏液表皮樣癌 切入點:紫杉醇 出處:《昆明醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文
【摘要】:目的:研究貝伐單抗聯(lián)合紫杉醇對裸鼠黏液表皮樣癌移植瘤的治療作用,探討貝伐單抗和紫杉醇的抑瘤作用,研究靶向治療在黏液表皮樣癌中的應(yīng)用,為臨床治療黏液表皮樣癌提供理論依據(jù)。 材料和方法:1.構(gòu)建裸鼠黏液表皮樣癌移植瘤模型。通過BALB/c裸鼠右腋下注射1×106個黏液表皮樣癌細(xì)胞,觀察成瘤情況。成瘤兩周后隨機分為四組,每組7只裸鼠,對各組裸鼠進(jìn)行藥物干預(yù),分別為空白組(生理鹽水0.2m1/只/日)、紫杉醇組(紫杉醇10mg/kg/3d)、貝伐單抗組(貝伐單抗5mg/kg/d)、聯(lián)合組(紫杉醇10mgmg/kg/3d+貝伐單抗5mg/kg/d)。記錄裸鼠體重變化及瘤體尺寸,3天/次。兩周后開始注射藥物,四周時處死,剝離瘤體,稱重計算抑瘤率,繪制腫瘤生長曲線。2.在荷瘤鼠身上測量移植瘤的長徑(a)、短徑(b)、高(c)。在處死裸鼠后通過排水法測出移植瘤近似真實體積,比較目前常用的四種移植瘤體積計算方法(π abb/6、abb/2、aab/2、πabc/6)與移植瘤真實體積之間的差異。3.制作石蠟切片,TUNNEL標(biāo)記檢測各組腫瘤細(xì)胞凋亡率。4.免疫組化法檢測各組中腫瘤微血管密度的情況及各組的腫瘤微血管形成擬態(tài)的表達(dá)。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果: 1.裸鼠體重變化情況:實驗結(jié)束時各組裸鼠體重分別為空白組:24.32±2.22g;紫杉醇組20.83±1.70g;貝伐單抗組22.36±3.02g;和聯(lián)合組23.00±3.03g。其中除聯(lián)合組與貝伐單抗組差異不顯著外(P0.05),其余各組間比較差異均有顯著性(P0.05)。 2.瘤體重量及抑瘤率結(jié)果:四個組的瘤體重量分別是:空白組2.13±0.71g;紫杉醇組0.90±0.54g;貝伐單抗組1.51±0.69g;聯(lián)合組0.85±0.35g?瞻捉M與三個實驗組之間瘤重存在顯著性差異(P0.05),其余各組間比較瘤重差異無顯著性(P0.05)。紫杉醇組、貝伐單抗組和聯(lián)合組的腫瘤抑瘤率分別是57.75%;29.58%和60.09%。 3通過比較各組瘤體體積發(fā)現(xiàn),在體經(jīng)π abc/6公式計算得到的移植瘤體積結(jié)果與真實值之間差異無顯著性(P0.05)。 4.移植瘤體積變化情況及體積大小比較:各實驗組中,僅空白組體積在藥物干預(yù)后其變化較大,其余各組在藥物干預(yù)后各組體積變化較小。各組處死時移植瘤體積為空白組2000±577.4mm3;紫杉醇組1212.5±352.1mm3;貝伐單抗組1380±540.3mm3;聯(lián)合組1120±840.3mm3?瞻捉M與各實驗組間比較差異有顯著性(P0.05),其余各組間比較差異無顯著性(P0.05)。 5.移植瘤細(xì)胞凋亡結(jié)果:四個組的IHS分別為:空白組3.60±1.04;紫杉醇組6.00±0.71;貝伐單抗組3.40±1.94;聯(lián)合組6.40±2.51?瞻捉M與紫杉醇組和聯(lián)合組比較時(P≤0.05),差異有顯著性,而與貝伐單抗組比較時(P0.05),差異無顯著性。紫杉醇組與聯(lián)合組比較時候(P0.05),差異無顯著性,而與貝伐單抗組比較時(P0.05),差異有顯著性。 .6各組移植瘤中MVD及VM表達(dá)情況:四個組的MVD分別為:空白組空白組27.8±4.0;紫杉醇組24.4±5.6;貝伐單抗組15.8±3.5;聯(lián)合組14.2±2.2,空白組與紫杉醇組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),貝伐單抗組與聯(lián)合組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。其余各組間比較差異變化均具有顯著性(P0.05),同時黏液表皮樣癌內(nèi)存在血管擬態(tài)現(xiàn)象。 結(jié)論1.紫杉醇或貝伐單抗均能抑制黏液表皮樣癌裸鼠皮下移植瘤的生長,單獨使用時紫杉醇效果較貝伐單抗明顯,二者聯(lián)合使用時效果最佳。2.貝伐單抗主要通過降低腫瘤內(nèi)微血管密度達(dá)到抗腫瘤效果,而紫杉醇則主要是通過誘導(dǎo)腫瘤內(nèi)細(xì)胞凋亡發(fā)揮抗癌作用,二者聯(lián)用時可將藥物作用發(fā)揮到最大。3..黏液表皮樣癌內(nèi)有三種血供模式即:內(nèi)皮依賴性血管和血管生成擬態(tài),以及馬賽克血管。4.裸鼠皮下移植瘤體積計算最佳方法為πabc/6。
[Abstract]:Objective: To study the therapeutic effect of bevacizumab combined with paclitaxel on the xenograft of mucoepidermoid carcinoma in nude mice, and to explore the anti-tumor effect of bevacizumab and paclitaxel, and to study the application of targeted therapy in mucoepidermoid carcinoma, so as to provide a theoretical basis for the clinical treatment of mucoepidermoid carcinoma.
Materials and methods: 1. construction of xenograft model of mucoepidermoid carcinoma in nude mice. BALB/c mice through right axillary injection of 1 x 106 mucoepidermoid carcinoma cells, the tumor growth was observed. Tumor formation after two weeks were randomly divided into four groups, each group of 7 mice, drug intervention groups were divided into blank group (nude mice. Saline 0.2m1/ per day), paclitaxel group (paclitaxel 10mg/kg/3d), bevacizumab group (bevacizumab combined group (5mg/kg/d), paclitaxel 10mgmg/kg/3d+ 5mg/kg/d bevacizumab). Noted changes in body weight and tumor size, 3 days / times. Two weeks after the start of injection drugs around at the tumor body. Weighed to calculate the inhibition rate, tumor growth curve of.2. in tumor bearing mice measured the tumor diameter (a), short diameter (b), high (c). The mice were killed after the drainage measure tumor approximation of the real volume calculation method for the four kinds of tumor volume ( PI abb/6, abb/2, aab/2, n abc/6) and the difference between the true volume of transplanted tumor.3. in paraffin, TUNNEL markers for the detection of apoptosis of tumor cells was detected by.4. immunohistochemical tumor and tumor microvessel density in each group of angiogenesis mimicry expression. Statistical analysis was performed using SPSS13.0 software.
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本文編號:1663038
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